枯草杆菌范文

枯草杆菌范文（精选12篇）

枯草杆菌 第1篇

1 材料

1.1 试验动物

2月龄獭兔2只, 由杨凌区五泉镇毕公村秦丰兔场提供。

1.2 主要仪器

稳压稳流电泳仪 (型号为DYY-6B) , 南京大学普阳科学仪器研究所提供;化学发光成像系统 (型号为XRS+) 、电泳仪 (型号为Applied Biosystems 2720Thermal Cycler) , 美国Bio-Rad公司生产;16S r DNA基因通用引物、促解旋酶B亚基 (gyr B) 通用引物, 上海生工生物工程技术服务有限公司合成;普通琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒, 天根生化科技 (北京) 有限公司生产。

2 方法

2.1 试验步骤

选取健康、2月龄獭兔2只, 耳缘静脉注射空气处死, 取盲肠内容物充分混合后放入灭菌离心管中保存。初步鉴定参照参考文献[9]中区分菌种的常见生理、生化方法。通过16S r DNA和gyr B基因进行进一步鉴定。

2.2 检测常规生理、生化指标

样品稀释液经80℃水浴10 min, 将内容物中不耐热的菌种除去。热处理后将样品稀释, 接种于固体培养基中, 根据芽孢杆菌菌落特点挑选出的菌落参照参考文献[9]中枯草芽孢杆菌的鉴定方法进行鉴定。

2.3 16S r DNA基因序列扩增、测序

采用16S r DNA序列分析法对其中3个菌株进行鉴定, 以确定是否可以通过16S r DNA序列分析法鉴定出枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌。3个菌株分别于37℃、150 r/min培养24 h, 提取细菌总DNA, 用16S r DNA通用引物进行PCR扩增, 引物序列:上游引物5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3', 下游引物5'-CGGTTACCTTGTTACGACTT-3'[10]。PCR反应条件:95℃预变性1 min;95℃变性15 s, 56.5℃退火45 s, 共35个循环;72℃延伸7 min。PCR产物用琼脂糖凝胶电泳后回收测序。

2.4 gyr B基因序列扩增、测序

进一步鉴定采用gyr B基因序列分析法, gyr B基因通用引物引物序列:上游引物5'-GAAGTCAT-CATGACCGTTCTGCAYGCNGGNGGNAARTTYGA-3', 下游引物5'-AGCAGGATACGGATGTGCGAGC-CRTCNACRTCNGCRTCNGTCAT-3'[11], 其中Y、N、R为兼并碱基, Y表示C或T, N表示A、T、C或G, R表示A或G。PCR反应条件:96℃变性1 min, 58℃退火1 min, 72℃延伸2 min, 共35个循环;72℃再延伸7 min。PCR产物经电泳后回收测序。

3 结果与分析

3.1 常规生理、生化指标初步分离、鉴定芽孢杆菌 (结果见表1)

由表1可知:1~16号菌株为枯草芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌, 17~28号菌株为其他菌种。枯草芽孢杆菌及其芽孢的革兰染色图像见179页彩图1, 2。

3.2 16S r DNA基因序列的鉴定 (结果见图3, 4)

由图3可知:3株细菌均有目的条带, 可以进行PCR产物回收。

由图4可知:回收的PCR产物可以进行载体连接及转化感受态细胞。

由NCBI Blast结果可知, 被分析的3个菌株的16S r DNA序列与Gen Bank中其他菌种相似性较低, 但与Gen Bank中枯草芽孢杆菌及解淀粉芽孢杆菌的16S r DNA序列相似率均为99%, 需要通过gyr B序列分析方法进一步鉴定。

3.3 gyr B序列的鉴定 (结果见图5)

由图5可知:由于DNA提取量太低, 菌株4, 11, 12, 13没有扩增出条带, 其他12株细菌gyr B均扩增出目的条带。

3.4 各菌株gyr B序列与Gen Bank中菌株gyr B序列的比对 (结果见表2)

由表2可知:菌株8, 9, 10为枯草芽孢杆菌, 其他8个菌株均为解淀粉芽孢杆菌。

4 讨论

4.1 獭兔盲肠中解淀粉芽孢杆菌的比例及其在獭兔肠道中的作用

黄虎翔等[12]报道, 解淀粉芽孢杆菌是条件性致病菌。本试验结果表明, 解淀粉芽孢杆菌在试验獭兔盲肠中大量存在, 而且其数量多于枯草芽孢杆菌。解淀粉芽孢杆菌是否与拟杆菌相似, 还有待于进一步研究。

注:+表示≥90%菌株为阳性, -表示≥90%菌株为阴性。序号1~28表示分离得到的28株细菌。

4.2 16S r DNA和gyr B序列分析在亲缘性较高的细菌鉴定上的应用

郭凤莲等[13]报道, 单独分析16S rRNA序列可以鉴定枯草芽孢杆菌。利用16S r DNA无法区分解淀粉芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌这样亲缘关系很近的菌种。因此, 采用gyr B序列分析法进行进一步鉴定。结果表明, 分离、鉴定解淀粉芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌时, 在进行基本生理、生化鉴定后可以直接用gyr B测序法进行鉴定。

M.DL-2 000 Marker;1~3.PCR纯化产物。

M.DL-2 000 Marker;1~16.PCR产物。

5 结论

枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊说明书 第2篇

美常安有不良反应吗?我国《药品不良反应报告和监测办法》中规定，药品不良反应是指合格药物在正常用法用量下出现的、与用药目的无关的或意外的有害反应。那么美常安有不良反应吗?

美常安是用于腹泻胀气，消化不良的一种药物，每一种药物或多或少都有不良反应。只是有的不良反应轻，有的不良反应重一些。但在这里普及一下，一般来说，使用OTC的药物都是比较安全的，因为OTC是经过长时间的认证。那么，美常安有什么不良反应呢?

美常安的不良反应在根据临床试验结果，偶可见恶心、头痛、头晕、心慌。这是比较少见的，一般人不会出现这种症状，但少数部分的人就会出现，如果出现症状，在这个时候要特别注意遵从医嘱服用药物，有关药物的剂量即服用时间。如果出现以上症状严重承受不了者，应该去医院检查。如果只是轻微的症状，这个时候应该多休息，多喝水。

枯草芽孢杆菌抑菌作用的实验研究 第3篇

【关键词】 枯草芽孢杆菌；大肠杆菌；紫外线诱变

芽孢杆菌在自然界分布非常广泛，多数芽孢杆菌的抗菌物质具有抗菌谱广，对酸碱度要求不高，热稳定性好，易于进行分子加工等特点，这些都为开发新型天然防腐剂以及生物防治剂提供了很好的条件。枯草芽孢杆菌可由稻草中分离得到，对许多植物病原生物具有拮抗作用的非病原微生物。研究枯草芽孢杆菌对大肠杆菌的拮抗作用，并通过紫外诱变手段筛选出高抗大肠杆菌的菌株。

