肺炎病原学检测范文

2022-06-16

第一篇:肺炎病原学检测范文

手足口病病例病原学检测结果分析

了解2010年广州地区手足口病病例标本中CoxA16和EV71的感染情况。 方法 采集临床诊断为手足口病患者的粪便,用Real-time PCR同时检测总肠道病毒、CoxA16和EV71。 结果 共检测手足口病病例标本1271例,总肠道病毒阳性率为61.32%;其中,CoxA16阳性率占29.82%,EV71阳性率占70.18%。阳性标本主要分布于0~4岁患者阶段,总肠道病毒、CoxA16和EV71阳性数分别为69

4、209和485。结论CoxA16和EV71为广州地区2010年手足口病的主要病原,EV71占多数,0~4岁儿童是感染的主要人群。

手足口病( hand foot and mouth disease, HFMD)由肠道病毒感染引起,主要表现为口腔黏膜溃疡性疱疹及四肢末端水疱样皮疹,主要病原体为肠道病毒71型(human enterovirus 71 , EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxackievirus A16,CA16)。2010年度,广州市疾病预防控制中心检测手足口病病例粪便标本1271份,现将检测结果报告如下。

1.材料与方法

1.1 标本来源 标本为医院诊断为手足口病患者的粪便,共计1271份。标本均由医院或者各级疾病预防控制中心送检。

1.2 方法

1.2.1 样品前处理 粪便用生理盐水混悬、浸泡,2000r/min离心10min,取上清液。

1.2.2RNA的提取经前处理的样本,使用QIAGEN® Viral RNA试剂盒提取RNA。

1.2.3荧光定量PCR反应首先使用广州华银医药科技有限公司生产的总肠道病毒(pan EV)荧光PCR检测试剂盒检测。将总肠道病毒荧光定量PCR检测阳性的标本,使用硕士生物科技有限公司生产的手足口EV71型/CoxA16型病毒RNA双重荧光PCR检测试剂盒,分型检测。

2. 结果

2.1荧光定量PCR结果在检测的共1271份标本中,有778份标本肠道病毒阳性,总阳性率61.32%。

2.2 病原体分类在778份总肠道病毒阳性的标本中,CoxA16阳性232份,阳性率29.82%;EV71阳性546份,阳性率70.18%。

2.3 病例时间分布 2010年广州地区,病例标本送样集中于4~7月和10月,总肠道病毒、CoxA16和EV71检出的阳性数在4~7月为高峰期。

请将表横竖栏对调。

表1广州市2010年手足口病例数各自然月分布

1月 2月 3月 4月 5月 6月 7月 8月 9月 10月 11月 12月

样品总数 41 1 43 229 261 305 143 31 80 603 45 37

总肠道病毒阳性数 13 0 23 176 152 188 114 13 41 28 17 13

CoxA16阳性数 4 0 7 69 36 31 37 1 16 18 8 5

EV71阳性数 9 0 16 107 116 157 77 12 25 10 9 8

2.4 患者年龄分布在送检标本的患者中,最小年龄为3个月,最大为58岁,患者年龄主要集中在1~4岁,标本数为1099份,占标本总数的86.47%。总肠道病毒、CoxA16和EV71阳性数均以1~4岁最多,其他年龄阶段较少,见表2。

将表2横竖栏对调

表2阳性标本在各年龄阶段的分布

年龄/岁 0~4 5~14 >14

总肠道病毒阳性数 694 51 6

CoxA16阳性数 209 20 2

EV71阳性数 485 30

43. 讨论

手足口病是一种常见的较温和的出疹性疾病,主要感染0~3 岁的儿童。引起该病散发及暴发或流行的2大主要病原是EV71和CA16。我国自1980 年开始有HFMD 的报道。1985年以前,CA16是该病的唯一病原,但最近的研究结果显示,EV71 在HFMD的病原学中占有越来越重要的地位⑴。根据广州市疾病预防控制中心统计,2010年度,广州地区共报告手足口病临床及实验室诊断病例35339例,居丙类传染病发病数第1位;其中报告53例重症病例和3例死亡病例;2010年报告病例数较2009年同期的14066例上升151.24%。手足口病已经成为广州地区危害儿童身体健康的重要疾病。

手足口病的传染源是患者和健康带病毒者,患者在出现症状前数天其血液、鼻咽分泌物和粪便中均存在病毒,因而在潜伏期就具有很强的传染性⑵。对2010年广州地区手足口病例的送检标本进行分析,总肠道病毒阳性率为61.32%,较广州市疾病预防控制中心在2008年检出的总肠道病毒9.63%的阳性率⑶大大增高,可能与2008年期间,安徽阜阳发生HFMD后,特别是5月2日卫生部将HFMD纳入丙类法定传染病报告管理后,家长的就诊意识和医务人员的诊断意识提高,使得HFMD的病例数和标本数骤增,大部分病例虽然具有部分HFMD的临床特征,却并非由肠道病毒引起⑷,造成了2008年阳性率偏低有关。

根据2010年检测结果显示,引起广州地区手足口病散发及暴发或流行的2大主要病原仍是EV71和CA16。EV71的阳性数高于CoxA16的阳性数,是流行的主要病原体,也与广州周边地区的发病相类似⑸。

从发病时间来看,手足口病样品检测的高峰都处于4~7月间,另外,在10月左右会有一个小高峰。这与手足口病发病的季节性为夏秋2季相吻合,检测送样的高峰与发病的高峰吻合。在中国其他地区也有类似的流行高峰⑹⑺。

从患者年龄来看,阳性标本主要集中在0~4岁的患者中,这与以往研究结果相似⑻.在针对法兰克福大学医院696例非手足口病患者的CoxA16和EV71血清抗体的流行病学研究中发现,1~4岁阶段,CoxA16和EV71血清抗体阳性率分别为27.0%和12.0%,到5岁后阳性率分别迅速增高到52.0%和49.0%⑼。这说明,由于在1~4岁阶段的幼儿缺乏相应抗体,使得他们对CoxA16和EV71普遍易感。因此,0~4岁儿童成为手足口病防控的重点人群。

