高效液相色谱法 (High Performance Liquid Chromatography, 简称HPLC) 是在气相色谱理论的基础上发展起来的, 该法在高压下测量, 色谱柱压降明显, 测量速度快, 可达到0.1-10.0m L/min;灵敏度高, 耗样量少, 分离效果好等多项优点, 为实现对药品的快速、高效、高灵敏度的分离测定奠定了基础[1]。本文将围绕高效液相色谱法在药物分析中的应用进行分析。
1 高效液相色谱法在药物分析中的应用
1.1 1HPLC在天然药物分析中的应用
天然药物主要来源于植物, 此外, 动物和矿物也是药物来源的重要组成部分。天然药物化学成分复杂, 因此其药效可能有一种, 也可能有多种, 这就给药物质量控制提出了严格的要求。HPLC法的利用可对天然药物的成分进行准确分析, 并能对其含量进行精确测定。以西洋参为例:西洋参是五加科植物, 味苦、性凉、入心、肺、肾经, 具有显著的补益功能。西洋参的主要成分是皂苷类, 尤其是Rb1、Rb2、Rc、Rd等7种皂苷质量分数达到90%以上, 成为评价西洋参药性的重要指标。2005年, 陈军辉等[2]利用HPLC法对12种西洋参的7种人参皂苷进行测定, 测定条件如下:梯度洗脱, Alltima Cu色谱柱, 流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液;流速控制在1.2m L/min, 温度设定为35℃。实验仪器采用上海声源超声波仪器设备有限公司的高效液相色谱仪。在最佳色谱条件下, 各种成分在一定浓度范围内呈现较好的线性关联性, 7种人参皂苷的回收率达到94.%~97.9%, 结果令人满意。表1为实验结果记录数据。
1.2 HPLC在抗生素类药物分析中的应用
抗生素是通过微生物或其他方法产生的化学物质, 该物质在高度稀释的情况下, 仍然有很强的抑制或灭杀微生物的性能, 因此在临床得到了广泛应用。传统的分析方法分析时间长、专一性较差, 而高效液相色谱法在抗生素类药物检测中发挥了巨大的作用。Raphael Denooz等[3]利用高效液相色谱和紫外检测器对人体血浆中的5中β-内酰胺类抗生素进行了检测, 流动相采用乙腈-磷酸盐缓冲溶液 (p H7.4) , 梯度洗脱;血浆样品经过固相萃取柱净化后进入HPLC进行分析, 血浆样品回收率达到93.2%以上, 结果令人满意。
1.3 HPLC在毒物分析中的应用
甲基苯丙胺 (MA) 的主要活性代谢物苯丙胺 (PA) 与MA具有类似的药理作用, 但其毒性较强, 成人一次用量达到PA30mg就会出现中毒反应, 达到200mg就会使人中毒致死;MA和PA是滥用药物“摇头丸”的常见成分。杨小红等[4]利用HPLC法对临床中毒患者血浆中的MA和PA含量进行了测定。测定方法如下:先将血浆样品碱化, 然后通过固相萃取柱净化, 再用盐酸 (0.3%) 溶液洗脱;色谱柱选用岛津CLCC18柱, 流动相选用乙腈-甲醇-磷酸二氢钾 (25mmol/L) 缓冲溶液, 检测波长定为210nm, 检测时间为60min, 为临床的快速诊断和抢救提供了可靠的依据。
1.4 HPLC在药代动力学中的应用
HPLC法除可对药物成分和含量进行分析外, 还能对药物在肌体内的浓度进行测定, 然后结合相关的数据分析技术, 对药物代谢动力学进行分析。Gholamreza Bahramin等[5]利用高效液相色谱法对人血清中的阿奇霉素进行了分析, 方法如下:利用己烷对血清样品进行处理后用FMOC-Cl进行衍生, 然后荧光检测;色谱柱选用苯基柱;流动相选用磷酸盐缓冲-甲醇, 定量方法为内标法。血药浓度在10-500ng/m L范围内呈现较好的线性关系, 检测灵敏度可达到10ng/m L。HPLC法在药代动力学上的研究可为药代动力学软件提供数据, 经过专业的数据分析后可获得吸收半衰期、消除半衰期、达峰时间、最大血药浓度一系列动力学参数, 为药物的深入分析和研制提供了参考。
2 结语
随着科学技术的不断发展, HPLC技术将与其他的先进技术联合使用, 进一步提高药物分析的速度、质量和灵敏度, 为我国医学水平的提高和医疗事业的发展提供重要保障。
摘要：高效液相色谱法具有测量速度快、灵敏度高、回收率好等多项优点, 已经在多个领域得到广泛应用, 本文将对该法在药物分析中的应用进行简要介绍。
关键词：高效液相色谱法,药物分析,应用
参考文献
[1] 刘丽敏.高效液相色谱在中草药和抗生素类药物分析中的应用[D].西南大学, 2008.
[2] 朱余兵, 周志娟, 于翠霞, 邹建军, 张晶晶, 杨小红.HPLC法测定人血浆中奈韦拉平的浓度[J].中国药房, 2011, 06:512-513.