一、材料与方法

1、供试菌种

实验菌种 ：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌

2、培养基

液体种子培养基：为牛肉膏蛋白冻培养基（不加琼脂粉）。

固体种子培养基：在液体种子培养基基础上加入18g/L的琼脂粉。

3、枯草芽孢杆菌的制备

取稻草约500g，浸泡在清水中2h，再将其煮沸30min，后37℃下培养。24h后再将其煮沸30min，吸取液体1ml于9ml无菌水中，摇匀制成菌悬液，将菌悬液滴两滴在固体种子培养基上，涂布均匀，37℃下培养48h。最后挑单菌落于液体种子培养基中，37℃下培养48h。

4、枯草芽孢杆菌的紫外诱变

取培养至对数生长期的枯草芽孢杆菌菌液离心（10000r/min，20min），取沉淀收集细胞，用无菌生理盐水洗涤2次。玻璃珠振荡15min。分别取10ml菌悬液于5个直径9cm的无菌培养皿中，摇匀。无菌条件下在30W，60CM的紫外灯下打开培养皿盖分别照射60s，90s，120s，150s，180s。不同诱变时间处理的菌悬液各取1ml加入液体种子培养基中37℃黑暗下培养24h。同时取1ml未诱变的菌悬液培养作为对照。致死率=（对照组菌数-此诱变时间下菌数）÷对照组菌数×100%

5、诱变菌株的筛选

培养24h的枯草芽孢杆菌吸取1ml于装有9ml无菌水的试管中，摇匀；再从中吸取1ml菌悬液，重复上个步骤，直至稀释到10-4。用异步培养法挑选高产单菌落。即将稀释到10-5的菌悬液涂布平板，然后将其倒扣于装有一薄层氯仿的培养皿盖熏蒸50min，让菌落固定在固体种子培养基表面。移去培养皿盖，让平板中的氯仿挥发40min。再取0.5ml 107-108cfu/ml的大肠杆菌菌悬液涂布在此平板上。待平板晾干后37℃培养72h。取所有平板中抑菌圈最大的单菌落扩大培养。

二、结果与分析

1、不同培养时间对抑菌效果的影响

图1 抑菌圈随培养时间的变化

枯草芽孢杆菌随着培养时间的增加，他的抑菌效果总的来说呈上升趋势，但其中有抑菌圈变小的过程，这不是说明抗菌蛋白的效果降低了，而可能是由抗菌蛋白的产生时间于大肠杆菌的扩增时间的差别造成的。抗菌蛋白是要到枯草芽孢杆菌的平稳期时才会产生，在这之前是由于接种液中含有抗菌蛋白，它在抑制大肠杆菌的生长。当它逐渐消耗而枯草芽孢杆菌处于非平稳期，没有新的抗菌蛋白产生时，大肠杆菌处于快速增殖的过程，大肠杆菌就会逐渐蔓延，掩盖部分抑菌圈，就表现为抑菌圈的减小。当枯草芽孢杆菌达到平稳期后，抗菌蛋白大量产生，使大肠杆菌死亡，抑菌圈就逐渐扩大。

2、不同接种量芽孢杆菌对大肠杆菌的抑制效果

图2 不同接种量对抑菌效果的影响

经过不同剂量的枯草芽孢杆菌抑制大肠杆菌，经测量发现抑菌圈先随剂量的增加而增加，200μl的时候达到最大；后就逐渐变小。其原因是剂量越多，它含的枯草芽孢杆菌就越多，产生的抗菌蛋白越多，所以抑菌效果越好；但达到一定数量后，在有限的营养中枯草芽孢杆菌之间会产生竞争关系，反而会抑制菌群的生长，降低了抗菌蛋白的产生量。

3、不同紫外诱变不同时间的结果

在30W，60CM处诱变不同时间，60s时致死率最低，但其正突变率太小。随时间的增加，致死率越来越大，180s时菌种几乎全被杀死。90s，120s，150s三个时段的致死率相差不大，而且在可接受范围内。但150s时其正突变率达到104%，是最高的，所以150s诱变时间比较合适。

四、讨论

枯草芽孢杆菌抗均蛋白对很多病菌都有抑制或杀灭作用，实验中对的拮抗作用进行了研究。结果表明，枯草芽孢杆菌大肠杆菌拮抗作用较为明显。在农林和经济作物的病虫害防治以及蓄禽、水产养殖中传染病的防治方面，芽孢杆菌及其抗菌物质展现了良好的应用前景。利用芽孢杆菌尤其是枯草芽孢杆菌进行生物防治或者生产微生物杀菌剂以代替剧毒化学药品是一种可行的策略。

参考文献：

[1] 彭益强、吕风萍、贺淹才等，激光诱变筛选高产植酸酶黑曲霉菌株的研究[J]，激光生物学报，2002

[2] 石春芝、陶天中、岳莹玉，神农架自然保护区大九湖芽孢杆菌资源调查[J]，氨基酸和生物科学，2003

[3] 南庆贤、戴瑞彤，中国肉制品微生物安全问题[J]，肉类研究，2004

[4] 韩建荣、董仙芳， 激光诱变青霉 PT95原生质体选育类胡萝卜素高产菌株[J]，微生物学通报，2002

[5] 陈天游、董思国、田万红、袁佩娜、曾明，枯草芽孢杆菌活菌体外拮抗6种肠道致病菌的研究[J]，微生物学杂志，2004

枯草杆菌 第4篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

2014年4月至2016年4月间收治的156例厌食患儿,随机分为观察组与对照组,每组各78例,均符合本病的诊断标准,有中度以上厌食症状(总评分>3分),排除消化道器质性病变及肝、胆、胰疾病,患儿均无严重系统性疾病,均良好配合全程治疗。观察组中男性患儿42例,女36例;年龄4～11岁;对照组中男性患儿40例,女38例;年龄3～12岁;两组患儿一般资料经对比无统计学差异,具有可比性(P>0.05)。

1.2 治疗方法

观察组给予枯草杆菌二联活菌胶囊进行治疗,口服1～2粒/次,2～3次/d;对照组给予葡萄糖酸锌口服液,10 mL/次,2～3次/d。疗程均为4周。

1.3 疗效评价

参考表1症状评分标准进行临床效果的评价,以症状评分降为0分、临床症状基本消失为治愈;以症状评分由3分降为1分或2分降为0分为显效;以症状评分由3分降为2分或2分降为1分为好转;未达上述标准为无效。总有效率=治愈率+显效率+好转率。在2组患儿治疗前后分别检测血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)以及血浆前白蛋白(PA)三项指标,并进行对比分析。