第二篇:2017年北京公卫助理医师:病原学检测模拟试题

本卷共分为1大题50小题,作答时间为180分钟,总分100分,60分及格。

一、单项选择题(共50题,每题2分。每题的备选项中,只有一个最符合题意)

1.观察法的缺点或局限性在于它的(C ):

A 有效性 B 可靠性 C 说服力 D 时间弹性

2.主要作用于S期的抗肿瘤药是

A.甲氨蝶呤

B.白消安

C.氮芥

D.长春新碱

E.丝裂霉素C

正确答案:A

3.易引起血癌的有机溶剂是。

A.甲苯、二甲苯

B.苯

C.三硝基甲苯

D.苯胺、联苯胺

E.苯二胺、硝基氯苯

4.毒物作用于机体,使机体产生超出其维持平衡状态能力的生物学变化的最小暴露水平或剂量称为( a )

A.阈浓度

B.阈上浓度

C.阈下浓度

D.急性阈浓度

E.慢性阈浓度

5. 体外抗菌活性最强的喹诺酮类药物是

A.诺氟沙星

B.氧氟沙星

C.环丙沙星

D.洛美沙星

E.司帕沙星

正确答案:C

6. 生物地球化学性疾病的发生主要是由于( )

A.人体摄入微量元素过多所致

B.人体摄入微量元素过少所致

C.地质地理原因使当地居民摄入微量元素过多或过少所致

D.环境破坏对地质条件影响使人体摄入矿物质异常所致

E.饮食中某种元素含量异常所致

7. 预防职业中毒的中心环节是。

A.通风排毒

B.降低空气中毒物浓度

C.个人防护

D.安全生产管理

E.个人卫生

8. 治疗急性阿米巴痢疾和阿米巴肝脓肿应首选

A.二氯尼特

B.依米丁

C.氯喹

D.甲硝唑

E.乙酰胂胺

正确答案:D

9. 非概率抽样包括( D )

A 方便抽样、立意抽样、雪球抽样、分层抽样

B 方便抽样、立意抽样、雪球抽样、系统抽样

C 方便抽样、定额抽样、雪球抽样、分层抽样

D 方便抽样、立意抽样、雪球抽样、定额抽样

10. 白消安对哪种肿瘤效果显著

A.急性淋巴细胞性白血病

B.急性粒细胞性白血病

C.慢性淋巴细胞性白血病

D.慢性髓性白血病

E.急性髓性白血病

正确答案:D

11. 下列关于问题和答案设计说法不正确的是( B )

A 对于事先不知道问题答案的情况可设置开放式问题

B 对于等级问题,开放式问题比封闭式问题更能获得相对真实的回答

C 封闭式问题更便于统计处理和分析

D 封闭式问题可将不相干的回答减少到最小程度

12. 目前认为,不属于“心身疾病”范畴的是( E )

A.冠心病

B.支气管哮喘

C.溃疡病

D.恶性肿瘤

E.病毒性肝炎

13. 喹诺酮类的抗菌机制是抑制细菌的

A.二氢叶酸还原酶

B.二氢叶酸合成酶

C.转肽酶

D.DNA回旋酶及拓扑异构酶Ⅳ

E.RNA聚合酶

正确答案:D

14. 原形从肾脏排泄率最高的喹诺酮类药物是

A.诺氧沙星

B.环丙沙星

C.氟罗沙星

D.氧氟沙星

E.依诺沙星

正确答案:D

15. 社会因素影响健康的基本规律和特点是 ( D )

A、特异性、恒常性、积累性和交互作用。

B、泛影响性、阶段性、积累性和交互作用。

C、泛影响性、恒常性、积累性和单独作用。

D、泛影响性、恒常性、积累性和交互作用。

16. 用社会医学研究方法选择课题时要注意的原则中不包括( C )

A 需要性原则 B 创造性原则 C 特异性原则 D 可行性原则

17. 下列哪项不属于概率抽样( C )

A 分层整群抽样 B 系统抽样 C 偶遇抽样 D 单纯随机抽样

18. 文化影响健康的特征是(B )

A 无形性、本源性、社会性、软约束 B无形性、本源性、稳定性、软约束

C 无形性、本源性、稳定性、社会性 D 无形性、本源性、稳定性、继承性

19. 环境卫生工作中常见的二次污染物如( )

A.二氧化硫和颗粒物

B.铅、镉、汞、酚

C.甲基汞、光化学烟雾

D.氮氧化物、碳氢化物

E.环境内分泌干扰物

20. 关于概率抽样方法的误差大小,下列排列正确的是( C )

A 单纯随机抽样<分层抽样<系统抽样<整群抽样

B 单纯随机抽样<系统抽样<分层抽样<整群抽样

C 分层抽样<系统抽样<单纯随机抽样<整群抽样

D 分层抽样<单纯随机抽样<系统抽样<整群抽样

21. 疾病的地区分布特征主要与下列哪些因素有关

A.地形地貌

B.气象条件

C.风俗习惯

D.经济状况

E.以上均是

[正确答案]:E

解题思路:每一种疾病在地区分布上都具有自身的特征,这些特征主要与地质出理环境,气象条件、居民的风俗习惯和社会经济状况等因素有关

22. 环境卫生学的基本理论为( )

A.人与环境之间的统一性

B.环境因素对机体影响的作用机制

C.机体对环境的适应能力

D.阐明环境因素对健康影响的复杂性

E.环境中有益因素和有害因素对机体的综合作用

23. 可使肾素分泌减少的药物

A.肾上腺素

B.米力农

C.普萘洛尔

D.硝苯地平

E.依那普利

正确答案:C

24. 对铜绿假单胞菌有较强作用的药物是

A.氯唑西林

B.美西林

C.阿莫西林

D.哌拉西林

E.替莫西林

正确答案:D解题思路:本题考查半合成青霉素的抗菌作用特点。哌拉西林抗菌谱与羧苄西林相似,抗菌活性强于羧苄西林,对铜绿假单胞菌有较强的作

用。故选D

25. 社会因素影响健康的基本规律和特点是 ( D )

