论文题目：入境旅客携带苹果传带病原菌的风险分析及部分病原菌检测技术研究
摘要：为了进一步加强进境水果病害植物检疫工作,为我国水果病害植物检疫提供信息技术支持,本论丈在资料和信息全面收集整合的基础上,对我国进境苹果可能携带的病原物进行了风险分析,提出了风险管理措施。并对其中的检疫性病害一牛眼果腐病进行了分离培养及形态学和分子生物学鉴定,另外对苹果上造成严重危害的轮纹病建立了实时荧光的检测方法。本文主要包括以下内容：（1）概述了我国苹果的分布,产量,对外贸易情况：简介了苹果的重要病害。（2）根据南京口岸和中国检验检疫科学院数据,统计出我国进境旅客携带的水果种类和数量,以及这些水果上所携带的病原菌的种类和数量。全面搜集了苹果上携带的病菌种类,了解这些病害的各种信息。共收集苹果上病害50种。以部分重要指标如该有害生物进入可能性,在我国的分布的有无以及是否得到官方治理等进行初步筛选,确定了有害生物风险分析的名单,总共有14种,通过有害生物的进入可能性,定殖可能性,扩散可能性,经济影响多指标综合评价法对14种有害生物进行了风险分析。分析结果发现,以苹果壳色单隔孢溃疡病菌（Botryosphaeria stevensii）.核果链核盘菌（Monilinia laxa）、果生链核盘菌（Monilinia fructigena）、美澳型核果褐腐病菌（Monilinia fructicola）、苹果牛眼果腐病菌（Neofabraea sp.）、李属坏死环斑病毒（Prunusnecrotic ringspot virus）、苹果黑星病菌（Venturia inaequalis）、苹果,梨球壳孢果腐病菌Sphaeropsis pyriputrescecs)为代表的8种病菌风险最大,梨火疫病菌（Enrinia bniamyces pyri）、苹果锈病菌（Gymnosporangium clavipes）、梨波氏盘果腐病菌菌（Sphaeropsis pamylovora）、苹果,梨边腐病菌（Phialophora malorum）、苹果星裂壳孢果腐病菌（Phacidiopycnis washingtonensis）为代表的5种病害风险为中。丁香疫霉（Phialophora malorum）风险为小。并对上述的8种危险性最大的病害制定风险管理措施。（3）对苹果牛眼果腐菌进行了症状观察、分离培养、形态鉴定和分子生物学鉴定。对苹果轮纹病菌建立了实时荧光的检测方法,能够对苹果轮纹病菌进行特异性扩增,并且在轮纹病菌菌液模板DNA浓度为10 pg/L时仍有较好的扩增效果。
关键词：植物检疫;风险分析;检测技术;苹果病害
学科专业：植物保护
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 文献综述
1.1 苹果概况
1.1.1 苹果种植情况
1.1.2 苹果生长条件
1.1.3 苹果上的主要病害
1.2 我国进出境水果现状
1.2.1 我国水果出口情况
1.2.2 主要进境水果及有害生物截获情况
第二章 苹果病原菌的风险分析
2.1 确定风险分析的对象和有害生物名单
2.2 有害生物的风险评估
2.2.1 潜在的检疫性有害生物名单
2.2.2 潜在检疫性有害生物的风险评估
2.3 确定潜在的检疫性有害生物风险等级
2.3.1 进境潜在的检疫性苹果病原物风险评估表
2.3.2 风险管理措施
第三章 进境旅客携带苹果牛眼果腐病菌的分离与鉴定
3.1 材料与方法
3.1.1 材料与试剂
3.1.2 症状检查及保湿培养
3.1.3 组织分离与培养
3.1.4 形态学观察与生物学鉴定
3.1.5 分子生物学鉴定
3.1.6 致病性测定
3.2 结果与分析
3.2.1 苹果病果症状
3.2.2 病菌生物学特性
3.2.3 分子生物学鉴定
3.2.4 致病性测定
3.3 讨论
第四章 苹果轮纹病菌检测方法及鉴定
4.1 材料与方法
4.1.1 材料与试剂
4.1.2 苹果轮纹TacMan探针与引物的设计和合成
4.1.3 病菌基因组DNA的抽提
4.1.4 反应体系与反应条件
4.1.5 扩增条件
4.1.6 实时荧光
4.1.7 灵敏度检测
4.2 结果与分析
4.2.1 特异性扩增
4.2.2 灵敏度试验
4.2.3 结论和讨论
第五章 结果与讨论
5.1 小结
5.2 讨论
参考文献
致谢