土木工程硕士论文范文（精选6篇）
土木工程硕士论文范文 第1篇
浅析基因工程技术的应用现状
动物医学专业
任课教师
指导教师姓名
摘要: 基因工程作为一门理论性与实践性较强的学科,其方法与技术已经渗透到现代生命科学的各个分支领域,成为生命科学的一门核心技术。基因工程包含许多独特的实验方法和技术,不仅内容丰富,涉及面广,实用性也强。基因工程是通过DNA 重组技术, 获得具有特殊生物遗传性状和功能的遗传工具生物体, 基因工程技术广泛应用于农业、医学、食品工业等。本文就基因工程的应用现状综合阐述。关键词 : 基因工程;应用现状
0.前言
基因工程技术是一项极为复杂的高新生物技术, 它利用现代遗传学与分子生物学的理论和方法, 按照人类所需, 用DNA 重组技术对生物基因组的结构和组成进行人为修饰或改造, 从而改变生物的结构和功能, 使之有效表达出人类所需要的蛋白质或人类有益的生物性状[1]。基因工程从诞生至今, 仅有30 年的历史, 然而, 无论是在基础理论研究领域, 还是在生产实际应用方面, 都已取得了惊人的成绩。首先,基因工程给生命科学自身的研究带来了深刻的变化。目前科学家已完成了多种细胞器的基因组全序列测定工作。其次, 基因工程具有广泛的应用价值, 能为工农业生产、医药卫生、环境保护开辟新途径。
1.基因工程
1.1 概念
基因工程(又称DNA 重组技术、基因重组技术), 是20 世纪70 年代初兴起的技术科学, 是用人工的方法将目的基因与载体进行DNA重组, 将DNA 重组体送入受体细胞, 使它在受体细胞内复制、转录、翻译, 获得目的基因的表达产物。这种跨越天然物种屏障, 把来自任何生物的基因置于毫无亲缘关系的新的寄主生物细胞之中的能力, 是基因工程技术区别于其他技术的根本特征。1.2 基因工程研究内容
(1)从复杂的生物有机体基因组中, 经过酶切消化或PCR 扩增等步骤, 分离出
带有目的基因的DNA 片段。
(2)在体外, 将带有目的基因的外源DNA 片段连接到能够自我复制并具有选择记号的载体分子上, 形成重组DNA分子。
(3)重组DNA 分子转移到适当的受体细胞, 并与之一起增殖。
(4)从大量的细胞繁殖群体中, 筛选出获得了重组DNA 分子的受体细胞克隆。(5)从这些筛选出来受体细胞克隆, 提取出已经得到扩增的目的基因, 供进一步分析研究使用。
(6)将目的基因克隆到表达载体上, 导入寄主细胞, 使之在新的遗传背景下实现功能表达, 产生出人类所需要的物质。
2.基因工程的广泛应用
2.1 在农业上的应用
2.1.1 抗除草剂的植物基因工程
资料表明, 每年杂草造成的经济损失占农作物总产值的10%-20%左右尽管除草剂的使用, 对大规模机械化耕作, 减少劳力开支和提高量有极为重要的作用, 但一般除草剂的选择性较差, 即除了杀草以外, 还会将作物杀死。现在利用生物技术, 将能抵抗除草剂的基因转移到植物中, 获得抗除草剂的植物, 如美国的孟山都公司将除草剂草甘磷的靶酶(EPSPS)的cDNA 克隆转入油菜[2] , 目前, 已获得的抗除草剂作物有大豆、棉花、玉米、水稻和甜菜等20 多种。2.1.2 抗虫的植物基因工程
生物防治害虫的工作已经开展多年, 主要是利用苏云金杆菌中的毒蛋白(结晶蛋白)对害虫有毒害作用, 使用这些杆菌来控制害虫。现在, 人们可以通过克隆这些毒蛋白的基因(Bt 基因)并把这些基因转移到植物细胞中, 从而获得能抗虫的转基因植物。目前, Bt 基因已被转入烟草、番茄、马铃薯、水稻、玉米及棉花等多种植物中。1996 年转Bt 基因棉花在美国种植66 万hm2 经中国农科院棉花所引进在华北试种两年, 在多点表现突出, 在完全不喷杀虫剂的情况下, 单产仍然高于喷撒2-3 次杀虫剂的中国推广棉花[3] , 显示出了控制棉铃虫的极好前景。2.1.3 动物转基因育种
动物基因工程研究主要集中在改良家畜、家禽的经济性状和通过转基因动物进行药物或蛋白质的生产等方面, 目前已取得了显著的成就, 先后培育出转基因猪、羊、牛和鱼等, 另一种转基因猪是带有人体基因的猪, 这种转基因猪客望能解决人体移植动物器官的遗体排斥问题。随着动物基因工程技术的逐渐成熟和转人体血红蛋白的基因猪、转人体血清蛋白的基因山羊等的问世, 不仅能生产出大量人类所需的血红蛋白、白蛋白等药物而且为动物育种开辟了一条全新的途径。
2.2 在医学上的应用 2.2.1 基因工程药物
利用基因工程技术开发新型治疗药物是当前最活跃和发展最快的领域。自1982 年世界第一个基因工程药物---重组胰岛素投放市场以来, 基因工程药物就成为制药行业的一支奇兵, 每年平均有3-4 个新药或疫苗问世, 开发成功的约50 个药品, 诸如人胰岛素、忍尿激酶、人生长激素、干扰素、激活剂、乙肝疫苗等广泛应用于治疗癌症、肝炎、发育不良、糖尿病和一些遗传病上, 在很多领域特别是疑难病症上, 起
到了传统化学药物难以达到的作用[4, 5, 6]。为治愈癌症正在研制的用单克隆抗体制成的“生物导弹”, 就是按照人类的设计, 把“生物导弹”发射出去, 精确的命中癌细胞, 并炸死癌细胞, 而不伤害健康的细胞, 比如专门用于肿瘤的“肿瘤基因导弹”等。可见, 生物工程药物将成为21世纪药业的支柱。而脱氧核糖核酸或者基因疫苗的问世, 变革了机体的免疫方式。如今, 人们翘首关注困扰人类的艾滋病病毒疫苗的早日问世。
尽管目前诱变育种技术仍是改良微生物工业生产菌种的主要手段,但是基因工程技术在改良工业生产菌种方面已有成功的报道。最常见的是将控制药物合成关键步骤的酶基因克隆,通过适当的载体转移到原生产菌中,以使控制限速步骤的酶水平,从而提高产量。Malmberg等[7]构建了一种带有编码赖氨酸ε-氨基转移酶基因(lysine-ε-aminotranster-ase,LAT)这种控制Streptomyces clavuligerus生物合成头霉素C的限速步骤的关键酶的基因(lat)的高拷贝质粒,并转入这种头霉素产生菌,使LAT提高活力提高了4倍,在2 L发酵罐中产生头霉素的能力是原来的2倍,重组菌胞外LAT产物α-氨基己二酸的积累量也比原受体
菌高。伊维菌素(ivermectins)是一个市场很大的抗虫
抗生素,其前体阿弗米丁(avermectins)的产生菌种的发酵液中有8个以上的组分,其中只有B1a组分才是制备伊维菌素的原料。Ikeda等[8]经过近十年的努力,已将阿弗米丁的生物合成基因簇全部搞清,并经过诱变与DNA重组,获得了仅产阿弗米丁B2a单一组分和B1a、B2a组份的重组工程菌,这不仅大大提高了阿弗米丁有效组分的发酵效价,且给提取、精制、半合成等后处理工序带来了很大的便利。可以预见,随着对各种工业生产的微生物药物生物合成途径的深入了解以及基因重组技术的不断进展,应用基因工程方法定向构建高产菌株的成功实例将越来越多。在抗生素发酵过程中供氧往往是一个限制因素,充足的氧气供给是药物工业发酵稳定和提高产量,降低成本的关键。传统的解决方法如增加通气量等对设备要求高,能量消耗大。20世70年代末在专性好氧菌透明颤(Vitreoscilla)中发现了血红蛋白(VHb),它能促进氧气扩散到细胞末端氧化酶上。于是人们想到了将其基因Vgb克隆到其它微生物中,以促进微生物在低氧条件下生长。
1988年Khosla等[9]从Vitreoscilla中分离出Vgb基因并将之转入大肠杆菌(E·coli),提高了大肠杆菌在溶氧量低于5%时对氧的利用率。目前已用克隆表达VHb的方法提高了放线紫红素、头孢霉素C、红霉素等产生菌及青霉素酰化酶基因工程菌的产量[10]。血红蛋白基因工程的研究和应用,必将对抗生素工业和其它重组药物发酵工业的节能等带来美好的前景。作为半合成头孢菌素类抗生素重要原料的7-氨基头孢烷酸（7-ACA),目前国内外仍以化学裂解头孢菌素C的工艺路线为主。国内外已报道可用经由GL-7-ACA的二步法(化学/酶法或二步酶法)来生产7-ACA,与化学裂解法相比不仅收率提高,且能大大减少环境污染,简化生产工艺。但二步法中关键的GL-7-ACA酰化酶在假单胞菌中表达量低而且分离纯化困难,限制了这种方法的应用。通过将GL-7-ACA酰化酶基因转入大肠杆菌中表达恰好可以解决这一问题[11]。最近又报道可将编码2个酶的基因直接转入头孢菌素C的生产菌种中,使其在发酵时直接产生7-ACA。调节基因在药物的生物合成中也起着重要作用,增加调节基因的基因量能够大幅提高药物产量。Hopwood等将放线紫红素生物合成的一个调节基因actⅡ导入原产生菌,尽管基因的拷贝数仅增加了2倍,放线紫红素的产量却增加了30~40倍。某些抗生素生产菌的产量不高,是由于其自
身对该抗生素的抗性不高。因此,利用高拷贝质粒的基因量效应,增加菌种对自身产生的抗生素的抗性,可能增加抗生素的产量。例如,将氨基糖苷-6-乙酰转移酶基因导入卡那霉素和新霉素产生菌,由于提高了对氨糖类抗生素的抗性,产量提高了2~6倍 2.2.2 基因治疗