A、特异性、恒常性、积累性和交互作用。

B、泛影响性、阶段性、积累性和交互作用。

C、泛影响性、恒常性、积累性和单独作用。

D、泛影响性、恒常性、积累性和交互作用。

26.为避免哌唑嗪的”首剂现象”,可采取的措施是

A.空腹服用

B.低钠饮食

C.首次剂量减半 D.舌下含用

E.首次剂量加倍

正确答案:C

27.HOCI和OCI-的杀菌效果为( c )。

A. HOCI的杀菌效果与OCI-相同

B. HOCI的杀菌效果与OCI-低80倍

C. HOCI的杀菌效果与OCI-高80倍

D. HOCI的杀菌效果与OCI-低20倍

E. HOCI的杀菌效果与OCI-高20倍

28.健康危险因素评价的基本步骤是( B )

A 确定危险因素暴露程度评价危险特征评价剂量-反应评价

B 确定危险因素暴露程度评价剂量-反应评价危险特征评价

C 确定危险因素危险特征评价暴露程度评价剂量-反应评价

D 确定危险因素暴露程度评价危险特征评价危险因素的量化

29.进行大气样品采集时,用多孔玻板吸收管主要适用于哪种物质( e )。

A.烟

B.粉尘

C.总悬浮颗粒物

D.可吸入颗粒物 E.气态、蒸气态和雾态物质

30. 观察法的缺点或局限性在于它的( D ):

A 有效性 B 可靠性 C 说服力 D 时间弹性

31. 用于抗艾滋病病毒的药物是

A.利巴韦林

B.扎那米韦

C.齐多夫定

D.阿昔洛韦

E.碘苷

正确答案:C解题思路:本题考查抗病毒药物的临床应用。齐多夫定是美国FDA第一个批准用于艾滋病病毒感染的药物,利巴韦林即病毒唑,为广谱抗病毒

药,阿昔洛韦对疱疹病毒疗效突出,扎那米韦是流感病毒神经氨酸酶抑制剂,碘苷为人工合成的抗病毒药,局部用于治疗眼部或皮肤疱疹病毒和牛痘病毒感

染故选C。

32. 洋地黄毒苷的血浆半衰期为

A.40小时

B.5~7天

C.19小时

D.48小时

E.23小时 正确答案:B

33. 服用磺胺类药物时加服碳酸氢钠的目的是

A.增强抗菌效果

B.加快药物吸收

C.防止过敏反应

D.防止药物排泄过快

E.碱化尿液,增加磺胺药的溶解性

正确答案:E

34. 不属于抗高血压药物的是

A.肾素抑制药

B.血管收缩药

C.血管紧张素转化酶抑制药

D.α、β受体阻断药

E.利尿药

正确答案:B

35. 下列关于危险度评定论述错误的是。

A.对有害因素潜在作用进行定性、定量评价

B.估算在一般接触条件下可能造成健康损害的概率和程度

C.为制订法定职业病提供依据 D.寻求可接受危险度

E.预测职业性有害因素的远期效应

36. 结膜炎和角膜炎的药物是

A.磺胺嘧啶银

B.磺胺醋酰

C.磺胺米隆

D.柳氮磺吡啶

E.磺胺嘧啶

正确答案:B

37. 蛋白结合率最低,易透过各种组织的磺胺药是

A.磺胺脒

B.磺胺异恶唑

C.周效磺胺

D.磺胺嘧啶

E.磺胺甲基异噁唑

正确答案:D

38. 下列哪项属于概率抽样( B )

A 偶遇抽样 B 系统抽样 C 立意抽样 D 雪球抽样

39. DNA复制过程中,不需要下列哪一种酶

A.引物酶

B.解旋酶

C.RNA合成酶

D.DNA聚合酶

E.DNA连接酶

40. 静脉都扩张的降压药是

A.硝苯地平

B.硝普钠

C.肼屈嗪

D.米诺地尔

E.双肼屈嗪

正确答案:B

41. 仅对浅表真菌感染有效的药物

A.灰黄霉素

B.制霉菌素

C.克霉唑

D.伊曲康唑

E.酮康唑

正确答案:A

42. 下列哪项不是文化的基本特征( C )

A 历史性 B 现实性 C 创造性 D 渗透性

43. 普萘洛尔降压机制不包括

A.减少肾素分泌,抑制肾素血管紧张素.醛固酮系统

B.减少去甲肾上腺素释放

C.阻Ca内流,松弛血管平滑肌

D.减少心排出量

E.阻断中枢β受体,使兴奋性神经元活动减弱

正确答案:C

44. 主要用于疟疾病因性预防的药物是

A.乙胺嘧啶

B.奎宁

C.氯喹

D.青蒿素

E.伯氨喹

正确答案:A解题思路:本题考查抗疟药的临床应用。乙胺嘧啶对原发性红细胞外期疟原虫有抑制作用,是病因性预防首选药

45. 患者自述,他工作场所条件很差,无防尘设施,此工人最可能患何种类型尘肺

A.晚发性矽肺 B.矽肺

C.煤肺

D.尘肺

E.速发性矽肺

[正确答案]:E

解题思路:由于持续吸入高浓度粉尘,而无防护条件,在接尘2年内发病,称速发性矽肺。

46. 关于就诊率下列叙述正确的是( A )

A 两周就诊率是反映居民对医疗卫生服务利用情况的指标

B 两周就诊率是指调查前两周内就诊的人(次)数与患病人数的比率

C 两周患者就诊率是指调查前两周内就诊的人(次)数与调查人数的比率

D 两周患者未就诊率是指调查前两周内未就诊的人(次)数与调查人数的比率

47. 刺激性气体对机体的作用特点是。

A.对眼睛和呼吸道粘膜的刺激作用

B.对上呼吸道的刺激作用

C.对皮肤的损伤作用

D.刺激呼吸道出现咳嗽、胸闷等

E.对肺脏产生刺激作用,引起肺水肿

48. 反映居民医疗卫生服务需要的常用指标有:( A )

A、两周患病率 B、两周患者未就诊率

C、两周就诊率

D、住院率

49. 下列关于问卷的信度和效度叙述正确的是( D )

A 信度不高,效度不一定不高 B 信度高,效度也高

C 效度不高,信度也不高 D 效度高,信度也高

50. 关于患病率下列说法不正确的是( C )