1.4 统计学方法

采用SPSS系统软件对本文中研究数据进行统计学处理。计量资料以(x±s)表示,采用t检验,计数资料组间采取X2检验,P<0.05表明差异具有统计学意义。

2 结果

观察组治疗后Hb、RBC、PA水平与治疗前比较均存在明显差异,与对照组相比也有明显差异,观察组临床疗效优于对照组(P<0.05)。详见表2、表3。

注:*与本组治疗前比较,P<0.05;#与对照组治疗后比较,P<0.05

3 讨论

小儿厌食迁延日久,可引起营养不良、贫血,对生长发育造成不良影响。血浆前白蛋白(PA)是一项能反映小儿机体营养状态的较为重要的指标,PA的半衰期较短,小儿一旦存在营养不良,在早期PA水平即发生改变,而在营养不良状况得以纠正后1周内即可恢复正常,具有较高的敏感性[3]。除此之外,血常规检查中的一些项目也能够在一定程度上反映厌食小儿的营养情况,在厌食患儿血液中血红蛋白(Hb)和红细胞计数(RBC)往往减少,本研究中结合临床实际选用了上述三项作为小儿厌食治疗效果的参考实验室指标。

枯草杆菌二联活菌是由屎肠球菌和枯草杆菌等组成的复方活菌制剂,屎肠球菌和枯草杆菌为人体肠道所需厌氧菌,通过口服的方式进入肠道,可发挥调节微生态环境、抑制致病菌生长繁殖、促进营养物质吸收、促进肠道功能恢复等作用。枯草杆菌二联活菌胶囊有良好的耐酸性、对热比较稳定,口服后定植于肠道并对多种抗菌药有耐药性[4],与这些抗菌药合并应用也不影响其发挥作用。枯草杆菌二联活菌胶囊还含有维生素C、B1、B2、B6、B12、烟酰胺、乳酸钙、氧化锌等成分,可提供机体所需的多种维生素和矿物质,从而改善厌食患儿因摄入食物减少而引起的多种维生素及微量元素缺乏,具有一定的营养保健作用。

本研究结果表明,经枯草杆菌二联活菌胶囊治疗后,观察组患儿的临床症状获得明显改善,症状评分明显减少,食欲、进食量与进食时间均发生显著好转,临床总有效率较高,患儿Hb、RBC、PA指标较治疗前显著改善,且与对照组有明显统计学差异,这表明枯草杆菌二联活菌胶囊能明显增加患儿食欲,改善患儿营养状况,值得临床推广采用。

参考文献

[1]方家选,张金玺,瓮恒,等.清热化湿养阴颗粒治疗小儿厌食症疗效观察[J].辽宁中医杂志,2007,34(7):922.

[2]江卓成.小儿厌食相关因素探讨及对策[J].社区医学杂志,2004,(3):272.

[3]张国成.陈星琪,苏渊.儿科学[M].北京:高等教育出版社,2003.215-221.

枯草杆菌 第5篇

枯草芽孢杆菌胞外多糖的快速测定与发酵条件优化

枯草芽孢杆菌B1⑥菌株能产生大量胞外多糖,并且,随着多糖含量的提高,发酵液黏性也随之增加,而测定多糖黏度比测定多糖的含量方法简便、快速,对于生产实践具有一定的指导意义.通过实验,建立了多糖含量与发酵上清液黏度的关系模型,结果显示胞外多糖含量与发酵上清液黏度在一定程度上呈正相关性.应用该模型于胞外多糖发酵条件的.优化,筛选出了培养基的最佳碳源、氮源及C/N.经过4因素3水平的正交实验,筛选出的最优发酵方案是:蔗糖3%,硫酸铵1%,(C/N=3/1),MgSO4 0.05%,Na2HPO4 0.2%,NaH2PO4 0.1%,CaCl2 0.1%,MnSO4 0～0.1%,接种量10%～12%,pH7～7.5.同时检验了该模型的实用性,测量黏度简单方便,一定程度上可以指导生产实践.

作 者：韩洁 谢和 赵杰宏 HAN Jie XIE He ZHAO Jie-hong 作者单位：贵州大学生命科学院微生物研究室,贵阳,550025刊 名：食品科技 PKU英文刊名：FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY年，卷(期)：“”(6)分类号：Q93-33关键词：枯草芽孢杆菌 胞外多糖 黏度 模型

枯草杆菌 第6篇

一、临床症状

病初表现为精神沉郁，低头垂耳，流泪，流涎，采食、咀嚼和吞咽困难，有时口颊一侧积聚大量未咀嚼的草料；时发脑膜脑炎症状，病羊头颈一侧性麻痹，弯向对侧，该侧耳下垂，眼半闭，甚至视力丧失；四肢无力，步态不稳，喜卧；体温39.5～42.0℃，眼结膜黄染，有时腹泻，并伴有轻微呼吸道症状，流鼻涕。病中期出现贫血、黄疸。病后期眼球下陷，结膜苍白，消瘦，精神萎顿，个别有神经症状，做转圈运动，颈部强硬，有的角弓反张，而后卧地昏迷，以致死亡。

二、病理变化

对3只病死羊进行剖检，可见皮肤、黏膜苍白，血液稀薄、色淡、凝固不良，皮下组织水肿，胸部和腹部积水，心包积水，心肌松弛、质地脆弱；肝脏肿大变性呈黄棕色，表面有黄色条纹状或灰白色坏死灶，表面附着纤维蛋白；胆囊膨胀，内部充满浓稠明胶样胆汁。有神经症状的病例，可见脑和脑膜充血、水肿并有炎症性变化，脑膜中可见针尖样、灰白色病灶，脑脊液也增加、混浊，脑干变软有小脓灶，血管周围单核细胞浸润。败血症病例，可见脾肿大变软，呈黑色，有的脾脏有针尖至米粒大灰白（黄）色坏死结节，肾脏有坏死病灶，肾盂点状出血，淋巴结水肿。

三、实验室检查

1. 李氏杆菌检查。①涂片镜检。无菌操作采取病死羊的血液、肝、脾、脑脊液、淋巴等病料，进行触片或涂片，革兰氏染色，镜检，可见革兰氏阳性、两端钝圆的短杆菌，多散在，有的排列成“V”字形。②分离培养。无菌操作采取病死羊的肝、脾、肾、淋巴、脑组织等病料，接种于兔血琼脂平板、麦康凯琼脂平板和1%葡萄糖血清肉汤内进行培养，置于37℃恒温箱内培养24小时，菌落在兔血琼脂平板上呈β溶血，在麦康凯平板上不生长，在1%葡萄糖血清肉汤内呈均匀混浊，有颗粒状沉淀，不形成菌落和菌环。③生化试验。该菌能分解葡萄糖、鼠李糖、杨苷，在24小时内产酸；在7～12小时可使蔗糖、麦芽糖、乳糖、甘油、淀粉、糊精产酸，均不产气；能发酵单乳糖、山梨醇、棉实糖和木糖或不一致；不产生硫化氢和靛基质，不还原硝酸盐，不液化明胶；在24小时内可使石蕊牛乳微酸变色，但不凝固牛乳；M.R.试验（+），V-P试验（+）。④动物试验。取病料悬液（1∶5～10）或肉汤培养物采取皮下、腹腔、肌内注射或点眼方式接种小白鼠、家兔，一般在1～4天内死亡。剖检死亡的小白鼠或家兔，肝脏、脾脏等处有坏死灶，从血液、病变组织中可分离出李氏杆菌。点眼接种的小白鼠或家兔，生前出现脓性结膜炎和角膜炎。