基因治疗是指由于某种基因缺陷引起的遗传病通过转基因技术而得到纠正。临床实践已经表明: 基因治病已经变革了整个医学的预防和治疗领域。比如白痴病, 用健康的基因更换或者矫正患者的有缺损的基因, 就有可能根治这种疾病。现在已知的人类遗传病约有4000种, 包括单基因缺陷和多基因的综合症。运用基因工程技术或基因打靶的手段, 将病毒的基因杀灭, 插入矫正基因, 得以治疗、校正和预防遗传疾病的目的。目前, 基因治疗已扩大到肿瘤、心血管系统疾病、神经系统疾病等的治疗[12]。人类也已成功实现了肾、心、肝、胰、肺等器官的移植, 也有双器官和多器官的联合移植。
基因治疗有两种途径: 一是体细胞的基因治疗, 一是生殖细胞的基因治疗。由于生殖细胞的基因治疗操作技术异常复杂, 又涉及伦理缓行之理充足, 故尚无人涉足[13]。基因工程是20 世纪生命科学中最伟大的成绩, 开辟了生命科学的新纪元。经过几十年的发展, 基因工程技术已成为一个巨大的朝阳产业, 它可以超越动物、植物、微生物之间的界限, 创造出新的生物类型。基因工程不仅在医学上应用广泛, 而且也广泛应用在工业、农业、冶金、环保、资源、能源、畜牧渔业等领域, 为人类的丰衣足食和健康长寿提供了持续的实用价值很高的产品, 发展前景极为广阔。
参考文献：
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—谈基因工程技术如何应用于植物
摘要：通过基因工程改良品种在未来的农业生产中日益显示出巨大潜力。尽管科学家们对转基因植物的争论仍在继续，但可以肯定的是，转基因植物作为一项新兴的生物技术的产物，在解决日益膨胀的地球人吃饭问题和在解决长期困惑人类发展的资源短缺、环境恶化、经济衰退三大难题中起着越来越重要的作用。本文综述了基因工程技术在植物中的应用，就转基因植物的技术、发展、安全性和发展前景作了探讨。
关键词：基因工程技术；转基因植物；安全性；发展前景
所谓转基因植物是指利用基因工程技术，在离体条件下对不同生物的DNA进行加工，并按照人们的意愿和适当的载体重新组合，再将重组DNA转入生物体或细胞内，并使其在生物体内或细胞内表达的植物。自1983年首次获得转基因植物以来，转基因技术发展十分迅速，成功的转基因植物已达60多种，在世界上批准进入田间试验的转基因植物已超过500例。
1植物的转基因技术
由于植物的体细胞具有全能性，即单个的细胞经过合适培养后可以生成完整的植株。将分离能够编码所需产物的DNA片段克隆到适当的载体DNA中形成重组DNA，利用细菌繁殖扩增重组DNA并将重组DNA中的目的基因导入所需的培育的植物细胞中，筛选出所需要的细胞，通过细胞的全能性将转基因植株大规
模种植。
其中外源基因导入植物细胞的方法可分为DNA直接转化和以载体为媒介的基因转化。基因的直接转移是通过物理化学法将外源基因转入受体植物细胞的技术。常用的方法有化学刺激法、脂质体法、显微注射法和基因枪法等。其原理是利用物理化学方法暂时改变膜通透性，使DNA进入细胞，并最终整合到植物基因组中。
以载体为媒介的基因转化即使通过农杆菌或植物病毒介导感染受体植物将外源基因转入植物细胞的技术。目前，载体法主要包括土壤农杆菌Ti质粒、Ri质粒及植物DNA病毒等介导的遗传转化法。
2转基因植物的筛选与检测
通过转基因的方法将目的基因转入目的植物的细胞后，转化细胞与非转化细胞相比都只占少数，两者存在竞争，而转化细胞的竞争力通常比非转化细胞弱，因此必须对转化细胞进行筛选和检测。
在构建重组DNA时，人们已经引入了标记基因以对转化子选择和鉴定。报告基因由于其表达产物易于检测，已广泛用于转基因植物中。根据报告基因编码特点，大致分为两类：抗性基因和编码催化人工底物产生颜色变化的酶基因或发光基因。根据检测的不同阶段区分，有DNA检测法、RNA检测法及蛋白质检测法。DNA检测法只能检测到外源基因是否已经整合到植物基因组中，而RNA检测法得到的结果可判定外源基因是否转录，蛋白质检测法则可检测出外源基因是否翻译。
3改进转基因的技术
随着植物转基因技术的创立和发展，许多具有重要经济价值的农作物获得了转基因植株，植物转基因技术成为植物育种的一个重要手段，但仍有许多问题阻碍了转基因技术在生产上的广泛的应用。将外源DNA导入植物细胞后，只有外源DNA在宿主细胞及其子代细胞中稳定整合和有效的表达，才能培育出具有新的遗传性状的转基因植物。大量研究表明外源基因在转基因植物中有的能正常表达，有的表达量很低，甚至不表达，而且在不同的植株个体之间也存在着明显差异。所以提高转基因的表达，减少转基因的失活是转基因技术的一个重要内容。提高外源基因表达水平的措施有: 3.1农杆菌介导的遗传转化方法由于其产生的拷贝数相对较少，可以在一定程度上避免这个问题。
3.2使用信号肽，每种植物蛋白质的作用空间位置都是不同的，蛋白质分子的定向运输需要特殊多肽信号的引导作用。3.3选择强启动子和诱导型启动子
3.4使用强终止子 常用的终止子时CaMV35S终止子和根瘤土壤杆菌T-DNA的胭脂氨基酸合成酶基因的nos终止子。
3.5消除甲基化的影响 在载体上加上去甲基化功能的序列以防止甲基化。3.6使用植物偏爱的密码子 3.7使用MAR序列 3.8使用增强子
3.9对外源基因进行修饰和改造 3.10以叶绿体作为转化受体 3.11使用一些病毒编码蛋白
3.12在有性生殖后代中筛选单拷贝植株
4基因工程在农作物上的应用
4.1抗虫转基因作物
最早获得的转Bt（苏云金杆菌）毒素基因植物是烟草和番茄，随后Bt毒素基因相继被转化到许多其他农作物中，如棉花、水稻、玉米等，获得了一大批具良好抗虫性的转基因植物品种。4.2抗病毒作物
植物病毒感染时一个严重的问题，它可导致农作物生长缓慢、产量降低和质量减退。转基因植物的成功使作物抗病毒成为可能并加速了作物抗病育种的研究进程。自1986年Powel-Abel首次将烟草花叶病毒（TMV）外壳蛋白（Cp）基因导入烟草，培育出抗TMV植株以来，已经将许多 病毒成功的构建了多种抗病毒植株，近几年的研究结果表明病毒外壳蛋白在系统杂交保护中起着重要的作用，插入一段已克隆的CP基因可以延缓病毒的发展和阻止病毒在转基因植株中进一步传播。
4.3抗细菌和真菌作物
细菌和真菌病在全部植物病害中造成的损失最大，很多科学家都在尝试从植物的生物体内寻找抗病原菌的蛋白及其基因，并将其用于植物基因工程。自1980年，瑞典科学家首次从美国惜古比天蚕种成功分离了3种诱导型的杀菌肽进行了深入的研究。它们对很多种植物病原菌有较强的杀伤作用。现在的实验结果表明，杀菌肽作用于细胞的细胞膜，破坏膜的完整性，造成离子通道，最终导致细胞内含物泄露。目前，杀菌肽基因工程已经在烟草、马铃薯等植物上有了初步报道。
4.4抗除草剂转基因作物
人类自有农业起就一直跟杂草作斗争，它是农业生产中的大敌，但由于它具有较强的生态适应性和抗逆性，所以给杂草的防治带来了困难。在大量使用化学除草剂的同时往往会对作物造成一定的伤害。为此人们在研究抗除草剂基因，将该基因转入植物，在喷施除草剂杀死杂草时，不伤害作物。20世纪80年代中期，抗除草剂基因被转入了作物体内，从而获得了抗除草剂的转基因大豆、棉花、玉米、油菜、小麦等。
4.5抗非生物胁迫作物
干旱时困扰农业生产的重要因素之一，它给农业生产带来巨大的损失，这种损失甚至是毁灭性的。CMO基因是合成乙酰-甜菜碱第一步反应关键酶的基因，具有很强的抗旱性。Rathinasabathi等奖烟草中的CMO基因导入水稻中，获得抗旱性较强的转基因水稻。可以相信在未来培育出的耐旱的新作物品种应该是转入多种共同作用的外源基因。
5转基因植物的安全性
..5．1转基因植物的优缺点 关于转基因植物及其安全性问题，是近年来的热 门话题，但目前国际上没有统一说法，争论不一。其主要优点：①增加食物供应，解决粮食短缺；②减少农药使用，避免环境污染；③降低生产成本，降低食物售价；④增加食物营养，提高附加价值；⑤增加食物种类，提升食物品质；⑥提高生产效率，带动相关产业发展。其主要缺点：①可能对蝴蝶等昆虫造成伤害； ②可能影响周边植物的生长；③可能使昆虫或病菌在演化中增加抵抗力或产生新的物种，因此有可能会伤害作物。..5．2转基因食品的安全性和可接受性
随着转基因技术的发展，转基因食品的安全性越来越受到人们的关注。转基因食品与传统食品相比，区别在于：首先它含有利用转基因技术导人的外源基因；其次可能存在外源基因在受体内的表达产物。由于这两种成分的不确定性以及由