A 两周患病率是指调查前两周内患病人(次)数与调查人数的比率

B 两周患病率主要是通过家庭健康询问调查得到的

C 慢性病患病率是指调查前一年内患慢性病人(次)数与调查人数的比率

D 两周患病率和慢性病患病率都是反映居民医疗服务需要量的指标

第三篇:临床常见病原体检测

第一节 标本的采集运送、实验室评价和检查方法

一、病原检验标本采集与送检的基本要求

标本的正确采集和运送是实验室取得正确结果的前提。但对标本采集的方法和时间,标本的来源,实验室常不能直接加以控制,因此,临床医师和护士必须对此予以高度重视。细菌检验标本采集与送检的基本原则包括:

(一)送检报告单应注明被检人的姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源及检验目的、抗生素使用情况,使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。

(二)尽量在抗生素使用前采集标本。

(三)在采集血液,脑脊液,穿刺液等标本时,应严格执行无菌操作,避免杂菌污染。

(四)标本采集后立即送到实验室,床边接种可提高病原菌的检出率。

(五)以拭子采集的标本如咽拭子,伤口拭子及时插入运送培养基送检,应采用吸水性好、不易干燥的材料取样。

(六)混有正常菌群的标本,如痰,尿液,伤口拭子,不可置肉汤培养基送检。

(七)盛标本容器须经灭菌处理,但不得使用消毒剂。

二、常见病原检验标本的采集送检方法

(一)血液与骨髓

1、通常采血部位为肘静脉,但感染灶附近血管采血,可提高阳性率。切忌在静滴抗菌药物的静脉处采集血标本。标本采集过程应严格无菌操作。

2、每次采血量为5-10ml,婴幼儿1-5ml,培养基与血液之比以10:1为宜。以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。

3、选择体温上升时采血可提高阳性率。对已用抗菌药物而又不能停药者,应在下次用药前采血。

4、每例至少采血两次,间隔时间据病情而定,以利于提高阳性率和区别感染菌和皮肤污染菌。

(二)尿液

尿液标本的采集应严格进行无菌操作。由于治疗药物多数通过尿液排泄,因此,应在用药前采集尿液,且以晨起第一次尿送检为宜。尿培养送检单上必须注明标本采集方法及抗生素使用情况。

1、中段尿采集:是临床上最常用的方法。采样前须以肥皂水和清水洗净尿道口,排出的尿液前段须弃去,而将中段或近后段的尿液留于无菌容器中。

2、导尿管采集尿液:可减少污染,但易引起逆行感染,除非必要,须避免用此方法。对留置导尿者,可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁,用无菌注射器斜穿管壁抽吸尿液,或消毒后解开接口,弃去导尿管前段尿液,留无污染的膀胱内尿液送检。不可从集尿袋的下端管口留取标本。

3、膀胱穿刺采集尿液:病人耻骨上皮肤消毒后,以无菌针筒作膀胱穿刺。此法主要用于尿液厌氧菌培养或中段尿采集困难的婴幼儿。尿液标本采集后,应立即送检和处理,耽搁时间不能超过两小时,否则,应置4℃冰箱保存,但最好也不要超过6小时。 (三)痰液

1、自然咳痰:清水反复漱口后用力咳嗽, 从呼吸道深部咳出新鲜痰液于无菌容器内送检。痰量极少者可用45℃10%氯化钠液雾化吸入导痰,一般以清晨第一口痰为好。

2、气管镜下采集法、气管穿刺法:可减少污染,但病人有一定的痛苦,不易接受和推广。

3、痰标本采集后应及时送检和处理,最好不超过1小时,室温下延搁数小时,定植于口咽部的非致病菌呈过度生长,而肺炎链球菌,流感嗜血杆菌等的检出率则明显下降。

(四)伤口烧伤创面与脓液

1、无菌生理盐水清洗病灶表面后,用无菌拭子取病灶深部的脓液和分泌物, 立即送检,或置运送培养基内送检。

2、对未溃破的脓肿直接用碘酒,酒精消毒皮肤后,以无菌注射器抽取脓液送检,也可以切开排脓时用无菌拭子采样。

(五)粪便

1、挑取有脓血粘液部分的新鲜粪便约2-3克盛于灭菌容器中送检,也可用拭子挑取粪便插入Cary-Blair运送培养基或PH7.0的磷酸盐甘油中送检,可提高病原菌的检出率。

2、对不易获取粪便者,如婴幼儿可用直肠拭子采集送检。

三、标本的质量评估标准

1) 标本及送检单上应注明被检人的姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源及检验目的、抗生素使用情况等,无患者信息及标识的不予接收。 2) 标本须及时送检,超过时限的标本不予接收。 3) 送检容器须完整,有容器破损或标本渗漏的不予接收。 4) 标本储存、运送方式不当的,不予接收。 5) 明显被污染的标本不予接收。 6) 标本量明显不足的标本不予接收。

7) 除血培养之外的同一天内重复申请检验的标本不予接收。

四、临床病原体检查方法 其主要手段包括:

1. 直接显微镜检查:重要的基本方法,常作为初步诊断但阳性率相对较低。 2. 特异性抗原检查:可作为早期快速诊断,但特异性是关键。 3. 核酸检查:近年来发展迅速,敏感性和特异性均较好。 4. 病原菌分离培养和鉴定:常为确诊的关键步骤,但常较费时。 5. 血清学检查:通过检测相应的特异性抗体以辅助诊断。

第二节 病原体耐药性检测

一、抗生素治疗的现状和存在的问题

1) 抗生素使用增加,疗效下降 2) 出现难以治疗的感染 3) 抗生素加剧细菌耐药性 4) 抗生素引起菌群失调,二重感染 5) 抗生素滥用,污染造成危害

二、细菌产生耐药的主要机制

1) 细菌水平和垂直传播耐药基因的整合子系统 2) 产生灭活抗生素的水解酶和钝化酶 3) 细菌抗生素作用靶位的改变 4) 细菌膜外排泵出系统 5) 细菌生物膜的形成

三、目前必须密切注视的几个世界性的耐药性问题

1) 耐青霉素G的肺炎链球菌(PRSP) 2) 耐苯唑青霉素的葡萄球菌(MRS)和对万古霉素敏感性降低的MRS株 3) 耐万古霉素的肠球菌(VRE)、葡萄球菌 4) 产青霉素酶的淋球菌