2. 附红细胞体检查。①染色镜检。从病羊耳静脉采血制成血涂片，干燥后固定，经瑞氏染色，在1000倍油镜下检查，可见70%左右的红细胞变形，呈锯齿状、星状，红细胞表面附着大量圆形、椭圆形、月牙状蓝紫色虫体，血浆中也有，但量少。②血涂片镜检。取发病羊耳静脉血1滴置于载玻片上，用等量生理盐水稀释，轻盖盖玻片，置于高倍镜下观察，发现红细胞大部分变形，呈菠萝状、菜花状，被许多球形虫体附着包围，血浆中亦有少量虫体。虫体具有较轻的折光性，中央发亮，形似空泡而快速游动。

3. 药敏试验。采用常规纸片法做药敏试验，结果该菌对磺胺类药物、氨苄青霉素、链霉素、氟苯尼考高敏，对安普霉素、庆大霉素、土霉素中敏，对青霉素、卡那霉素低敏。

四、治疗

1. 磺胺-6-甲氧嘧啶注射液50毫克/千克体重+10%葡萄糖注射液100毫升，一次静脉注射，再按25毫克/千克体重的剂量注射磺胺-6-甲氧嘧啶注射液3～5天，2次/天。

2. 头孢噻呋钠0.1毫克/千克体重，硫酸庆大霉素5毫克/千克体重，分别肌内注射，2次/天，连用3天；也可用地塞米松10毫升+0.5%菌杀星0.3毫克/千克体重+消炎痛注射液0.2毫升，混合后肌内注射，2次/天，连用3天。

3. 在注射上述药物之后30分钟，可用贝尼尔按0.1毫升/千克体重的剂量，肌内注射，2天1次，连用2～3次；也可用10%土霉素注射液，按0.2毫升/千克体重的剂量，1次/天，连用3～5天。

4. 采用中药治疗时，方剂为：柴胡、双花、菊花各30克，茵陈、黄芩、茯苓各25克，远志、生地、木通、车前各20克，琥珀10克，甘草10克，共研成末，温水调制，一次灌服，1次/天，连用3天。

5. 病重的小尾寒羊需要辅助治疗，可用5%葡萄糖生理盐水1000～1500毫升+10%葡萄糖酸钙100～150毫升+5%碳酸氢钠100～200毫升+维生素B1 20毫升+维生素C 20毫升，混合后一次静脉注射，2次/天，连用3天。发现粪便或尿中有血时，可注射止血敏15～20毫升。有神经症状的可静脉注射安乃近10毫升，进行镇静。

采取上述综合防治措施后，第五天时不再出现新的病例和羊只死亡，7天后患病羊的精神、采食均趋于正常，羊群的疫情得以控制，基本康复。

五、预防

1. 经常打扫和清除舍内和运动场上的粪便，定期对地面、用具等进行消毒；保证饲料的营养，特别是入冬后要补充精料，增强羊的抗病力。

2. 从外地引进种羊时，一定要隔离检疫，确认无病后方可合群，千万不要从疫区引种。

3. 严禁其他家畜、家禽和野生动物进入羊场，尤其要消灭羊场的老鼠。

4. 经常检查羊群，发现病羊应立即隔离并进行治疗。对被污染的环境和物品进行严格消毒，对病死羊尸体进行无害化处理。

5. 保证羊舍通风、干燥，定期驱杀羊舍、羊体的软蜱。

6. 每100千克饲料加入银翘散200克+妙立素（延胡索酸泰妙菌素预混剂）15克+15%金霉素50克，连用7天，每月1次，可起到很好的预防效果。

六、小结

1. 小尾寒羊李氏杆菌病有一定的季节性，多在冬季、早春发生。李氏杆菌经感染动物的粪便、尿、乳汁、眼鼻分泌物、精液、流产胎儿、子宫分泌物排出体外，污染饲料、饮水、土壤和周围环境，再经消化道、呼吸道、损伤的皮肤而感染健康羊。所以，要做好环境的消毒，对地面和用具每天都要用0.3%过氧乙酸或0.5%百毒杀进行消毒，保持羊舍的卫生、干燥。

2. 附红细胞体病的传播与寄生虫有关，当发现羊体有很多软蜱时要进行驱虫。每年春、秋季分别用敌百虫、阿维菌素彻底驱虫1次。在每年发病季节前，用贝尼尔等预防注射，间隔10～15天再重复注射1次，可防治本病的发生。

枯草杆菌 第7篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取东辽县人民医院及吉林省中医药科学院收治的小儿腹泻患者共114例,随机分为枯草杆菌二联活菌颗粒联合蒙脱石散治疗组(治疗组)和常规治疗组(对照组),每组均为57例。治疗组57例中,男37例,女20例;年龄4个月~4.2岁,平均1.7岁,病程1~12d,平均5.9d;对照组57例中,男39例,女18例;年龄3个月~3.9岁,平均1.6岁;病程1~10d,平均5.5d。两组从性别、年龄、病程等方面比较无显著性差异(P>0.05),具有可比性。

1.2 诊断标准[3]

(1)起病急、可伴有发热症状;(2)便次比平时增多,一般为3~14次/天;(3)大便性状改变,多为稀便、水样便或蛋花汤样便;(4)实验室检查:血常规中白细胞正常或轻度升高,便常规偶有少量白细胞,粪便培养未见致病菌。

1.3 治疗方法

对照组:给予常规治疗,包括调整饮食,口服或静脉补液,口服乳酶生及复合维生素B,疑似有感染者予相应抗生素,不使用止泻剂。3d为1个疗程。治疗组:在对照组基础上,予枯草杆菌二联活菌和蒙脱石散口服,服法如下:枯草杆菌二联活菌颗粒,2岁以下者,1g/次,1~2次/天,2岁以上者,1~2g/次,1~2次/天,温开水冲服;蒙脱石散,1岁以下者,3g/d,1~2岁者,3~6g/d,2岁以上者,6~9g/d,均分为3次冲服。3d为1个疗程。

1.4 疗效观察

疗效判定标准[4]:(1)治愈:治疗后48h内便次正常,<2次/天,大便性状及便常规正常。(2)好转:治疗72h内便次减至4次/天,大便性状及便常规好转。(3)无效:未达到上述标准者。

1.5 统计分析

采用SPSS14.0软件,计数资料采用χ2检验。以P<0.05为显著差异,有统计学意义。

2 治疗结果

见表1。

*治疗组总有效率明显优于对照组(P<0.05)

3 讨论

小儿腹泻的临床表现主要为大便次数增多和大便性状的改变,伴有精神不振、恶心、呕吐、食欲不振、腹痛、发热等症状腹泻分为感染性腹泻和非感染性腹泻,据报道,引起腹泻的主要病原体为轮状病毒,其次为真菌、志贺菌属和沙门菌[5]。但无论何种腹泻,均与肠道菌群失调有密切关系。