此引起的次级效应，对人类健康可能有潜在的危害。目前人t fx转基因食品生物的担忧基本上可以归纳为3类：(1)转基因食品里加入的新基因无意中对消费者造成的健康危害；(2)转基因作物中的新基因对食物链其他环节无意中造成的不良后果；(3)人为强化转基因作物的生存竞争性，对自然界生物多样性的影响。其中人们最为担心的是转基因食品对人体健康是否安全，转基因食品与常规食品比较有无不安全的成分。这就需要对其主要营养成分、微量营养成分、抗营养因子的变化、有无毒性物质、有无过敏性蛋白以及转入基因的稳定性和插入突变进行检测。另外是人们对..“基因逃逸”的担心。所谓..“基因逃逸”，就是指微生物之间可以通过转导、转化、接合进行基因转移。人们主要是担心转基因作物及基因食品的有害基因是否会逃逸到人体或环境中，加快抗药性问题。如野生植物种通过受粉可能会完成抗除草剂的基因改良，会变成..“超级杂草”，由此形成的具有非自然抗逆性的植物对那些以其为生的动物们来说，可能会导致生物链的断裂。
6转基因植物的发展前景
转基因植物在人类发展史上，是人类对自然的认识和改造的结果，必将对人类的生存带来重大影响。随着人们对遗传本质认识的深化和生物技术水平的不断提高，大量的转基因植物不断涌现。通过转基因技术来改良作物的品质是一个不可阻挡的趋势，因为现在有许多问题是无法通过常规育种来解决的，特别是耐旱、耐贫瘠等作物品种的培育。例如非洲的沙漠地区，如果按照现在的育种手段，它的粮食产量根本不可能满足基本生活保证，人们现在 寄希望于通过转基因技术生产一些比较耐旱、耐贫瘠的作物，以解决因为土地可耕面积的减少而给人类带来的压力。另外，转基因技术可以改良作物的营养成分，现在非常知名的一个例子就是瑞士联邦技术研究所成功开发的金色大米，它是通过将胡萝卜素合成途径的关键基因转到水稻中去，生产出的大米是金黄色的，这种水稻含有VA的合成原料，在解决吃饭问题的同时有助于治疗因缺乏VA而导致的眼睛失明等疾病，这对于发展中国家非常重要。因此转基因技术具有广阔的发展前景。但是，在大力发展转基因食品的同时，应建立完善的转基因产品评价和监控体系。1 993年，世界经济合作与开发组织发表了..“现代生物技术食品的安全评价——概念和原则”，提出了..“质量等同性概念”，其含义是..“当某个由转基因技术生产的新食品的各项主要特征(分子学特征、遗传形状、主要营养成分等)与现有食品大致相同，则认为该新食品的安全性也与现有食品大体等同。”我国政府也于1 993年、1 996年和2 001年分别颁布了有关条例和规定，要求对转基因食品的试验、生产、应用等实行生产许可证和经营许可证制度，同时对违规试验、生产、应用、进出口转基因食品的机构和人员，规定了严厉的处罚措施。但如何维护消费者的知情权，对转基因食品实行标志制，如何加强对进口转基因食品的检验监管，保证我国的食品卫生安全等尚需进一步完善，加强研究。
综上所述，基因工程技术作为一项新兴的生物技术，其发展趋势不可阻挡。但科学技术是把双刃剑的理论同样适合转基因植物。为此，我们应该适当借鉴国外经验，建立一套既符合中国国情，又与国际接轨，且科学合理的基因安全评价和监控体系，为日后我国转基因植物走向世界奠定基础。
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高等教育出版社 2010.3（4）谈家桢．基因工程．北京：农业出版社，1979．..基因工程抗体研究进展及其临床应用
摘要：基因工程抗体是继多克隆抗体和单克隆抗体之后的第三代抗体，近年来随着生物工程技术的发展，许多基因工程抗体陆续问世，本文详细介绍了基因工程抗体的研究进展，概述了基因工程抗体在临床方面的明显优势和应用潜力。关键词：基因工程抗体；研究进展；临床引用
Advances in Genetic Engineering Research and Clinical
Application of Antibody
Student majoring in Professional Veterinary Medicine Name DongChuanJun
Tutor Name MinLingJiang
Abstract:Genetic engineering antibody is the third generation antibody after polyclonal antibody and monoclonal antibody.In recent years,with the development of bio-engineering techniques,many genetically engineered antibodies have been presented to the public,and this article elaborates on research progress of the genetic engineering antibody,and its obvious advantages and potentials in clinical application.Key words: Genetically engineered antibodies;Research;Clinical application.转基因技术迅速发展，其应用和发展的领域日益夸大。但转基因技术的弊端日益凸现，引起众多关注的目光。就转基因技术本身而言，社会各界对它的态度各有异同。不同的国家不同的民族和不同的个体对转基因技术的态度大相径庭。如何看待转基因技术？如何去应用和发展转基因技术？这些都是我们亟待解决的问题。基因工程抗体介绍
1.1 基因工程简介
基因工程抗体是借助DNA重组和蛋白质工程技术，在基因水平对免疫球蛋白分子进行切割、拼接、修饰和重新组装的一种新型抗体。所制备的抗体去除或减少了可引起副作用的无关结构，但保留天然抗体的特异性和主要生物学活性，并可赋予抗体分子以新的生物学活性的总称【1】。
由于目前制备的抗体均为鼠源性临床应用时，对人是异种抗原，重复注射可使人产生抗鼠抗体，从而减弱或失去疗效，并增加了超敏反应的发生，因此，在 80 年代早期，人们开始利用基因工程制备抗体，以降低鼠源抗体的免疫原性及其功能[2]。目前多采用人抗体的部分氨基酸序列代替某些鼠源性抗体的序列，经修饰制备基因工程抗体，称为第三代抗体[3]。1.2 基因工程抗体种类
基因工程抗体主要包括嵌合抗体、人源化抗体、完全人源抗体、单链抗体、双特异性抗体等。
1.2.1 嵌合抗体
嵌合抗体（chimeric atibody）是最早制备成功的基因工程抗体。它是由鼠源性抗体的V区基因与人抗体的C区基因拼接为嵌合基因，然后插入载体，转染骨髓瘤组织表达的抗体分子【4】。因其减少了鼠源成分，从而降低了鼠源性抗体引起的不良反应，并有助于提高疗效。
1.2.2 人源性抗体
是将人抗体的CDR代之以鼠源性单克隆抗体的CDR，由此形成的抗体，鼠源性只占极少，称为人源化抗体。
1.2.3 完全人源化抗体
采用基因敲除术将小鼠Ig基因敲除，代之以人Ig基因，然后用Ag免疫小鼠，再经杂交瘤技术即可产生大量完全人源化抗体。
1.2.4 单链抗体
是将Ig的H链和L链的V区基因相连，转染大肠杆菌表达的抗体分子，又称单链FV（single chain fragment of variable region,sFv）。SFv穿透力强，易于进入局部组织发挥作用。
1.2.5 双特异性抗体
将识别效应细胞的抗体和识别靶细胞的抗体联结在一起，制成双功能性抗体，称为双特异性抗体。如由识别肿瘤抗原的抗体和识别细胞毒性免疫效应细胞（CTL细胞、NK细胞、LAK细胞）表面分子的抗体（CD3抗体或CD16抗体）制成的双特异性抗体，有利于免疫效应细胞发挥抗肿瘤作用。基因工程抗体的研究进展
2.1抗体工程的发展
最近，美FD强调：目前在临床试验中基因工程抗体约占生物制剂的30%。重组抗体的体积越来越小，或被重新构建成多价分子，或与其它分子相融合，如放射性核素、毒素、酶、脂质体和病毒的药剂设计成为可能。
【5】
。重组技术的出现使筛选、人源化、抗体的生产得到革新，并取代杂交瘤技术，从而使以抗体为基础
图1：抗体的发展
2.2目前基因工程抗体制备的主要方法 2.2.1人鼠嵌合抗体
主要是利用基因重组技术，把鼠抗体的重轻链可变区部分与人抗体重轻链恒定区的进行重组，减少鼠源结构，增加人源结构，而保持抗体与原抗原的特异性结合【6】。
1.首先把小鼠编码Ig重轻链的基因剔除。2.制备表达人的Ig重轻链的转基因小鼠。
3.上二种小鼠回交，获得只表达人Ig重轻链的基因的小鼠。当用抗原免疫后，小鼠可产生完全人源抗体。2.2.2 噬菌体抗体库技术
1.人的Ig重轻链可变区基因片段展示在噬菌体表面,组成抗体库。2.过噬菌体把抗体的表型和基因型相偶联，易进行分子克隆和基因操作。3.抗体库的来源影响筛选结果（免疫和正常人）。4.高通量筛选与抗原结合的抗体，但亲和力低。2.2.3 用人的骨髓瘤细胞直接制备全人抗体
由于骨髓瘤细胞稳定性高和融合率高，所以要建立好的人骨髓瘤细胞。2.2.4 B细胞永生化技术
用EB病毒将人淋巴细胞永生化可产生分泌抗体的B细胞克隆【7】。这一技术较为成熟，但是存在抗体分泌不稳定的缺点，限制了其应用。或直接分离分泌抗体的B细胞,用PCR获得重轻连,构建全人抗体。2.3抗体药物发展现状
1.FDA已批准上市的抗体药物。