5) 产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌(ESBLS) 6) 多重耐药的铜绿假单胞菌、不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌

7) 持续高产染色体Ι型β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌

四、细菌的药物敏感试验 药敏试验的结果解释

1) 敏感(S):测试菌能被测定药物常规剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制或杀灭,即该菌引起的感染可以用推荐剂量(常规剂量)的该抗菌药物治疗。其体外的最低抑菌浓度(MIC)必须低于临床上该种抗菌药物的常规用量。

2) 中度敏感(I):测定菌能被测定药物大剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制,或在测定药物浓集部位的体液中被抑制。其细菌对这类抗菌药物的反应性通常低于敏感菌,中度敏感药物在生理浓集部位或高于常规剂量也可有临床疗效。 3) 耐药(R):测试菌不能被在体内感染部位可能达到的抗菌药物浓度所抑制,感染菌对该抗菌药物治疗不发生反应,即使加大剂量或药物浓集部位也不发生反应。

第三节 临床感染常见病原体检测

一、细菌感染

1. 检测细菌或其抗原:直接涂片镜检、培养、抗原检测与分析 2. 检测抗体 3. 检测细菌遗传物质 二.病毒感染

1.显微镜形态学检查:光镜检查特征性病毒包涵体,电镜检查病毒颗粒。 2.分离培养:活细胞培养-临床不常用,科研用。 3.血清学检查:临床常用,如HIV检查等。 4.核酸杂交和PCR方法:近年来发展迅速。 三.真菌感染

1.形态学检查:重要手段。 2.分离培养、鉴定。

3.抗原检查及血清学诊断:少用。 四.寄生虫感染 1.涂片检查:最可靠确诊方法,如粪便中找蠕虫卵、外周血中找疟原虫等。 2.免疫学诊断方法:广泛应用 。 3.DNA探针及PCR技术:近年发展迅速。 五.其他病原体感染检查

1.支原体检查:直接显微镜检查无临床意义,分离培养为确诊依据。

2.螺旋体检查:暗视野显微镜检查;钩端螺旋体可培养;血清学诊断为最主要方法。 3.衣原体检查:直接显微镜检查有参考价值;免疫学方法检测抗原或抗体为主要方法。 4.立克次体检查:直接检出(免疫荧光、PCR等);动物接种;血清学诊断试验(外斐试验等)。

第五节 性传播疾病病原体检测

性传播疾病(STD)是指以性行为为主要传播途径的一类传染病,通称性病。经典性病(VD)仅包括梅毒、淋病、软下甙、性病性肉芽肿4种。目前,国内外认为凡通过性行为传播的疾病,均称性病。其数量明显增多,包括:梅毒、淋病、非淋菌性尿道炎、软下疳、性病性淋巴肉芽肿、腹股沟肉芽肿、生殖器疱疹、尖锐湿疣、生殖器念珠菌病、传染性软疣、滴虫性阴道炎、疥疮、阴虱病、嗜血杆菌阴道炎、巨细胞病毒感染等。近来证实乙型肝炎和艾滋病病人的血液、精液或唾液中也有病毒,也能通过性行为传播,因而也被列入性传播疾病。

(一)艾滋病实验室检查

1.直接显微镜检查:电镜检查具有诊断价值,但临床应用较少。 2.PCR方法:RT-PCR为目前最敏感方法,亦为确诊试验。 3.病毒分离鉴定:临床少用,只用于实验室研究。

4.血清学诊断:最常用手段。常以ELISA法检测HIV抗体作为初筛试验,蛋白印迹试验为确诊试验。

(二)梅毒实验室检查

1.直接显微镜检查:暗视野显微镜检查,诊断早期梅毒快速、可靠方法。

2.PCR方法:敏感、特异的方法,适用于梅毒孕妇如羊水、新生儿血清、脑脊液标本。 3.血清学诊断:最常用手段。常以RPR(快速血浆反应素环状卡片试验)作为初筛试验,TPHA(抗梅毒螺旋体抗体间接血凝试验)作为确诊试验。

(三)淋病实验室检查 1.直接显微镜涂片检查:早期诊断,敏感性稍差,对男性患者特异性高而对女性患者特异性稍差。

2.PCR方法:早期、快速、敏感的方法,不能区别是活菌还是死菌。 3.分离培养和鉴定:特异性高,为诊断“金标准”,同时可作药敏试验。

(四)非淋菌性尿道炎实验室检查

1.衣原体检查:常用特异性抗原检查、培养等。

2.支原体检查:相关病原体主要是解脲脲原体与人型支原体,可进行培养,根据解脲脲原体分解尿素产氨、人型支原体分解精氨酸产碱使指示剂变色,需进行定量计数并同时可作药敏试验。

第六节 医院感染常见病原体检测

医院感染是指患者在入院时既不存在,亦不处于潜伏期,而在医院内发生的感染,包括医院内获得而在出院后发病的感染。即发生在医院中的一切感染。是当今医院的一个非常重要的问题。

一、医院感染的特点

1) 感染源和病原体:感染源主要来自住院患者、医务人员、探访人员以及医院环境、医疗器械、血液制品的污染等。最常见病原体是细菌,多以革兰阴性杆菌为主。 2) 易感人群:常见于免疫力低下状态的住院患者。

3) 常见临床类型:下呼吸道感染为最常见医院感染类型,其它如尿路感染、手术切口感染、胃肠道感染、血液感染、皮肤和软组织感染等亦多见。

二、医院感染监测主要包括以下几方面

1. 临床感染病原体的微生物学检测:临床对一切发生感染及可疑的病人,都应根据感染情况,采集血液、骨髓、尿液、痰液、粪便、脓液等标本进行微生物学检测,,一是为了临床治疗,二是满足医院感染流行病学调查的需要。

2. 医院环境微生物学监测:主要包括空气消毒效果监测,消毒物品监测, 物体表面微生物监测,洗手效果的监测等。其目的是观察医院内环境中细菌总数、种类及其动态变化,以便有目的地采取措施,控制和降低医院感染的发生率。另外,当发生医院感染暴发流行时,通过环境微生物检测,及时发现传染源及传染途径,以控制感染的蔓延。