枯草杆菌二联活菌颗粒主要成分为屎肠球菌(1.35×108个)和枯草杆菌(1.5×107个),其作用机制是可直接补充人体正常生理菌丛,抑制有害细菌而促进有益菌的生长,从而促进营养物质的消化与吸收,抑制肠源性毒素的产生和吸收,达到调整肠道菌群的目的;此外,本品尚可增强机体免疫抗病能力[6]、促进小肠生理功能的恢复,有利于腹泻的治愈。蒙脱石散是消化道粘膜保护剂,具有层纹状结构及非均匀性电荷分布,可将消化道内的病原微生物及其产生的毒素固定在肠腔表面,并随肠蠕动而排出体外;可通过与粘膜糖蛋白相互结合,提高粘膜屏障对攻击因子的防御作用,恢复受损肠道粘膜的功能,达到止泻的目的。

综上所述,枯草杆菌二联活菌颗粒联合蒙脱石散治疗小儿腹泻具有起效快,副作用少,便于服用等优势,值得在临床上推广应用。

摘要：目的 探讨枯草杆菌二联活菌颗粒联合蒙脱石散治疗小儿腹泻的临床效果。方法 共114例小儿腹泻患者,随机分为两组,对照组给予常规治疗,治疗组在对照组基础上予枯草杆菌二联活菌颗粒、蒙脱石散口服,1个疗程后进行疗效比较。结果 治疗组总有效率为91.23%,对照组总有效率为71.93%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。结论 枯草杆菌二联活菌颗粒联合蒙脱石散治疗小儿腹泻起效快、疗效好,值得推广应用。

关键词：小儿腹泻,枯草杆菌二联活菌,蒙脱石散

参考文献

[1]徐锐.思密达治疗小儿腹泻的观察与思考[J].中国中医药咨讯,2010,2(31):151.

[2]潘治星,刘爱琴.中西医结合治疗小儿腹泻98例[J].中医儿科杂志,2009,5(6):26-27.

[3]全国腹泻病防治学术研讨会组织委员会.中国腹泻病诊断治疗方案[J].中国实用儿科杂志,1998,13(6):381.

[4]关志东.金双歧、思密达联用治疗小儿腹泻80例疗效观察[J].中国医药导报,2010,7(31):60.

[5]朱利华,陈群英,黄明海.2008年小儿腹泻病的病原体调查分析[J].中华医院感染学杂志,2010,20(22):3606-3607.

饲用枯草芽孢杆菌的研究及应用 第8篇

1 枯草芽孢杆菌菌种的特性

枯草芽孢杆菌隶属芽孢杆菌科芽孢杆菌属的细菌, 目前具有两个亚种即B.subtilis subsp.spizizenii (Nakamura et al, 1999) 和B.subtilis subsp.subtilis (Ehrenberg, Cohn, 1835, 1872) 。菌体革兰阳性, 杆状, 单个, 大小0.7~0.8µm×2~3µm, 无荚膜, 能运动;芽孢中生, 圆柱或椭圆状, 孢子囊无明显膨大, 孢子大小0.8µm×1.5~1.8µm;严格好氧, 在营养琼脂培养基上菌落呈圆形、或不规则, 不透明, 在特殊情况下, 菌落中或邻近的培养基里形成色素, 褐色或红色, 少数橙色或黑色。1989年被美国食品与药物管理局 (FDA) 批准使用, 1999年被我国农业部批准正式批准使用。该菌具有菌种单一、对抗生素无耐药性及对动物无毒性等特点。其益生菌特性为: (1) 耐酸、耐盐、耐高温 (100℃) 及耐挤压。 (2) 小肠内不增殖, 在肠道的上段迅速发展成具有新陈代谢作用的营养型细胞, 参与菌群的平衡调节。 (3) 提高短链脂肪酸含量, 降低肠道p H及氨浓度。 (4) 繁殖过程中产酸、酶和多种维生素。

2 枯草芽孢杆菌的作用机理

2.1 生物夺氧, 促进有益厌氧微生物的生长繁殖

研究表明幼龄畜禽出生时, 其消化道内通常是无菌的, 出生后3h在胃肠道中可发现入侵的细菌, 12h后, 可在大肠中检测到。按着需氧菌、兼性厌氧菌、严格厌氧菌的演替顺序, 最终形成以乳酸杆菌、双歧杆菌等厌氧菌为优势菌群。B.subtilis为好氧菌, 在生长过程中需要大量的氧气, 进入动物胃肠道内在生长繁殖过程中消耗大量的游离氧, 降低了肠内氧浓度和氧化还原电势, 从而造成厌氧状态, 改善乳酸杆菌、双歧杆菌等厌氧菌的生长环境, 有利于厌氧菌的生长繁殖, 保持肠道微生态系统的稳衡, 同时使肠道中原本存在的需氧菌肠杆菌等的生长因缺氧受到抑制, 提高动物机体抗病能力, 减少胃肠道疾病发生几率。Maruta等研究就发现猪采食含107cfu/g B.subtilis的饲粮3周后, 粪中双歧杆菌数量显著上升, 而链球菌和梭菌的数量显著下降, 并且这种趋势在仔猪较母猪更明显。

2.2 拮抗致病微生物, 改善体内外生态环境

目前已有大量的研究证实动物饲喂B.subtilis后, 能显著降低肠道大肠杆菌、产气荚膜梭菌、沙门氏菌的数量, 使机体内的有益菌增加而潜在的致病菌减少, 因而排泄物、分泌物中的有益菌数量增多, 致病性微生物减少, 从而净化体内外环境, 减少疾病的发生。氨、胺、吲哚、硫化氢等物质在肠道黏膜对细胞有明显的毒害作用, 芽孢杆菌抑制了有害微生物, 进而减少有害物质产生, 有利于动物健康和生长。La Ragione等通过给予新生小鸡大肠杆菌O78:K80后, 24h经口单次灌喂B.subtilis菌悬液 (2.5×108CFU) , 结果证明B.subtilis明显减少盲肠中O78:K80的数量达3个数量级以上;2003年, 再次通过分别对无特定病原的新生小鸡和20日龄的仔鸡预先给予肠炎沙门氏菌和产气荚膜梭菌24h后, 经口单次灌喂B.subtilis菌悬液 (1×109CFU) , 结果, 可显著降低小鸡粪便中的肠炎沙门氏菌和产气荚膜梭菌数量, 表明添加B.subtilis孢子可有效地控制家禽疾病和食源性致病菌。Teo等利用从鸡肠道中分离得到的B.subtilis PB6对产气荚膜梭菌的拮抗作用, 结果PB6能显著抑制该菌的生长。陈兵研究SD大白鼠口服B.subtilis 1周后粪便中厌氧菌群和需氧菌群的变化, 结果表明肠道厌氧菌群中的双歧杆菌、乳酸杆菌、梭菌和拟杆菌数量均有不同程度增多, 而肠杆菌、肠球菌等需氧菌群数量则明显减少。