2.SFDA(中国)已批准上市及临床研究的的抗体药物。2.4工程抗体的未来发展与展望 2.4.1单克隆抗体的市场需求
图2：单抗体市场的预测与分析 3.基因工程抗体药物的应用
随着生物工程技术的发展，许多基因工程抗体 陆续问世，并在医学领域的许多方面都具应用潜力，如病毒感染、肿瘤、自身免疫性疾病、同种异体移植物注射、哮喘、中风和青光眼治疗，尤其在诊断和治疗肿瘤性疾病及抗感染方面优势明显。
3.1基因工程抗体药物的临床应用
3.1.1 在肿瘤性疾病诊疗方面的应用
放射性标记抗体在肿瘤影像和治疗中很重要，并可有效进行药代动力学评估．以标记抗体注入人体内显示肿瘤部位抗原与抗体结合的放射浓集称放射免疫显像，由于基因工程抗体如单链抗体、Fab片段等分子量小、能很快清除、组织穿透力强，所以更适于放射免疫显像【8】。
恶性肿瘤的导向治疗，是通过重组技术将抗肿瘤相关抗原的抗体与多种分子
融合，这些分子在抗体结合靶分子后可提供重要辅助功能．这些分子包括：放射性核素、细胞毒药物、毒素、小肽、蛋白、酶和用于基因治疗的病毒．对肿瘤治疗来说，设计的双特异性抗体可有效针对低水平的肿瘤相关抗原，并将细胞毒物质输送到肿瘤细胞．此外，抗体还可与携带药物的脂质体、各种PEG偶联，从而增强体内运输和药代动力学。作为免疫脂质体，转铁蛋白受体抗体可使药物通过血脑屏障到达大脑．抗体酶复合物作为前体药物也被用于基础肿瘤治疗。3.1.2基因工程抗体的抗感染作用
预防和治疗感染性疾病常用的药物是疫苗和抗生素，但对于一些尚无有效预防及治疗手段的感染性疾病如 SARS、AIDS等，抗体治疗可做为首选方案。如在治疗AIDS方面，利用抗体工程技术已成 功地制备出HIV病毒整合菌的单链抗体ScAb2219，对HIV病毒感染的早期和晚期具有有效的抑制作用，并可望成为S基因治疗的有效手段。呼吸道合胞病毒(RSV)易引起婴儿呼吸道疾病，如细支气管炎和肺炎，并可引起严重的并发症，目前已有人源化单克隆抗体Palivizumab经美国FDA批准上市，临床实验证明无毒、副反应，并可显著降低婴儿的住院率。我国率先建立了针对SARS的基因工程抗体库，这对于 SARS的预防、诊断和治疗都将起到重要作用和深远影响。对于中和其它病原分子，FDA已批准 Fab单体分子作为抗蛇毒药物；scFv片段和寡克隆复合物作为抗细菌毒素药物。3.1.3 细胞内抗体
随着细胞信号转导和抗体工程技术的发展，诞生了细胞内抗体技术。这项技术是指在细胞内表达并被定位于亚细胞区室如胞核、胞浆或某些细胞器，与特定的靶分子作用从而发挥生物学功能的一类新的工程抗体。最典型的是 scFv，被称为内抗体。胞内抗体技术主要应用在抑制病毒复制特别是 HIV-1复制、肿瘤基因治疗方面，现已逐渐拓展到中枢神经系统疾病、移植排斥和自身免疫性疾病等领域。体外培养来源于无关供体的角质形成细胞同种移植物用于严重的烧伤病人的治疗，往往会引起排斥反应，而MHCI类分子是引起移植排斥的重要抗原。Mhashikar等用编码抗 MHC I单链抗体的腺病毒转染角质形成细胞，结果显示明显降低了MHCI的表达，细胞内抗体介导的表型敲除是否有利于同种移植物的存活还需要进一步研究。
3.1.4 用于未来诊断的生物传感器和微矩阵技术
生物传感器和微阵列技术在不久以后将有可能成为主要的体外诊断技术．对于大量诊断试剂盒，抗体有高敏感性和高特异性．从最初的玻璃界面到现在的多种蛋白亲和界面，用于诊断的抗体微矩阵界面不断发展．随着体外机械人的出现，这一技术将进一步发展，并用于微生物污染、寄生虫和生物病原体的检测。
3.2基因工程抗体药物的应用领域
1.肿瘤导向治疗；
2.哮喘、银屑病、类风湿性关节炎、红斑狼疮、急性心梗、脓毒症、多发性硬化症及其他自身免疫性疾病； 3.心脑血管疾病； 4.感染性疾病； 5.“生物导弹”
4.基因工程技术的发展方向
针对基因工程抗体药物的应用，明确基因工程技术的发展方向，从而让基因工程抗体对我们更有利[9]。
1.开发针对神经系统、肿瘤、心血管系统、艾滋病及免疫缺陷等重大疾病的多肽、蛋白质和核酸等新生物技术产品；
2.选择一批市场前景好的生物技术产品及疫苗、诊断用单克隆抗体，开发重点是乙肝基因疫苗与单克隆抗体诊断试剂等；
3.开发靶向药物主要是开发抗肿瘤药物。目前治疗肿瘤药物确实存在一个所谓“敌我不分”的问题。在杀死癌细胞的同时，也杀死正常细胞。导向治疗就是针对这个问题提出来。所谓导向治疗就是利用抗体寻找靶标，如导弹的导航器，把药物准确引入病灶，而不伤及其他组织和细胞；
4.人源化的单克隆抗体的研究开发。抗体可以对抗各种病原体，亦可作为导向器，但目前的单克隆抗体，多为鼠源抗体，其本身也被异种生物体视为抗原，当被注入人体后会诱导产生抗体或激发免疫反应。目前国外已研究噬菌体抗体技术，嵌合抗体技术，基因工程抗体技术以解决人源化抗体问题；
5.血液替代品的研究与开发仍然占重要地位。血液制品是采用大批混合的人体血浆制成的，由于人血难免被各种病原体所污染，如艾滋病病毒及乙肝病毒等，通过输血而使接受输血的人感染艾滋病或乙型肝炎的案例时有发生，因此利用基因工程开发血液替代品引人注目。
基因工程抗体的进展已使抗体制备技术进入了一个全新时代，尤其药物抗体库的进展，解决了人源抗体的研制，促进了各种性能优良抗体以及具有多种功能的抗体融合蛋白的开发，可以预见基因工程抗体的研制正在进入一个新的高峰。但是抗体的亲和力减弱，与完整抗体结构相比，功能明显就会降低。人们对可能出现的新组合、新性状会不会影响人类健康和环境，还缺乏知识和经验，按目前的科学水平还不能完全精确的预测。所以我们要在抓住机遇，大力发展基因工程技术的同时，需要严格管理，充分重视转基因抗体的安全性
【10】。
致谢：非常感谢闵令江老师在我大学的学习阶段教给自己基因工程这门学科。我从中学到了很多知识，认识了关于基因工程方面的一些问题，使自己从一无所知到现在基本认识了这门学科，在此我向老师表示我诚挚的谢意，感谢老师的诚
挚教导。
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基因工程在现代社会中的应用与前景
在基因水平上，采用与工程设计十分类似的方法，按照人类的需要进行设计，然后按设计方案创建出具有某种新的性状的生物新品系，并能使之稳定地遗传给后代，这就是基因工程。
基因工程一般包括四个步骤：一是取得符合人们要求的DNA片段，即“目的基因”。被称为“分子剪刀”的“限制性转切酶”可以在DNA分子上找到特定的“切点”，然后将认准的双链交错切断。自70年代以来，人们已找到400多种形形色色的“分子剪刀”。二是将目的基因与质粒或病毒DNA连接成重组 DNA。在用同一种“分子剪刀”剪切的两种DNA碎片中加上“分子针线”——“DNA连接酶”，就可以把两种DNA片段重新连接起来。三是把重组DNA引入某种细胞。把“拼接”好的DNA分子运送到受体细胞中去，必须寻找一种分子小、能自
由进出细胞，而且在装载了外来的DNA片段后仍能照样复制的运载体。理想的运载体是质粒，因为质粒能自由进出细菌细胞。四是把目的基因能表达的受体细胞挑选出来。目的基因的导入过程是肉眼看不到的。因此，要知道导入是否成功，事先应找到特定的标志。例如我们用一种经过改造的抗四环素质粒PSC100作载体，将一种基因移入自身无抗性的大肠杆菌时，如果基因移入后大肠杆菌不能被四环素杀死，就说明转入获得成功了。
科学家曾预言，21世纪是基因工程的世纪。基因工程对人类来说，作用是不可估量的，意义是深远的。
随着人类对基因研究的不断深入，发现许多疾病是由于基因结构与功能发生改变所引起的。科学家将不仅能发现有缺陷的基因，而且还能掌握如何进行对基因诊断、修复、治疗和预防，这是生物技术发展的前沿。这项成果将给人类的健康和生活带来不可估量的利益。
所谓基因治疗是指用基因工程的技术方法，将正常的基因转如病患者的细胞中，以代病变基因，从而表达所缺乏的产物，或者通过关闭或降低异常表达的基因等途径，达到治疗某些遗传病的目的。目前，已发现的遗传病有6500多种，其中由单基因缺陷引起的就有约3000多种。因此，遗传病是基因治疗的主要对象。
基因治疗的最新进展是即将用基因枪技术于基因治疗。其方法是将特定的DNA用改进的基因枪技术导入小鼠的肌肉、肝脏、脾、肠道和皮肤获得成功的表达。这一成功预示着人们未来可能利用基因枪传送药物到人体内的特定部位，以取代传统的接种疫苗，并用基因枪技术来治疗遗传病。
目前，科学家们正在研究的是胎儿基因疗法。如果现在的实验疗效得到进一步确证的话，就有可能将胎儿基因疗法扩大到其它遗传病，以防止出生患遗传病症的新生儿，从而从根本上提高后代的健康水平。
加快农作物新品种的培育
科学家们在利用基因工程技术改良农作物方面已取得重大进展，一场新的绿色革命近在眼前。这场新的绿色革命的一个显著特点就是生物技术、农业、食品和医药行业将融合到一起。