第四篇:2015年上半年山西省公卫助理:病原学检测-鼠疫试

本卷共分为1大题50小题,作答时间为180分钟,总分100分,60分及格。

一、单项选择题(共50题,每题2分。每题的备选项中,只有一个最符合题意)

1.需求、利用下列叙述正确的是( B )

A 卫生服务需要都能转化成卫生服务需求

B 卫生服务利用不能直接用于评价卫生服务的效果

C 卫生服务利用主要取决于卫生服务需求

D 卫生服务需要主要反映了居民对健康的一种主观愿望

2.硝酸酯类药物主要通过产生哪种物质发挥舒张血管的药理作用

A.前列腺素

B.缓激肽

C.氢离子

D.一氧化氮

E.组胺

正确答案:D

3.关于ⅠA类抗心律失常药物的描述不正确的是

A.抑制Na内流和促进K外流

B.减慢0相除极化速度 C.延长APD和ERP

D.降低膜反应性

E.适度阻滞钠通道

正确答案:A

4.生命质量评价的内容是: ( D )

A 生理状态 B 心理状态 C 社会交往及主观满意度 D以上都包括

5. 下列哪项不是定性研究的特点( A )

A 定性研究的结果可以用概率统计分析 B 定性研究需要较长时间与研究对象接触

C 定性研究注重的是事物发展的过程 D 定性研究结果一般不能外推

6. 下列何种抗高血压药久用突然停药,可出现血压反跳现象

A.肼屈嗪

B.可乐定

C.甲基多巴

D.利舍平

E.引达帕胺

正确答案:B

7. 硝酸甘油抗心绞痛的主要药理作用是

A.增强心肌收缩力

B.降低心肌耗氧量

C.减慢心跳频率

D.改善心肌供血

E.直接松弛血管平滑肌,改变心肌血液的分布

正确答案:D

8. 治疗急性阿米巴痢疾和阿米巴肝脓肿应首选

A.二氯尼特

B.依米丁

C.氯喹

D.甲硝唑

E.乙酰胂胺

正确答案:D

9. 大环内酯类对下列哪类细菌无效

A.军团菌

B.革兰阴性球菌

C.革兰阳性菌

D.衣原体和支原体

E.大肠埃希菌和变形杆菌

正确答案:E

10. 甲氧苄啶与磺胺甲噁唑合用的原因是

A.促进分布

B.促进吸收

C.双重阻断敏感菌的叶酸代谢

D.抗菌谱相似

E.减轻不良反应

正确答案:C

11. 下列几种说法中哪一种是正确的( d )。

A.土壤成分仅能吸附重金属和农药

B.污染土壤的所有有机物都最终变成简单的无机化合物

C.进入土壤的所有病原体由于环境不利,全部很快死亡

D.土壤有机物的腐殖质化是土壤自净的重要过程

E.固体废弃物污染土壤后都很局限,不致影响周围环境

12. 根据三级预防原则,劳动卫生工作的一级预防工作应进行

A.现场劳动卫生学调查

B.现场环境监测

C.就业前健康检查

D.健康教育

E.改善劳动条件

[正确答案]:C

13. 伴有脑血管病的高血压患者宜用

A.硝苯地平

B.维拉帕米

C.尼莫地平

D.尼群地平

E.非洛地平

正确答案:C

14. 高血压合并消化性溃疡者不宜选用

A.甲基多巴

B.可乐定

C.肼屈嗪

D.利舍平

E.哌唑嗪

正确答案:D

15. 观察法的缺点或局限性在于它的(C ):

A 有效性 B 可靠性 C 说服力 D 时间弹性

16. 观察法的缺点或局限性在于它的( D ):

A 有效性 B 可靠性 C 说服力 D 时间弹性

17. 反映居民医疗卫生服务需要的常用指标有:( A )

A、两周患病率

B、两周患者未就诊率

C、两周就诊率

D、住院率

18. 下列哪项不是妇幼保健服务利用的指标( B )

A 产前检查覆盖率 B 住院率 C 住院分娩率 D 儿童有接种卡率

19. 心肌梗死患者出现室性心动过速首选

A.普萘洛尔

B.维拉帕米

C.利多卡因

D.苯妥英钠

E.丙吡胺

正确答案:C

20. 不属于抗高血压药物的是

A.肾素抑制药

B.血管收缩药

C.血管紧张素转化酶抑制药

D.α、β受体阻断药

E.利尿药

正确答案:B

21. 用于抗艾滋病病毒的药物是

A.利巴韦林

B.扎那米韦

C.齐多夫定

D.阿昔洛韦

E.碘苷

正确答案:C解题思路:本题考查抗病毒药物的临床应用。齐多夫定是美国FDA第一个批准用于艾滋病病毒感染的药物,利巴韦林即病毒唑,为广谱抗病毒

药,阿昔洛韦对疱疹病毒疗效突出,扎那米韦是流感病毒神经氨酸酶抑制剂,碘苷为人工合成的抗病毒药,局部用于治疗眼部或皮肤疱疹病毒和牛痘病毒感

染故选C。

22. 克拉维酸为下列哪种酶的抑制剂

A.二氢叶酸还原酶

B.DNA回旋酶

C.二氢叶酸合成酶

D.胞壁黏肽合成酶

E.|Β-内酰胺酶

正确答案:E

23. 环境卫生学的重点研究内容是( )

A.环境因素的调查与监测

B.污染物在环境中的分布与转归

C.环境污染治理

D.环境因素的健康效应

E.环境质量评价

24. 下列哪项不是卫生费用的评价指标( D )

25. 观察法的缺点或局限性在于它的(C ):

A 有效性 B 可靠性 C 说服力 D 时间弹性

26.可作为吗啡成瘾者戒毒的降压药

A.利舍平

B.普萘洛尔

C.肼屈嗪

D.可乐定

E.二氮嗪

正确答案:D

27.有关反转录,错误的论述为

A.是以RNA为模板合成DNA的过程 B.反转录酶是从致癌RNA病毒中所发现的

C.对中心法则提出了补充和修正

D.是以RNA为模板合成RNA的过程

E.反转录酶可以催化DNA指导的DNA合成反应

28.环境卫生学的基本理论为( )