2.3 增强免疫功能, 促进动物的抗病能力

B subtilis能刺激机体免疫系统, 提高机体免疫力, 是良好的免疫刺激剂。能有效地提高巨嗜细胞的数量和活性, 通过产生抗体和提高嗜菌作用等刺激免疫, 激发体液免疫和细胞免疫, 致使动物免疫活性增强。枯草芽孢杆菌能促使吞噬细胞吞噬功能增强, 机体免疫特别是局部免疫提高, 分泌型Ig A的分泌增加, 从而抵抗感染。Inooka等研究表明以107cfu/g剂量的B.subtilis饲喂雏鸡, 能显著提高脾脏中T、B淋巴细胞量, 对脾脏中巨噬细胞活性没有影响, 表明B.subtilis对鸡的细胞免疫有肯定的影响。

B.subtilis芽孢杆菌作为非特异性免疫因子, 通过细菌本身或细胞壁成分刺激机体免疫细胞, 使其激活, 产生促分裂因子, 促进细胞活力或作为佐剂发挥作用;此外, 还可发挥特异性免疫功能, 促进B细胞产生抗体的能力。Berger等认为B.subtilis促进机体的非特异性免疫是来源于菌体被称之为“Protodyne”的蛋白, 经机体吸收后对机体防御机制刺激的结果。Himanen等研究B.subtilis的脂磷壁酸 (LTA) 和肽聚糖-磷壁酸复合物 (PG-TA) 的生物活性, 发现两者均具有免疫佐剂的作用, 免疫小鼠后可以促进单核细胞集落刺激因子产生。潘康成等认为动物口服饲用芽孢杆菌后, 调整肠道菌群, 使肠道微生态系统处于最佳的平衡状态, 同时各正常菌群包括口服的芽孢杆菌在肠道具有抗原识别部位的淋巴组织集合上发挥免疫佐剂作用, 活化肠黏膜内的相关淋巴组织, 使SIg A抗体分泌增强, 提高免疫识别力, 并诱导T、B淋巴细胞和巨噬细胞产生细胞因子, 通过淋巴细胞再循环而活化全身免疫系统, 从而增强机体非特异性和特异性免疫功能。

2.4 促进动物肠道发育, 增强消化酶的活性

目前已有研究表明, B.subtilis能促进动物肠道的发育, 并在肠道中分泌多种消化酶, 增强肠道中消化酶的活性。Samanya等通过给予1日龄的鸡饲喂B.subtilis 28d后, 结果, B.subtilis能促进肠道的发育, 增加肠黏膜厚度, 肠绒毛高度和细胞密度。Sogarrd报道B.subtilis和B.lincheniformis具有较强的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性, 同时还具有降解植物饲料中复杂碳水化合物的酶, 如果胶、葡聚糖、纤维素等酶, 其中很多酶是哺乳动物和禽类不具有的酶。

3 枯草芽孢杆菌在动物生产上的应用效果

1979年Kimura首次报道从日本传统发酵食品“纳豆”中分离出一种枯草芽孢杆菌用作动物营养添加剂, 该菌可以改善畜禽的生产性能和抗病能力以来, 目前国内外已有大量的应用研究报道。Pelicano等报道利用B.subtilis制剂分别拌料和加入饮水中给予1日龄的雏公鸡, 在45d的试验期中, 芽孢杆菌制剂在饲喂的早期能显著提高饲料转化率 (P<0.05) , 在后期没有影响。Peo等报道饲喂B.subtilis的生长猪, 平均日增重提高6%~7%, 饲料转化率提高3%~4%。Alexopoulos等应用低、中、高剂量的复合芽孢杆菌制剂 (含B.subtilis) 拌料, 从断奶到育肥整个饲养阶段饲喂猪, 结果, 与对照组相比, 发病率分别下降了9.26%、14.81%和25.93%, 发病死亡率分别下降了0%、3.70%和11.1%, 猪的平均增重、饲料转化率和猪胴体品质显著优于对照组, 在中、高剂量组中效果更为明显。

陈兵等研究报道B.subtilis对AA鸡生长性能和十二指肠消化酶的影响, 结果表明, 纳豆芽孢杆菌剂能提高AA鸡生长性能, 当添加量为200mg/kg时, 平均日增重和平均日采食量达到最大, 分别比对照组提高2.47g和5.11g;纳豆芽孢杆菌剂能提高十二指肠消化酶 (总蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶) 的活力52.2%~89.2%。四川农业大学何明清教授主持研究的饲用微生物添加剂验收报告中指出, 芽孢杆菌8901添加剂 (含B.subtilis) 经1993~1994年3次结果进行统计分析, 在营养水平相同的情况下, 分别用0.1%、0.15%和0.2%的8901添加剂饲喂时间分别为5、6、7周龄的肉鸡, 结果显示日增重较对照组分别提高8.9%、14.5%、21.6%, 饲料利用率分别提高19.1%、17.9%、10.1%, 发病率分别降低20%、20.7%、22.4%;芽孢杆菌添加剂8701A (含B.subtilis) 通过1357头哺乳仔猪试验表明, 在农村条件下试验时, 日增重提高15.1%~25.8%。江苏无锡阿尔宝尔生物工程有限公司生产的以B.subtilis为主“宝肠安”系列产品在近期应用试验结果表明:在水体中泼洒枯草芽孢杆菌微生态制剂能显著地提高对虾育苗成活率, 降低病死率;2次试验中, 试验组的平均成活率比对照组提高了31.05%, 差异极显著;在基础上添加0.1%的枯草芽孢杆菌制剂, 可显著增加肉鸡的末期平均体重、净增重和日增重均比对照组高, 差异显著 (P<0.05) , 饲料转化率较对照1组提高3.14%, 肉鸡胴体的品质得到改善, 增加必须氨基酸和鲜味氨基酸含量和增加鸡肉鲜味;在仔猪基础日粮中添加0.1%的枯草芽孢杆菌制剂, 使试验组比对照组的头均日增重提高3.92%, 饲料转化率提高了5.96%, 腹泻率降低了5%, 净增重耗料成本降低了4.61%;分别经口每天每头给予奶牛0、10亿、50亿、200亿个枯草芽孢杆菌孢子, 结果, 试验组产奶量分别增加3.07%、23.30%和19.80%;中、高剂量组与对照组差异极显著 (P<0.01) , 试验组比同期对照组奶中脂肪和蛋白质含量均增长0.7%。

4 结束语

枯草芽孢杆菌在生猪养殖中的应用 第9篇

1、枯草芽孢杆菌作用机理及使用效果

1) 耗氧产酸, 调节肠道微生态平衡, 达到预防腹泻、下痢等疾病

枯草芽孢杆菌在生长过程中耗氧, 造成肠道低氧, 并产生丙酸、丁酸等有机酸降低肠道内p H值, 促进有益厌氧菌如乳酸菌、双歧杆菌等的生长, 同时抑制肠道病原细菌如大肠杆菌、沙门氏菌等的生长繁殖, 提高有益微生物在肠道细菌种间的竞争优势, 达到预防猪腹泻及下痢的目的。

2) 分泌多种酶类, 提高饲料消化利用率

枯草芽孢杆菌可分泌多种酶如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、果胶酶、葡聚糖酶等, 降解动植物性饲料中复杂有机物, 促进消化吸收, 提高饲料利用率。