基因技术的突破使科学家们得以用传统育种专家难以想象的方式改良农作物。例如，基因技术可以使农作物自己释放出杀虫剂，可以使农作物种植在旱地或盐碱地上，或者生产出营养更丰富的食品。科学家们还在开发可以生产出能够防病的疫苗和食品的农作物。
基因技术也使开发农作物新品种的时间大为缩短。利用传统的育种方法，需要七、八年时间才能培育出一个新的植物品种，基因工程技术使研究人员可以将任何一种基因注入到一种植物中，从而培育出一种全新的农作物品种，时间则缩短一半。
基因工程自20世纪70年代兴起之后，经过二十多年的发展历程，取得了惊人的成绩，基因治疗
特别是近十年来，基因工程的发展更是突飞猛进。基因转移、基因扩增等技术的应用不仅使生命科学的研究发生了前所未有的变化，而且在实际应用领域——医药卫生、农牧业、食品工业、环境保护等方面也展示出美好的应用前景。
基因工程与医药卫生
目前，基因工程在医药卫生领域的应用非常广泛，主要包括以下方面： 1.基因工程药品的生产：
许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限，其价格往往十分昂贵。
微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内，让它们产生相应的药物，不但能解决产量问题，还能大大降低生产成本。⑴基因工程胰岛素
胰岛素是治疗糖尿病的特效药，长期以来只能依靠从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素，其产量之低和价格之高可想而知。
将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌，每2000L培养液就能产生100g胰岛素！大规模工业化生产不但解决了这种比黄金还贵的药品产量问题，还使其价格降低了30%-50%!⑵基因工程干扰素
干扰素治疗病毒感染简直是“万能灵药”！过去从人血中提取，300L血才提取1mg！其“珍贵”程度自不用多说。
基因工程人干扰素α-2b（安达芬）是我国第一个全国产化基因工程人干扰素α-2b，具有抗病毒，抑制肿瘤细胞增生，调节人体免疫功能的作用，广泛用于病毒性疾病治疗和多种肿瘤的治疗，是当前国际公认的病毒性疾病治疗的首选药物和肿瘤生物治疗的主要药物。⑶其它基因工程药物
人造血液、白细胞介素、乙肝疫苗等通过基因工程实现工业化生产，均为解除人类的病苦，提高人类的健康水平发挥了重大的作用。基因工程药品是制药工业上的重大突破。
目前用基因诊断方法已经能够检测出肠道病毒、单纯疱疹病毒等许多种病毒。
基因工程与农牧业、食品工业
基因工程在农牧业生产上的应用主要是培育高产、优质或具有特殊用途的动植物新品种。基因工程在农业方面的应用主要表现在两个方面。首先，是通过基因工程技术获得高产、稳产和具有优良品质的农作物。例如，用基因工程的方法可以改善粮食作物的蛋白质含量。其次，是用基因工程的方法培育出具有各种抗逆性的作物新品种。自然界中细菌的种类是非常多的，在细菌身上几乎可以找到植物所需要的各种抗性，如抗虫、抗病毒、抗除草剂、抗盐碱、抗干旱、抗高温等。如果将这些抗性基因转移到作物体内，将从根本上改变作物的特性。
基因工程在畜牧养殖业上的应用也具有广阔的前景，科学家将某些特定基因与病毒DNA构成重组DNA，然后通过感染或显微注射技术①将重组DNA转移到动物受精卵中。由这种受精 卵发育成的动物可以获得人们所需要的各种优良品质，如具有抗病能力、高产仔率、高产奶率和高质量的皮毛等。
在工业上，由于用微生物进行发酵生产要比在大田中进行农牧业生产具有许多优越性，因而它已成为农牧业发展的一个远景方向。而要实现这一目标，基因工程将是最有效的手段。例如，有人设想并正在试验将抗生素生产菌放线菌或霉菌的有关遗传基因转移至发酵时间更短、更易于培养的细菌细胞中；将动物或人产胰岛素的遗传基因转移至酵母或细菌的细胞中；将家蚕产丝蛋白的基因引入细菌细胞中；把人或动物产抗体、干扰素、激素或白细胞介素（interleukin）等的基因转移至细菌细胞中；把不同病毒的表面抗原基因转移到细菌细胞中以生产各种疫苗；用基因工程手段提高各种氨基酸发酵菌的产量；构建分解纤维素或木质素以生产重
要
代
谢
产
物的工
程
菌；
基因工程还可以为人类开辟新的食物来源。
基因工程与环境保护
基因工程的方法可以用于环境监测基因工程还可以用于被污染环境的净化。造成环境污染的农药，并试图通过基因工程的方法回收和利用工业废物。凡此种种，都是一些可望取得成功和发展前景十分光明的研究课题。
例如，目前用100000克胰脏只能提取3～4g胰岛素，而用“工程菌”进行发酵生产，则只要用几升发酵液就可取得同样数量的产品。1978年，美国有两个实验室合作，使E．coli产生大白鼠胰岛素的研究已获成功。接着，又报道了通过基因工程使E．coli合成人胰岛素实验成功的消息。他们在实验室中曾将人胰岛素A、B两链的人工合成基因分别组合到E．coli的不同质粒上，然后再转移至菌体内。这种重组质粒可在E．coli细胞内进行正常的复制和表达，从而使带有A、B链基因的“工程菌”菌株分别产生人胰岛素的A、B链，然后再用人为 的方法，在体外通过二硫键使这两条链连接成有活性的人胰岛素。另外，在1977年，国外已利用基因工程技术，使E．coli生产出一种名为生长激素释放因子“SRIH”的动物激素（一种十四肽，能抑制其他激素的释放和治疗糖尿病等），它原来要从羊的脑下垂体中提取，宰50万头羊也只能提取5mg的产品，而现在只要用10L发酵液就可获得同样的产量。近年来，应用遗传工程获得这类产品的例子正与日俱增，尤其是多肽类物质，如脑啡肽（大脑中的镇痛物质）、卵清蛋白（即“OV”，389肽）、干扰素（用于治疗病毒性感染）、胸腺素α-1（有免疫援助因子的作用，可治疗癌症）、乙型肝炎疫苗和口蹄疫病毒疫苗等。我国学者也急起直追，在脑啡肽、α-干扰素、γ-干扰素、人生长激素、乙型肝炎疫苗、含乙肝表面抗原基因的牛痘病毒株以及青霉素酰化酶等的基因工程研究中，取得了一系列令人鼓舞的成果。
（2）基因工程在农业上的应用基因工程在农业上应用的领域也十分广阔。有人估计，到本世纪末，每年上市的植物基因工程产品的价值，相当于医药产品的十倍。几个主要的应用领域包括：①将固氮菌的固氮基因转移到生长在重要作物的根际微生物或致瘤微生物中去，或是干脆将它引入到这类作物的细胞中，以获得能独立固氮的新型作物品种。根据估算，利用前一方法，其研究经费仅及通过常规方法发展氮肥工业以达到同样效果的二百分之一至二千分之一；而后一途径则更省事，其成本还不到上述的二千分之一；②将木质素分解酶的基因或纤维素分解酶的基因重组到酵母菌内，使酵母菌能充分利用稻草、木屑等地球上贮量极大并可永续利用的廉价原料来直接生产酒精，并可望为人类开辟一个取之不尽的新能源和化工原料来源；③改良和培育农作物和家畜、家禽新品种，包括提高光合作用效率以及各种抗性基因工程（植物的抗盐、抗旱、抗病基因以及鱼的抗冻蛋白基因）等。
基因工程的前景
从70年代起逐步建立起来的基因工程技术，使基因或一些具有特殊功能的DNA片段的分离变得十分容易。这些基因或特殊DNA片段的一级结构（即它们的核苷酸序列）的测定也是十分容易的，由基因的核苷酸序列去推测蛋白质的氨基酸残基的序列也变得轻易而举。利用计算机技术可以很容易的对推测出来的蛋白质进行高级结构的分析，可以对来自不同生物种类的基因序列进行同源性分析。所有这些方法或技术的广泛使用，不仅大大地推动了分子生物学的迅猛发展，而且也大大推动了生命科学各个分支领域的迅速发展。因此，基因工程技术的第一个重要应用领域就是大大的推动了科学理论研究的发展。
由于基因工程是从遗传物质基础上对原有的生物（常常称之为受体生物）进行改造，经过改造的生物就会按照研究者的意愿获得某种（些）新的基因，从而使该生物获得某些新的
遗传性状。这种性状可以用人的肉眼直接观察到，也可能是通过某些反应或仪器间接观察到。这种受体生物可能是微生物，植物或动物，因而它会涉及到许多生产行业。
基因工程技术几乎涉及到人类的生存所必需的各个行业。比如将一个具有杀虫效果的基因转移到棉花、水稻等农作物种中，这些转基因作物就有了抗虫能力，因此基因工程被应用到农业领域；要是把抗虫基因转移到杨树、松树等树木中，基因工程就被应用到林业领域；要是把生物激素基因转移到支物中去，这就与渔业和畜牧业有关了；如果利用微生物或动物细胞来生产多肽药物，那么基因工程就可以应用到医学领域。总之一句话，基因工程应用范围将是十分广泛的
土木工程硕士论文范文 第2篇
一、采矿工程毕业论文简介
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土木工程硕士论文范文 第3篇
关键词：建筑与土木工程领域,工程硕士教育,学位标准制度,课程体系制定,培养过程