A.人与环境之间的统一性

B.环境因素对机体影响的作用机制

C.机体对环境的适应能力

D.阐明环境因素对健康影响的复杂性

E.环境中有益因素和有害因素对机体的综合作用

29.对四环素不敏感的病原体是

A.铜绿假单胞菌

B.肺炎杆菌

C.脑膜炎球菌

D.肺炎支原体

E.立克次体

正确答案:A

30. 关于就诊率下列叙述正确的是( A )

A 两周就诊率是反映居民对医疗卫生服务利用情况的指标 B 两周就诊率是指调查前两周内就诊的人(次)数与患病人数的比率

C 两周患者就诊率是指调查前两周内就诊的人(次)数与调查人数的比率

D 两周患者未就诊率是指调查前两周内未就诊的人(次)数与调查人数的比率

31. 气短,心电图显示阵发性室性心动过速,宜选用的抗心律失常药物是

A.普萘洛尔

B.利多卡因

C.维拉帕米

D.异丙吡胺

E.苯妥英钠

正确答案:B

32. 问卷的一般结构包括 (A )

A、封面信——指导语——问题及答案——编码

B、封面信——指导语——问题——答案

C、封面信——问题——答案——编码

D、指导语——问题——答案——编码

33. 下列哪项不是反映疾病严重程度的指标( B )

A 两周卧床率 B 两周患病率 C 两周患病天数 D 两周休学率

34. 基因表达调控最重要的环节是 A.基因转录

B.DNA合成

C.转录后加工

D.蛋白质合成

E.蛋白质合成后加工

35. 甲氧苄啶的抗菌机制是

A.破坏细菌细胞壁

B.抑制二氢蝶酸合成酶

C.抑制二氢叶酸还原酶

D.抑制DNA螺旋酶

E.改变细菌细胞浆膜通透性

正确答案:C

36. 环境卫生学的研究对象是( )

A.自然环境、生活环境和社会环境

B.人群健康

C.生物地球化学性疾病

D.人类健康及其周围环境

E.环境污染的综合治理

37. 下列哪项属于概率抽样( B ) A 偶遇抽样 B 系统抽样 C 立意抽样 D 雪球抽样

38. 硝酸甘油的不良反应主要是由哪种作用所致

A.心排出量减少

B.血压降低

C.耗氧量减少

D.血管扩张

E.心肌血液的重新分布

正确答案:D

39. 清洁生产是指( )

A.生产场地清洁、厂房清洁

B.生产场所清洁卫生、无垃圾灰尘

C.清洁的生产过程

D.节约能源、资源消耗少,有效预防控制污染和其他废物生成的生产工艺过程

E.生产过程中有严格卫生管理制度,工人始终保持清洁卫生

40. 下列哪一项不是社会医学的研究内容(C )

A 研究社会卫生状况,主要是人群健康状况

B 研究影响人群健康的因素,特别是社会因素

C 研究解决人群健康状况的具体医疗技术措施

D 提出改善社会卫生状况的社会性策略与措施

41. 土壤有机物转化为腐殖质的过程,不能称为

A.无害化过程

B.无机化过程

C.自净过程

D.腐殖质化过程

E.生物氧化过程

[正确答案]:B

解题思路:腐殖质是有机物。是有机污染物在微生物作用下分解又重新合成的一种新的有机物

42. HOCI和OCI-的杀菌效果为( c )。

A. HOCI的杀菌效果与OCI-相同

B. HOCI的杀菌效果与OCI-低80倍

C. HOCI的杀菌效果与OCI-高80倍

D. HOCI的杀菌效果与OCI-低20倍

E. HOCI的杀菌效果与OCI-高20倍

43. 以下哪项不是定量研究的特点 ( C)

A 标准化程度较高 B 可检验性强 C 对研究问题的深层次探索性好 D 精确化较高

44. 关于随机应答技术,下列叙述不正确的是( C )

A 随机应答技术通常是涉及隐私性问题常用的一种调查方法 B 通过随机化处理可以估计出所有被调查者中属于某种情况的比例

C 随机化装置中的黑白球的比例要正好等于1:1

D 它是根据概率理论进行推算的

45. 下列哪项不属于概率抽样( C )

A 分层整群抽样 B 系统抽样 C 偶遇抽样 D 单纯随机抽样

46. 下列何药可诱发支气管哮喘

A.甲基多巴

B.利舍平

C.呱乙啶

D.普萘洛尔

E.硝苯地平

正确答案:D

47. 对铜绿假单胞菌有较强作用的药物是

A.氯唑西林

B.美西林

C.阿莫西林

D.哌拉西林

E.替莫西林

正确答案:D解题思路:本题考查半合成青霉素的抗菌作用特点。哌拉西林抗菌谱与羧苄西林相似,抗菌活性强于羧苄西林,对铜绿假单胞菌有较强的作

用。故选D

48. 疾病的地区分布特征主要与下列哪些因素有关

A.地形地貌

B.气象条件

C.风俗习惯

D.经济状况

E.以上均是

[正确答案]:E

解题思路:每一种疾病在地区分布上都具有自身的特征,这些特征主要与地质出理环境,气象条件、居民的风俗习惯和社会经济状况等因素有关

49. 下列何药长期大量服用可出现红斑狼疮综合征

A.可乐定

B.硝苯地平

C.福辛普利

D.肼屈嗪

E.普萘洛尔

正确答案:D

50. 高温车间是指车间内气温比室外夏季设计通风计算温度高2℃以上。关于随机抽样,下面哪一个正确 A.随机抽样即随意抽取个体

B.抽样时精心挑选个体,能使样本更好代表总体

C.抽样时应使总体中的所有个体有同等机会被抽取

D.抽样时样本量越大越好

E.严格执行随机抽样,可以避免抽样误差

[正确答案]:C

解题思路:随机抽样的核心是要使总体中的所有个体都有同等机会被抽取,而A、B、C、D、E选项均为干扰项。

第五篇:DNA病原—圆环病毒2型PCR检测方法专题

猪圆环病毒2型PCR检测方法操作程序

廖荣斌,何启盖

(华中农业大学动物医学院)