3) 产生多种营养素, 参与机体新陈代谢

枯草芽孢杆菌在动物肠道内生长繁殖, 能产生维生素、促生长因子和蛋白多肽类抗菌物质等多种营养物质, 还可以提高动物对钙、磷的利用率, 参与机体的新陈代谢。减少粪便中氮、磷、钙的排泄量, 减少有害气体排放, 降低养殖场所氨气、吲哚等有害气体的浓度, 减轻粪便臭味, 改善养殖环境。

4) 提高动物免疫力

枯草芽孢杆菌能够刺激动物免疫器官的生长发育, 激活淋巴细胞, 提高免疫球蛋白和抗体水平, 通过淋巴循环活化全身的免疫防御系统, 提高动物免疫力和抗病力。同时缓解厌食, 生长缓慢等应激反应。

2、枯草芽孢杆菌用法用量

1) 直接饲喂

直接饲喂包括两种使用方法, 直接饲喂枯草芽孢杆菌要注意添加量, 并不是添加得越多越好, 但量太少也不起作用, 添加得多, 一来增加成本, 二来太多的菌也不起作用。

第一种方法, 拌料时添加到饲料里, 也是使用最为方便且利用最充分的方法, 因为枯草芽孢杆菌有很好的耐热性 (90℃) , 可能参与饲料的高温造粒, 而且具有很好的耐贮藏性能, 一般饲料质量保证期是几个月, 而枯草芽孢杆菌在常温下保存两年也只损失不到10%。添加量按全价饲料添加计算, 一般保证饲料内50万~100万个活菌/克, 乳猪添加量是仔猪、生长猪、育肥猪的两倍。

第二种方法, 是添加到猪所饮水中直接饲喂, 添加量按直接饲喂饲料的量里活菌总数计算。

2) 发酵饲料喂养猪

枯草芽孢杆菌还可用来发酵饲料, 配合酵母菌、黑曲霉等其他益生菌, 在一定温度及湿度下发酵粗饲料如木薯渣、秸杆、酒糟、蔗渣等。

3) 发酵垫料床用发酵剂

发酵垫料床养猪是目前兴起的比较环保的养殖方法, 垫料里最重要的成分微生物发酵剂就是多种益生菌混合物, 而枯草芽孢杆菌因环境适应性强, 成为该发酵剂里最主要也是最普遍的添加物。

3、枯草芽孢杆菌用于养猪时注意事项

枯草杆菌 第10篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

2006年7月—2010年7月我科足月分娩新生儿60例, 出生1 min Apgar评分≥7分;出生后48 h血清总胆红素达140.0μmol/L±14.5μmol/L。随机分为对照组和观察组, 每组30例, 两组新生儿年龄、病情等比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法

(1) 观察组:采用蓝光照射加口服枯草杆菌二联活菌颗粒。新生儿出生48 h血清总胆红素达140.0μmol/L±14.5μmol/L给予蓝光照射加口服枯草杆菌二联活菌颗粒。照射前给新生儿淋浴, 擦干, 禁用任何护肤品, 戴黑色棉布罩, 保护脐部及外阴部, 将新生儿最大限度地裸置于已准备好的温箱内。我科使用的温箱是宁波戴维医疗器械有限公司生产的YP90AB型, 配有6支40 W的蓝光灯管, 共240 W。温箱温度根据需要调节, 通常保持箱内温度28℃～30℃。采用单面光疗法, 间断照射, 24 h照射8 h, 连续照射4 d。2 h变换体位1次[1]。按时喂奶、喂水、换尿片。口服的枯草杆菌二联活菌颗粒, 为北京韩美药品有限公司生产, 每盒15支, 每支1 g含屎肠球菌1.35×108个, 枯草杆菌1.5×107个, 维生素C 10 mg, 维生素B10.5 mg, 维生素B20.5 mg, 维生素B60.5 mg, 维生素B121.0 mg, 烟酰胺2.0 mg, 乳酸钙20 mg, 氧化锌1.25 mg。每日口服3次, 每次根据体质量的大小给1/3 g～1/2 g, 每次喂服前用低于40℃温开水溶化。 (2) 对照组:采用蓝光照射治疗, 蓝光照射方法同观察组。

1.2.2 观察指标

比较两组新生儿治疗第2天～第5天的血清胆红素变化情况。

1.2.3 统计学方法

采用SPSS12.0软件进行统计分析, 计量资料采用t检验, P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

3 讨论

新生儿黄疸可能是新生儿正常发育过程中产生的一过性血胆红素增高, 也可能是某种病理因素, 导致血胆素增高, 但无论什么原因使血清胆红素升高到一定程度都会引起新生儿胆红素脑病等严重并发症的发生。血胆红素在人体内有4种不同形式: (1) 未结合胆红素, 与白蛋白可逆性联结; (2) Delte胆红素, 与白蛋白共价联结; (3) 结合胆红素, 可经肾与胆道系统排泄; (4) 游离胆红素, 不与血清中白蛋白联结。在正常情况下它们以一定的比例保持稳定, 不会给人体带来损伤。其中游离胆红素有毒性, 当游离胆红素增加通过血脑屏障可引起脑损伤。而新生儿胆红素的代谢有其特点: (1) 胆红素生成增多; (2) 肝细胞摄取胆红素能力低下; (3) 肝细胞结合胆红素的能力不足; (4) 肠肝循环的特殊性, 在肝内形式的结合胆红素均有不稳定性, 在十二指肠或空肠pH值偏碱情况下, 使部分结合胆红素分解为未结合胆红素, 迅速经肠黏膜吸收回到肝脏进入血液循环;胎粪延迟排出, 也加重了胆红素的重吸收, 新生儿肠道内无细菌不能将结合胆红素还原成尿胆原和尿胆素, 随粪便排出, 也增加了胆红素的回吸收。以上原因均可使游离胆红素增加。所以, 新生儿容易出现黄疸。光照疗法是一种降低血清未结合胆红素简单易行的方法, 胆红素能吸收波长是450 nm～460 nm的光线, 而蓝光波长主峰在425 nm～475 nm, 故光照疗法选用蓝光。游离胆红素在光的作用下由Z型转化成E型和光红素, 经胆汁排泄到肠腔或从尿中排出, 易溶于水从而使血中胆红素降低[2]。口服枯草杆菌二联活菌颗粒直接补充正常生理活菌, 调节人体肠道环境, 促进正常菌群的建立[3], 将排入肠道的结合胆红素还原成尿胆原和尿胆素, 并从肠道和肾脏排出, 减少胆红素的肠肝循环;屎肠球菌还能降低肠道pH值, 从而减少结合胆红素在肠道内分解成未结合胆红素;枯草杆菌产生多种消化酶, 促进消化吸收, 保持大便通畅, 减少胆红素的吸收, 从而降低血清胆红素。另外枯草杆菌二联活菌颗粒还含有新生儿生长发育所必需的其他物质, 其含量是根据美国食品和药品管理局人体每日摄取推荐量确定。本研究显示, 观察组新生儿第2天～第5天的血清胆红素水平低于对照组 (P均<0.05) 。提示:蓝光照射加口服枯草杆菌二联活菌颗粒治疗新生儿黄疸优于单纯蓝光照射治疗。

参考文献

[1]崔焱.儿科护理学[M].第4版.北京:人民卫生出版社, 2006:99.