我国从1997年国务院学位委员会正式批准设置工程硕士专业学位，到2009年已有180多个培养单位、40个招生领域，年招收4万多名学生。自2009年起，教育部扩大招收以应届本科毕业生为主的全日制专业学位研究生范围，2009年招收全日制工程硕士1.8万人。工程硕士专业学位已成为我国专业学位研究生教育中涉及面最广、招生人数最多的专业学位类型。
为进一步完善专业学位制度，推进工程硕士研究生教育的改革与发展，培养适应创新型国家建设需要的高层次、应用型工程人才，制订“工程硕士学位标准”已是我国当前工程硕士研究生教育管理工作的首要任务。本文通过探讨建筑与土木工程领域工程硕士教育的特点、培养的特色与培养目标，对建筑与土木工程领域工程硕士的培养及学位标准的相关内容进行了讨论，提出了本领域工程硕士学位标准制订的一些基本思路和建议。
一、学位标准制定的前提
1. 建筑与土木工程领域的覆盖范围与主要特征
建筑与土木工程是一个口径宽、覆盖面广的工程领域。按学科特征，本领域主要对应土木工程一级学科，包括的二级学科有：结构工程、岩土工程、桥梁与隧道工程、防灾减灾工程及防护工程、市政工程及供热、供燃气、通风及空调工程等。
2. 建筑与土木工程领域工程硕士特点
工程硕士的培养具有很多共性特点，工程硕士培养的是应用型、开发型、复合型的高级工程技术和高级工程管理人才，工程硕士学位论文的选题以技术开发和技术改造课题为主，强调应用性、开发性、创新性，强调论文的应用效果和应用价值。
建筑与土木工程领域的培养有着本领域所特有的特点。首先，基础理论知识在培养过程中起着重要作用，本领域的工程硕士应具有扎实的数学、力学的基础理论，才能胜任建筑与土木工程设计、施工、管理等高级技术工作。其次，学科的交叉性较强，随着科学技术的快速发展，计算机、信息、控制等新兴学科在建筑与土木工程领域中有着越来越多的应用，本领域的工程硕士培养，应重视现代科学技术和传统建筑与土木工程技术的交叉，涉及到设计、施工、维护与加固、管理、实验、计算机分析与仿真等多项技术。
3. 建筑与土木工程领域工程硕士培养目标
建筑与土木工程领域工程硕士专业学位主要培养面向企业的具有创新能力的应用型、复合型高层次工程技术和工程管理人才。建筑与土木工程领域工程硕士专业学位获得者在学术上应掌握本领域坚实的基础理论和宽广的专业知识;了解本领域的技术现状和发展趋势;掌握解决工程问题的先进技术方法和现代技术手段;具有独立从事(领域内某一方向)工程技术或工程管理工作的能力;具备较强的创新能力、继续学习能力和国际视野;掌握一门外语，能够顺利阅读本领域内的国外科技文献资料，并能与国外同行进行技术交流。
二、课程体系制定的要求
根据建筑与土木工程领域工程硕士培养特点及培养目标，学位标准中课程体系的设置有以下三方面的要求。
1. 知识结构要求
建筑与土木工程领域工程硕士的知识结构包括以下几点。
(1)基础知识：要求在工科本科毕业生所掌握的数学和物理知识基础上，有选择性地学习各类应用数学工具，提高科学思维和逻辑推理能力，进行科学与工程的分析和处理。
(2)专业知识：要求在本领域本科毕业生所必须掌握的专业基础知识和专业知识的基础上，掌握本领域某个学科方向较为系统深入的专业基础知识及较为全面的专业技术知识。
(3)人文知识：要求通过学习自然辨证法、信息检索、知识产权等人文社科知识，培养工程硕士的人文精神、哲学思想和科学方法，用科学发展观指导工程实践。
(4)工具性知识：工程硕士生应具有的一些工具性知识，如熟练掌握一门外语、掌握一些行业内常用软件及常用的规范、掌握专利撰写及阅读能力、掌握行业相关的法律等知识。
2. 能力要求
建筑与土木工程领域工程硕士要求具有的能力有：获取知识能力、应用知识能力、工程实践能力、开拓创新能力、组织协调能力、国际交流能力。
3. 素质要求
建筑与土木工程领域工程硕士要求具有高度的社会责任感和历史使命感，具有科学精神，具有强烈的事业心和责任心，具有良好的身心素质和环境适应能力。
三、培养过程的要求
1. 建筑与土木工程领域工程硕士的培养要点
(1)全日制工程硕士：本领域全日制工程硕士生毕业后主要到设计院、施工单位等企事业单位从事设计、施工与管理等工作。大部分学生来源于应届本科毕业生或工作年限不长的本科毕业生，实践经验不足，因此需要加强企业实践环节。全日制工程硕士生的学制为2—4年，采用课程学习、专业实践教学和学位论文相结合的培养方式，其中专业实践教学至少半年，应届本科毕业生的实践教学时间不少于1年，学位论文不少于1年。
(2)非全日制工程硕士生：非全日制工程硕士生的生源大部分来自企业，学习方式为进校不离岗，主要用业余时间或适当集中的工作时间学习;学生由于专业背景不一样，基础知识及专业知识所涉及的领域和程度差别较大，所在单位不论在其规模和单位性质上都呈多样性，所以培养方案的设置要求能够满足生源单位对专业人才的需求，具有针对性。非全日制工程硕士生的学制一般为3年，最长不超过5年，其中课程学习时间不少于1年，学位论文工作时间不少于1年(从学位论文开题起计算)。
2. 工程硕士培养对导师的要求及职责
工程硕士培养实行双导师制，两位导师都必须具有副高职称或已获得相关领域博士学位，其中一位导师来自培养学校，即校内导师;另一位导师来自企业，即校外导师。
校内导师主要指导工程硕士生制定培养计划、学习;校外导师主要指导工程硕士生的企业实践、推荐或提供工程研究(或设计)课题。校内导师与校外导师共同商议，指导学位论文选题工作;指导学位论文研究，并进行阶段性检查;指导撰写学术论文和学位论文，防范论文的抄袭等不良现象，严把论文质量关。
3. 工程硕士学位论文的要求
(1)对学位论文选题报告的要求：在进行选题报告前，工程硕士生应广泛阅读相关资料，对选题内容进行深入了解，在此基础上写出与学位论文紧密相关的文献综述。导师对选题报告作出评价，以报告会形式进行评审。
(2)对论文主要工作环节检查的要求：工程硕士生要根据学位论文选题报告，总结已取得的阶段性成果、下一步工作计划和研究内容;校内外导师应对指导的工程硕士生的学位论文进展提出意见;培养单位的工程领域小组应对论文工作进行中期检查和评审。
(3)对学位论文内容的要求：学位论文应综合运用基础理论、科学方法、专业知识和技术手段对所解决的工程实际问题进行分析研究，并能在某方面提出独立见解;学位论文反映的内容应具有一定的技术难度或理论深度，工作量饱满;论文成果具有先进性和实用性。
(4)对学位论文评审的要求：工程硕士生在申请答辩前学位论文必须送交本领域2名专家评审，至少一名为企业专家;参加评审的专家应具有副高以上职称，有丰富的培养研究生经验;校内外导师均不能作为评审专家;评审专家应根据论文类型分工程设计类、技术研究类、工程管理类进行评审;评审未通过的论文，应根据专家评审意见，在导师指导下，由论文作者进行修改，3个月后可申请复审;复审仍未通过者应继续修改学位论文，如超过规定最长学习期限则自动放弃申请答辩。
(5)对申请学位论文答辩的要求：学位论文评审通过后须得到校内导师同意方能申请学位论文答辩;办理学位论文答辩时(或答辩前)，同时参加各省市评估院组织的学位论文盲审抽查，被抽中的学位论文有培养学校送交双盲审，此学位论文暂不提交学位评定委员会学位评审;组成3人或3人以上的副高级技术职称以上或具有博士学位的中级职称者的答辩委员会，答辩委员会成员中校内外导师只能参加1人，如答辩委员会成员为3人，则校内外导师不能担任答辩员，答辩委员会成员中至少应有半数人员来自企业，答辩委员会主席应由企业专家担任。
4. 工程硕士生学位申请与授予的要求
工程硕士生满足以下基本要求：修满培养方案规定的课程和学分且成绩合格;完成学位论文选题报告;中期检查通过;完成必修环节;参加学位论文双盲抽查，抽中者通过双盲评审;完成学位论文工作且评阅的答辩通过。
同时，全日制工程硕士的学位标准也应有所提高，要求以第一作者(或校内导师第一作者、工程硕士生第二作者)发表一篇学术论文;或出版著作;或获奖励(科研、设计、工程技术);或研究成果通过鉴定;或获批专利。
满足上述条件后由培养学校学位评定委员会评审与投票，经投票通过者，培养学校发放国务院学位委员会办公室统一制作的学位证书。
三、结语
工程硕士研究生教育已在我国开展了十多年，制订工程硕士学位标准是我国工程硕士专业学位教育自身发展的需求与社会对创新型人才的迫切需求相结合的产物，也是工程硕士研究生教育在自主与自律思想指导下实现可持续发展的必然结果，是适应我国创新型国际化人才培养大趋势的要求，它不仅是一项复杂的系统工程，而且是一项科学性极强的工作。科学的学位标准须建立在对其属性的准确认识和把握的基础上，同时标准的制订也须经历从制订到实践运用，再到进一步修订完善的发展过程。这就要求国家教育行政管理部门、研究机构、培养单位及行业组织等积极开展学位标准的前期理论基础研究和实践探索，充分吸纳国外先进学位标准制订的程序、方法和实践经验，构建起完善的学位标准建设与管理体系，使我国工程硕士学位标准的制订工作尽快步入国际先进行列。
参考文献
[1]全国工程硕士专业学位教育指导委员会秘书处.工程硕士专业学位标准建设工作概要, 2009, 5.13.