一、原理

猪圆环病毒2型感染引发的仔猪断奶衰竭综合症、肾炎与皮炎、增生性肠炎以及母猪繁殖障碍。通过病原检测和病毒分离是确证本病的重要手段。猪圆环病毒分为2种,即圆环病毒1型和圆环病毒2型。前者不致病,后者可致病。猪圆环病毒2型(PCV2)的基因组大小为1768 bp或1767bp。其中,PCV2 ORF2基

因与免疫保护和毒力等重要特性有关,同时,此基因与PCV1的同源性较低,通

过合理设计引物,扩增ORF2,从而可检测并区分PCV2与PCV1。

PCR技术具有快速、敏感的优点,已经用于许多动物疾病病原的检测。本试验是利用我们设计的引物,通过反应条件的优化,以感染猪组织或血液为模板,扩增PCV2的ORF2基因,从而作出感染的结论。

二、材料准备

1、手术器械:采样用。根据样品数量来确定。

2、微量移液器(规格:2.5l,10l,100l,200l,1000l)

3、反应引物

上游引物:CAC GGA TAT TGT AGT CCT GGT;

下游引物:CGC ACC TTC GGA TAT ACT GTC

4、磁珠:用于吸附和分离DNA

4、PCR仪:东胜创新

5、电泳仪:北京六一电子设备

6、紫外检测仪:Bi0-RAD凝胶成像系统

7.相关溶液及配方:

1╳TAE buffer(电泳缓冲液)配方:(1)称量Tris:242g,Na2EDTA.2H2O:

37.2g,置于1L的烧杯中;(2)向烧杯中加入约800ml去离子水,充分搅拌溶解;

(3)加入57.1ml的醋酸,充分搅拌;(4)加去离子水将溶液定容至1L后,室 1

温保存;(5)使用时将室温保存的该溶液稀释50倍即可使用。

扩增产物的样品缓冲液:全式金生物6╳Loading buffer。

三.样品采集

感染猪或流产的胎儿的肺脏、淋巴结、脾脏和肾脏;发热期猪的抗凝血或血

清;每个样品用单独的剪刀或刀片,避免交叉污染。

样品置冷藏条件下送检。也可放冷冻保存。

四、模板的制备(DNA提取)

*(注:所用DNA提取试剂盒为日本TOYOBO产品)

1、取组织100mg(或血液100ml)以下放入1.5ml离心管中,然后加入850l

的溶解吸附液,再使用匀浆器充分匀浆。

2、离心分离(10000rpm,5分钟)后,将上清液吸入新的1.5ml的离心管内。

3、加入40l磁珠,然后使用涡旋振荡器剧烈混合10分钟(注意:加入磁珠前,

要把磁珠混匀)。

4、将离心管置于磁性台架上,放置30秒使磁珠聚集,然后去除上清液。

5、离心管中添加900l 洗净液,然后涡旋振荡剧烈混合5秒。

6、将离心管置于磁性台架上,放置30秒使磁珠聚集,然后去除上清液。

7、重复步骤5和6.

8、离心管中添加900l 70﹪的乙醇溶液,然后涡旋振荡剧烈混合5秒。

9、将离心管置于磁性台架上,放置30秒使磁珠聚集,然后去除上清液。

10、重复步骤8和9.

11、添加100l灭菌水后,剧烈震荡10分钟,使DNA溶出。

12、将试管置于磁性台架上,通过放置30秒使磁珠聚集,然后将含有DNA的上

清液回收至新的1.5ml离心管内,上清液即为DNA模板!

13、阴阳性对照的设立:利用灭菌三蒸水和PCV2阳性病毒液(或者所保存的临

床PCV2阳性病料)与临床送检病料同步提取DNA,分别作为PCV2临床检测的阴性

对照和阳性对照。

五、 配置PCV2-PCR的标准反应体系(单重扩增):

10×扩增缓冲液2.5ul

dNTP混合物2ul引物(10mM)各1ul

模板DNA4ul

Taq DNA聚合酶0.15ul

加灭菌三蒸水14.35ul

即总反应体系25ul.六、扩增

将配好样品的PCR管放入PCR仪中选择适合反应条件的程序进行扩增。退

火温度54°C。

反应条件:按如下程序进行扩增: 94℃变性5 min后,进入循环94℃

30sec,54℃ 40sec, 72℃ 45sec,35个循环后,72℃延伸10 min。

七、配置琼脂糖凝胶块

1、材料:广口瓶、琼脂糖、电泳液

2、制作步骤:

(1)、称取琼脂糖1克放入广口瓶内。

(2)、取电泳液100ml加入广口瓶,即为1﹪的琼脂糖混合液。

(3)、然后放入微波炉中加热2分钟,取出后冷却约56℃。

(4)、倒入容器中,混合液约占容器容积的1/2—2/3。

八、电泳

1、扩增结束后,每只PCR管中都加入约2.5ul的6╳Loading buffer(电泳样品

缓冲液)

2、将制备好的凝胶块放入DNA电泳仪内的电泳液中,胶块有孔的一侧靠近负极。

3、从滴加有电泳样品缓冲液的样品中分别取7ul注入胶块相对应的孔内。

4、注入5ul的分子量(DL Mark 2000)对照。

5、电泳到凝胶块的1/2—2/3处。

九、图片观察

1、电泳结束的凝胶块放入溴乙锭(荧光物质)中浸泡10min。

2、放入成像系统中照胶。

3、结果判定(目的片段大小是494bp)如图1.123456789101112131415161718M bp

图1. 临床病猪圆环病毒PCR检测的凝胶成像图片

1:阴性对照;2:阳性对照;3—18:湖北某规模化猪场送检病料;其中3—6,8,11—12,15—16为PCV2感染阳性。其余被检病料为PCV2感染阴性,M(分子标记): DL Mark 2000。

4.结果分析

(1)感染的判定:PCR结果为阳性,表明为PCV2感染;阴性表明无PCV2感染。

(2)疾病的判定:由于本病毒感染较广,PCR阳性结果需要与猪群的流行病学以及临床表现(断奶消瘦、咳嗽、体温升高、腹股沟淋巴结肿大)等结合考虑。

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