[2]金汉珍.实用新生儿学[M].第3版.北京:人民卫生出版社, 2002:305.

枯草杆菌 第11篇

关键词 结核分枝杆菌 非典型分枝杆菌 鉴别 药敏

资料与方法

材料：①L-J培养基；②L-J鉴别培养基(对硝基苯甲酸PNB；噻吩-2-羧酸肼T2H)；③含不同浓度的药物的培养基；④肺科住院患者的痰液标本。

方法：①住院患者的痰液标本留取无菌锥形管内经4%NaOH将痰消化30分钟后，用无菌管在生物安全柜内接种在L-J培养基上，经过一定时间培养基表面生长出肉眼可见的菌落。②挑取此菌落于无菌盐水中制成浓度：10-2菌液和10-4菌液两种。②将制好的菌液分别接种于卡那霉素(AK)、氧氟沙星(OFX)、卷曲霉素(CPM)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、异烟肼(INH)、对氨基水杨酸钠(PAS)、利福平(RFP)、丙硫异烟胺(TH1321)两种不同浓度的药物培养基中及对硝基苯甲酸(PNB)；噻吩-2-羧酸肼(T2H)培养基中，于37℃培养箱内培养，每周观察菌落1次，4周内报出结核分枝杆菌与非典型分枝杆菌的鉴定与药敏试验结果。

结 果

2010年1月～2011年11月检出非典型分枝杆菌26例，其中2例為牛型分枝杆菌生长，其余均为非结核分枝杆菌生长，随后做结核菌药敏试验结果，见表1和表2。

讨 论

多年来，一直从事结核病的实验室工作。对于结核分枝杆菌与非典型分枝杆菌的鉴定与药敏试验进行综合分析，可以帮助临床有针对性的选择有效的抗结核药物，避免盲目用药造成治疗效果欠佳，尽量减少耐药率的发生。

长期以来，由于非结核分枝杆菌受到检查和鉴定菌种方法等因素的限制，分枝杆菌属的分类鉴定一直采用以表型特征为主的方法，随着分子生物学的发展，聚合酶联反应(PCR)核酸技术的应用为分枝杆菌的分类和鉴定开辟了新途径。

通过对分枝杆菌与非典型分枝杆菌鉴别试验及药敏试验的分析，可以帮助临床在结核病与其他分枝杆菌感染疾病的鉴别诊断及选择治疗药物上做出较好的判断。为临床上选择有效的药物治疗提供了可靠的实验室依据。

由于条件所限，只能分出结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌，不能更细的分出如龟分枝杆菌、鸟分枝杆菌等非典型分枝杆菌。随着分子生物学的发展及基层医院的广泛应用，使实验室的工作日趋完善，实验技术更加先进，以满足临床诊断、治疗的需求。

参考文献

1 康丽军,洪峰,等.结核/非结核分枝杆菌核酸快速检测方法临床应用价值.中国防痨杂志,2011,5(33):5.

枯草杆菌 第12篇

1 资料和方法

1.1 一般资料

2007年3月至2009年10月间我科小儿抗生素相关性腹泻病例84例,患儿3月-7岁。静脉应用抗生素为光广谱霉素类、头孢菌素类,大环酯类等。患儿因上呼吸道感染、支气管炎、肺炎等住院,无腹泻,住院3天后发生腹泻,大便呈水样或稀糊样,每天>3次,连续2天以上。将患儿随机分为治疗组42例,对照组42例,两组患儿病情、应用抗生素种类、年龄、性别构成差别无统计学意义。

1.2方法

治疗组:口服枯草杆菌二联活菌颗粒,(北京韩美药品有限公司1g/袋内含活菌冻干粉37.5mg,活菌1.5亿个,维生素C,维生素B1,维生素B2,维生素B6,维生素B12,烟酰胺,乳酸钙,氧化锌)。用法:<1岁1/2袋,2次/d;1岁～,1袋,2次/d;2～3岁,1.5袋,2次/d;3～6岁1.5袋,3次/d;>6岁,2袋,2次/d.对照组:服用乳酶生2-5片/次,3次/d。以上均服5天。

1.3 疗效判断[1]

显效:治疗72h内粪便性状及次数恢复正常,全身症状消失。有效:治疗72h内粪便性状及次数明显好转,全身症状明显好转。无效:治疗72h内粪便性状、次数及全身症状无好转,甚至加重。

2 结果

两组疗效观察结果见表1。服药期间未见不良反应发生。注:经统计学处理,x2=4.6239,P<0.05,有显著差异性。

3 讨论

小儿抗生素相关性腹泻发生率为5%-25%,几乎所有抗生素均可诱发抗生素相关性腹泻,以广谱青霉素最常见,其次是头孢菌素类、克林霉素、氨基糖甙类、复方新诺明等。其中氨基糖甙类,因其耳毒性及肾毒性[2],我院儿科已停用。主要由于抗生素抗生素的使用导致菌群失调,引起致病菌异常生长,破坏正常菌群,糖类不能被发酵成易吸收的短链脂肪酸,初级胆汁酸不能生成次级胆汁酸,积滞在肠腔导致渗透性腹泻,抗生素引起的变态反应,毒性作用对肠粘膜的直接损伤,药理学效应致肠道动力学改变,也是导致腹泻的原因[3]。枯草杆菌二联活菌颗粒是一种新型复合乳酸菌微生态制剂,含有人体肠道需要的正常活菌粪链球菌、枯草杆菌及多种维生素、微量元素及矿物质钙,口服后可直接补充正常生理菌丛,抑制致病菌、有害菌和腐败菌,促进营养物质的消化、吸收,抑制肠源性毒素的产生和吸收,达到调整肠道内菌群失调的目的。其中粪链球菌能在肠道中迅速定植,繁殖能力强,消耗过氧化氢,促进以双歧杆菌为主的厌氧菌生长,使紊乱的菌群恢复正常,达到治疗腹泻的目的。且其能产生溶酶菌和副消化酶,可帮助小肠消化吸收功能恢复。因此,应用枯草杆菌二联活菌颗粒治疗小儿抗生素相关性腹泻具有良好的疗效,亦无不良反应,所以有一定的临床推广价值。

摘要：目的 探讨口服治疗小儿抗生素相关性腹泻的临床疗效。方法 将84例患儿随机分为治疗组和对照组各42例,两组一般治疗相同,治疗组口服枯草杆菌二联活菌颗粒。结果 治疗组总有效率97.6%,对照组85.7%,两组比较P<0.05。结论 枯草杆菌二联活菌颗粒治疗小儿抗生素相关性腹泻有效安全。

关键词：枯草杆菌二联活菌颗粒,小儿,抗生素相关性腹泻

参考文献

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