[2]李宏, 刘东, 肖建国.工程硕士学位标准体系的构想[J].学位与研究生教育, 2007, (3) :26-30.
[3]李宏, 刘东, 王东红.工程硕士学位标准属性与制订的基本思路[J].学位与研究生教育, 2007, (12) :53-56.
土木工程硕士论文范文 第4篇
英语“观点型”议论文是高考和模拟考的热点写作形式，其在文章结构和段落展开上有着鲜明特点。对于这类文章的写作训练，可以通过引导学生学习经典范文的方式，让学生宏观感知范文的谋篇布局，指导学生分析和模仿范文写作结构，积累范文语料素材，体味范文主旨内涵，再进行相应的写作训练，轻松达到提高学生的写作技巧和水平的目的。
比如，在最近的一次考试中，笔者的学生们遇到了这样一个作文题：“People can go to shop， bank and work with smart phones. But the danger of smart phones is people are getting isolated and losing some social skills. To what extent do you agree with this opinion？”，也就是让学生们评价“智能手机的消极影响”。由于是学生们第一次接触议论文写作，为了让学生写出议论文的结构特点，笔者补充了一篇类似结构的“评价电脑的消极影响”的范文，供学生们阅读并加以指导，让学生们体会写出“观点型”议论文应有的语言文字和结构特点。
在引导学生们对范文进行分析和学习时，笔者做了如下几个方面的工作。
一、引导学生分析整篇范文的结构
1.运用图示处理文章结构。图示法中的概念图能将文章结构形象化、系统化和图示化，是一种“语义网络的可视化表示方法”，能帮助学生构建语篇的逻辑框架。学生在运用概念图处理范文结构的过程中，可以帮助他们熟悉和把握议论文的谋篇布局和逻辑结构特点，有利于其提高自身的逻辑思维能力，将这种能力运用到自己的议论文写作中，使自己的文章更具逻辑性，结构更清晰，符合议论文写作特点。
2.强调链接结构在标明文章层次中的重要性。本文中链接结构的使用对于学生来说十分具有借鉴意义，它们是的文章更加结构清晰，层次分明。笔者在分析文章时，向学生强调了三个表示观点列举的链接结构：in the first instance， secondly， last but not least； 表总结的 in general；表转折对比的however， on the contrary；表举例的 for example 以及表递进关系的 furthermore.
3.分析文章段落展开方法。
（1）找出每段的主题句。议论文最鲜明的特点就是作者的分论点一般作为各段的主题句（通常是第一句话）讲明，各段作为支持该分论点的论据展开。笔者采用师生共同分析的方法，带领学生找出文章各段排比形式的主题句，体会如何围绕论点，确定分论点，层层扩展，阐述自己的立场和态度。
（2）向学生介绍写好扩展句的方法。议论文的各自然段需要丰富的内容来扩展主题句，对于主题句的展开，通常采用如下几种方法：Question， Quotation， Example， Comparison， Survey， Statistics， Classification， Other words， Reason and cause， Positive and negative sides。在范文中，学生们可以清楚的体会出作者所运用的 Reason and cause以及Example等多中扩展主题句的手法。笔者还提醒学生，合理的段内结构（及对主题句的扩展）和巧妙的构思与规范的语言一样，对于一篇议论文至关重要，学生们应在自己的写作中巧妙运用这些方法，提高自己文章的耐读性。
二、帮助学生积累范文的语料素材，为写作打下坚实基础
学生在写作时常常苦于腹中无词，不能准确得体地表达出想要表达的意思，这是因为学生还没有积累出丰富的词汇和句式。按照语言生成规律，写作的次序应是： 词——句——篇，因而，提高学生写作能力的基础和前提就是为其提供丰富的话题语料储备，并训练他们在写作过程中不断灵活地使用已经习得的词汇，重点培养学生应用这些词汇和句型的能力，为他们的写作打下坚实基础。
笔者在带领学生分析完范文篇章结构之后，利用不同的教学形式，注重常用学生话题词汇的拓展，要求学生找出并吸收文中丰富的话题词汇（文中的黑体字就是推荐学生们积累使用的话题词汇），运用到自己的文章中。笔者还要求学生注重对范文中重点句型的操练，和学生一起找出文中各类从句和含非谓语的句子，总结出好的句子结构。
三、鼓励学生思考、体味范文的立意与内涵，表达自己的观点
写作，尤其是议论文的写作是学生在平时的学习、生活中对身边事物所思、所想的集中表达，可以反映出作者的思想和价值观。在新课标的理念下，我们教学的指导思想之一就是关注学生的情感，提高他们的人文素养，培养他们高度的社会责任感，养成他们独立思考和表达的习惯。在学生写作议论文时，谋篇布局和遣词造句固然重要，更为重要的是文章的立意和观点态度。
在阅读范文时，笔者还会在最后鼓励学生根据文章主题，复述作者思想内容，并对作者思想内容进行简单评价，并鼓励他们说出自己的看法。同学们应当明白，作者的观点态度是作者的生活体验和思考的结果，同学们应当向作者那样平时勤于观察思考，写作时善于总结和表达，写出自己的内心情感和视角。
工程硕士招生专业范文 第5篇
经国务院学位委员会批准，我校2010年继续开展招收在职人员攻读硕士学位工作，为方便考生报考，现将有关事项通知如下：
一、在职人员攻读工程硕士学位领域及名额：
1．电气工程（代码：430108）研究方向：电力传动自动化、电机、电磁场、电力系统自动化。招生名额60名，其中脱产班30名。
2．工业设计工程（代码：430138）研究方向：项目管理、工业设计、人机工程、平面设计、工业工程。招生名额60名，其中脱产班30名。
3．建筑与土木工程（代码：430114）研究方向：工民建、建筑施工设计、计算机结构仿真、建筑学、道路桥梁、工程项目管理。招生名额60名，其中脱产班30名。
4．计算机技术（代码：430112）研究方向：计算机安全工程、计算机网络与系统工程、软件工程与软件开发、多媒体技术及应用、信息处理技术。招生名额30名．
5．轻工技术与工程（代码：430122）研究方向：生物工程、发酵工程、食品工程，招生名额30名。
6．仪器仪表工程（代码：430104）研究方向：测试技术与故障诊断、精密仪器与机械、可靠性与质量控制、质量工程、计算机应用技术。招生名额30名。
7．机械工程（代码：430102）研究方向：机械设计理论及应用、现代制造技术及设备、加工自动化及其控制技术、机械设备状态检测与故障诊断、机械电子工程。招生名额30名。
8．材料工程（代码：430105）研究方向：高分子材料、制浆造纸工程、膜技术、金属材料、有机/无机复合薄膜材料。招生名额30名。
二、报考条件
1．在职工程技术、工程管理或相关从业人员；
2．获得学士学位后具有3年以上工程实践经验；或获得学士学位后工作经历虽未达到3年，但具有4年以上工程实践经验；或具有国民教育系统大学本科毕业学历，且具有4年以上工程实践经验；
武汉大学工程硕士招生简章
专业：电子与通信工程、仪器与仪表工程、集成电路工程
二、报考条件
1、当年7月31日前大学本科毕业获得学士学位。
2、当年7月31日前国民教育系列大学本科毕业。
论文工程项目的进度控制范文 第6篇
【摘要】工程建设进度控制是工程项目建设中与质量控制、投资控制并列为工程建设控制的三大目标之一，而施工阶段是工程实体形成阶段，对其进行进度控制是整个工程项目建设进度控制的重点，因此施工阶段的进度控制又是承包单位进行现场施工管理的重要核心。
【关键词】影响因素
项目进度
进度控制
一、进度控制的目的
建设工程项目进度控制是工程项目管理中投资、进度、质量三大控制要素中的主要控制因素, 贯穿于整个建设工程项目的勘察设计、工程物资采购、工程施工、试车投产等全部过程, 尤其是在建设工程项目实施的整个过程中显得尤为重要。现在越来越多的国内外工程项目采用EPC 等方式建设。通过建立工程项目进度控制管理目标, 健全完善工程项目进度控制管理体系, 能够充分利用有限的建设资金和有效资源, 取得节省建设投资, 保证工程质量,缩短建设周期的良好效果, 实现建设工程项目的总体进度控制目标。建设工程项目进度控制是指对工程项目各建设阶段的工作内容, 工作程序, 持续时间和衔接关系编制计划, 并将进度计划付诸实施, 在实施过程中经常检查实际进度是否按计划要求进行, 采取补救措施或调整、修改原计划直至竣工交付使用。施工阶段是工程实体形成阶段, 对其进行进度控制是整个工程建设项目进度控制的重点,因此施工阶段的进度控制是建设单位对施工现场管理的重要核心。
二、影响工程项目施工进度的因素和产生的原因
（一）影响工程项目施工进度的因素
由于工程项目具有庞大、复杂、周期长、相关单位多等特点, 故影响
工程施工进度有很多因素, 主要来源于工程项目相关单位的影响。
1、来源于政府及上级建设主管部门的、建设单位及业主代表（监理单位）。例如当监理单位发了开工令后，施工场地还未能完全交出给施工单位施工，或属于建设单位责任应办而未办的前期工作、手续；或某些献礼工程，要求影响形象部分的建筑物先施工等„„
2、来源于建设单位资金的影响。工程的顺利施工必须有足够的资金作为保障, 由于建设单位没有及时给足工程预付款, 或由于拖欠工程进度款, 甚至要求承包商垫资的, 这些都将影响承包单位流动资金的周转, 进而严重影响施工进度。
3、来源于设计单位的影响。由于原设计有问题需要修改，或由于建设单位提出了新的要求，特别是所谓的“三边工程”，即边设计、边施工、边投入使用的工程，如以前的所谓“献礼工程”，在施工过程中出现设计变更是在所难免的。
4、来源于施工条件的影响。例如某工程由于施工场地是淤泥冲积层，地下水位高，承包商根据图纸进入人工挖孔桩施工，在施工期间不断地发生塌方、流砂，不但给施工人员带来生命安全问题，还给承包商带来工期和费用损失。在施工过程中遇到气候、水文、地质及周围环境等方面的不利因素的，由于处理地下的障碍、隐患和文物，则必然影响到施工进度。
5、来源于施工单位本身管理水平的影响。施工现场的情况千变万化，如果施工单位的施工方案不恰当，设计不周详，管理不完善，解决问题不及时等, 都会影响建设工程项目的施工进度。例如，在某开发区的一个工程中，施工单位在编制技术方案时为节省施工措施费用，采用喷粉桩代替防渗墙作止水幕墙，结果止水效果不佳，造成工期延误。
6、有来源于供货单位影响。施工过程需要的材料、构配件、机具和设备等不能按期运抵施工现场或运抵后发现不符合有关标准的要求，都会影响施工进度。
7、来源于各种风险因素的影响。风险因素包括政治、经济、技术及自然等方面的各种可预见或不可预见的因素，如罢工、延迟付款、工程事故、洪水等都会对工期影响造成工期延误。
（二）影响因素产生的原因
1、在估计工程的特点及工程实现的条件时, 过高或过低地低估了有利因素而忽略了不利因素。
2、在建设工程项目实施时, 相关参加者工作上的失误。
3、忽略了不可预见事件的发生。
三、工程施工进度的检查方式及方法
正是由于各种因素的影响，经常会打乱原始计划的安排并出现进度偏差，不变是相对的，变化是绝对的，所谓“计划赶不上变化”，从而使施工阶段的进度控制显得非常重要。因此，应及时了解和掌握工程实际进展情况，分析和检查影响进度偏差的原因，并为工程施工进度的调整和控制提供信息、依据。
1、工程施工进度的检查方式：
在工程进度计划实施后，应及时跟进并收集工程实际进展情况，包括工作的开始时间、完成时间、持续时间、逻辑关系、实物工程量和工作量，以及工作时差的利用情况等，从中了解到施工过程中影响进度的潜在问题，以便及时采取相应的措施加以预防和防止偏差、纠正偏差。
2、工程施工进度的检查方法：
施工进度的检查方法主要是对比法，有利用横道图比较法、S型曲线比较法、香蕉型曲线比较法、前锋线比较法、列表比较法等将经过整理的实际进度的数据与计划进度的数据相比较，从而发现是否出现偏差和偏差的大小。若偏差较小，可在分析其产生原因的基础上采取有效的措施，使矛盾得以解决，继续执行原计划；若偏差较大，经过努力不能按原计划实现时，则要考虑对计划进行必要的调整，即适当延长工期或改变施工速度。
四、工程施工进度的调整和工期延期的控制
1、工程施工进度的调整：
工程进度的调整一般是不要避免的，但如果发现原有的进度计划已落后、不适应实际情况时，为了确保工期，实现进度控制的目标，就必须对原有的计划进行调整，形成新的进度计划，作为进度控制的新依据。而调整工程进度计划的主要方法有两个：
（1）压缩关键工作的持续时间：在不改变工作之间顺序关系，而是通过缩短网络计划中关键线路上的持续时间来缩短已被施长的工期。具体采取的措施：
有增加工作面、延长每天的施工时间、增加劳动力及施工机械的数量的组织措施；有改进施工工艺和施工技术以缩短工艺技术间歇时间、采取更先进的的施工方法以减少施工过程或时间、采用更先进的施工机械的技术措施；有实行包干奖励、提高资金数额、对所采取的技术措施给予相应补偿的经济措施；还有改善外部配合条件、改善劳动条件等其它配套措施。在采取相应措施调整进度计划的同时，还应考虑费用优化问题，从而选择费用增加较少的关键工作为压缩的对象。
（2）组织搭接作业或平行作业：
（3）在不改变工作的持续时间，而只改变工作的开始时间和完成时间。这种调整情况有：对于大型工程项目，如小区工程可调整的幅度较大是由于有多项的单位工程而它们之间的制约比较小，从而可调整的幅度比较大，因此比较容易采用平行作业的方法来调整进度计划；对于单位工程项目，由于受工作之间工艺关系的限制，可调整的幅度较小，通常采用搭接作业的方法来调整施工进度计划。
当工期拖延得太多，或采取某种方法未能达到预期效果时，或可调整的幅度又受到限制时，还可以同时用这两种方法来调整施工进度计划，以满足工期目标的要求。凋整同时还需要注意到无论采取哪种方法，都必然会增加费用，故施工单位在进行施工进度控制时还应该考虑到投资控制的问题。
2、工期延期的控制：
（1）工期延期的概念：
工期延期是由于建设单位、建设单位代表（监理单位）、合同缺陷、工程变更等原因造成的；工期延误是施工单位组织不力或因管理不善等原因造成的。工期延期是可以通过向建设单位、建设单位代表（监理单位）申请获得批准而增加工期的，我们在工作中，应注意区别工期延期和工期延误的概念。
（2）工期延期获得批准的条件：
首先必须符合合同条件，亦即导致工期拖延的原因不是施工单位自身的原因引起的，例如，施工场地条件的变更；建设、合同文件的缺陷；由于建设单位或设计原因造成的临时停工、工期耽搁；由业主供应的材料、设备的推迟到货；工程施工时受到其它主要的承包商（施工单位）的干扰；建设单位、监理工程师关于施工方面的变更等„„因上述原因的工期拖延是工期延期申请获得批准的首要条件。
其次是发生延期事件的工程部件，必须是在施工进度计划的关键线路上，才能获得工期延期的批准。若延期事件是发生在非关键线路上，且延长的时间未超过总时差时，例如屋面防水层的变更发生在工程结构施工阶段，即使符合批准为工程延期的合同条件，是不能获得工期延期申请。
最后，工期延期的批准还必须符合实际情况和注意时效。对延期事件发生后的各类有关细节进行详细记载，及时向建设单位代表或监理工程师提出申请，递交详细报告。通常是在延期事件发生的14天内提出申请，外商投资的工程则根据FIDIC合同条件的规定，在延期事件发生的28天递交意向书，在此之后的28天递交正式的申请报告，否则过期申请无效。
总之，施工进度控制是技术性要求较强的工作，不仅要求施工管理人员要掌握施工组织设计的编制，还要熟悉建筑施工、建筑工程劳动定额与工程预算定额、技术方案方面的知识，并熟悉相关专业的知识，如建筑设计、建筑材料、《合同法》等建筑法规的知识，另外还要求细心收集和整理有关设计变更、现场签证、自然灾害等资料。在工程项目实施过程中，进度控制就是经过不断地计划、执行、检查、分析和调整的动态循环，因此做好施工进度的计划与衔接，跟踪检查施工进度计划的执行情况，在必要时进行调整，在保证工程质量的前题下，确保工程建设进度目标的实现。
参考文献：
<浅谈建设工程项目管理信息化>李建华
《政府投资项目施工阶段的项目管理》吴舒昕，经济师 《浅谈建设工程项目进度控制》 刘克菲，轻金属 《政府工程的进度控制》叶枫 建筑经济