1P理论范文

1P理论范文（精选4篇）

1P理论 第1篇

1 体育赛事市场开发与1P理论

虽然国内外已有许多学者对如何促进体育赛事市场开发进行了研究, 但因为体育赛事市场开发所涉及的领域较广, 且对体育赛事市场开发进行研究的时间较短, 迄今为止还未形成一个可以指导体育组织进行体育赛事市场开发的行之有效的策略框架。部分体育组织在进行市场开发时, 往往采取摸着石头过河的尝试手段去碰运气, 而这显然不利于赛事市场开发工作的有序开展。产生于网状经济时代的1P理论[3]为体育组织进行体育赛事市场开发提供了有迹可循的思维路径。

1P理论是基于对营销理论中的4P营销策略进行重构而形成的创新营销理论。1P理论是指企业等社会组织 (即第一方) 通过在交易中引入利益攸关的其他组织 (即第三方) 参与, 共同承担企业的成本 (3P, 即生产成本、渠道成本和促销成本) , 使企业能够以更低价格 (1P) 向顾客 (即第二方) 销售产品, 获得竞争优势。1P理论将传统营销理论中的双方交易 (企业和顾客) 扩展为三方交易 (企业、顾客和第三方组织) 。其精髓在于通过引入第三方组织共担成本, 从而使参与交易的三方共同获益。

1P理论产生于网状经济时代, 适应了当今企业与其利益相关方以网状连接的现实需求。在体育赛事市场开发中, 体育组织、赞助商、观众构成了一个利益相关网。运用1P理论可以使这一市场开发关系网中的三方都受益。用1P理论来看体育赛事市场开发, 可以清晰地看到, 体育组织通过招揽赞助商的参与, 共担了体育组织的运营成本, 使体育组织能够以更低价格向顾客提供体育产品。在这里, 体育组织是第一方, 他们将所产出的体育产品 (体育赛事、场馆、运动员等) , 通过冠名赞助、转让体育赛事商标使用权、转让体育赛事宣传权、产品供应权、特许经销权等形式将赞助商融合到体育赛事中来[4]。参与体育赞助的赞助商在这里是第三方, 他们通过资金和实物赞助的方法获得了与体育组织的联系, 并宣传这种联系的权利, 从而可以利用体育组织和体育赛事的强大品牌影响来达到扩大自身品牌知名度和美誉度, 增加产品销量, 融合客户关系等多种目标。他们的参与使体育赛事由原有的单一体育产品转化成附加了更多赞助商信息的复合产品。第三方的参与使体育组织的顾客 (第二方) , 即观看体育比赛的观众等也有所受益。一方面, 第三方企业资金的支持, 分担了体育产品的生产成本, 使体育产品的价格——门票价格大为降低, 使观众受益;另一方面, 第三方企业的加入, 为体育产品带来了更丰富的内涵, 使观众可以获得更多与赛事相关的体验。

2 基于1P理论的市场开发策略

2.1 策略一:开发战略利益相关方

依据1P理论, 战略利益是指第一方组织的顾客或者产品对第三方有吸引力, 可以为第三方产生战略利益, 但第三方无法直接获得这些利益, 而必须通过第一方才能获得。在这种情况下, 第三方愿意为获得这些战略利益而向第一方支付价格。

在体育赛事市场开发中, 体育组织是第一方, 赞助商是第三方。体育组织在进行市场开发时, 应充分发掘所举办赛事所能产生的各项利益, 并依据对这些利益的分析去寻找希望获取这些利益的赞助商。体育组织可以从如下两个方面入手来开发战略利益相关方。

2.1.1 开发品牌利益相关者

在现代发达的媒体传播时代, 体育赛事由于其广受关注的特性, 有着不同于普通产品的品牌价值。如奥运会等大型国际体育赛事的品牌价值更是不可估量。因此, 体育赛事组织方应对赛事的品牌价值进行充分的估计, 并予以定位。根据学者研究, 赛事品牌与赞助商品牌相适应将有助于赞助成功[5], 因此赛事组织方在寻找品牌利益相关者时应遵循品牌价值相对应的原则。高端品牌赛事应寻找资金力量雄厚的高端品牌, 如国际奥组委开展的“TOP”奥运合作伙伴计划中所有参与的TOP合作伙伴都是品牌价值与奥运会相适应的高端品牌。对于品牌价值还未彰显的体育赛事, 应寻找与赛事品牌相对应的赞助商, 这样更易于进行市场开发。

2.1.2 开发目标市场利益相关者

与其他产品或服务一样, 体育赛事也会形成自身的目标市场, 即观众市场。不同的体育赛事的目标市场也不尽相同。大型综合性体育赛事由于其将多种竞赛项目集于一身, 因此, 其目标市场构成比较复杂, 涵盖了各种类型观众。而专业性较强的单项体育赛事其目标市场构成相对来说比较简单, 观众具有更多的同质性。比如高尔夫比赛的目标市场中大部分是对高尔夫运动感兴趣的观众。体育赛事组织方可根据对赛事的目标市场分析来寻找合适的赞助商。对于奥运会、全运会等大众体育项目来说, 可针对大众消费品进行市场开发。对于单项体育赛事, 则应选择与赛事目标客户相同的赞助商。如网球比赛组织方可针对网球相关产品供应商进行市场开发。

2.2 策略二:开发范围经济相关方

按照1P理论, 范围经济是指企业可以通过扩大经营范围, 利用原材料供应商与产品之间的关联性, 尤其是互补性, 将原材料供应商引入到企业的生产运营中, 从而得以降低整体成本或者提高整体收益。这里的企业是第一方企业, 就体育赛事市场开发而言, 第一方企业是指体育赛事组织方。运用范围经济原则, 体育组织应从体育赛事的组织运营入手, 分析哪些赞助商可以参与到体育赛事的组织和运营中。体育赛事组织方运用范围经济原则进行市场开发时可从如下几个方面入手。

2.2.1 开发生产流程中的范围经济相关方

在体育产业链中, 体育赛事表演业处于产业链的下端, 其上游还有体育设施设备制造商、体育服装产品制造商等相关企业。开发生产流程中的范围经济相关方就是指体育赛事组织方充分挖掘赛事组织运营中的各个环节可能涉及到的上游供应商资源, 并将其通过赞助等形式整合到体育赛事组织运营过程中来, 从而降低赛事组织运营成本。比如说北京奥组委就开发了多个产品类别, 多个赞助级别的上游供应商, 为北京奥运的成功举办提供了有力的产品、服务和资金等多方面的支持。

2.2.2 开发传播过程中的范围经济相关方

体育赛事是人们喜闻乐见的活动, 众多的观众都希望观看体育赛事, 了解比赛的进程等赛事相关信息, 因此, 体育赛事具有较高的传播价值。开发传播过程中的范围经济相关方就是指体育赛事组织方对赛事的传播价值深度挖掘, 在进行赛事传播时引入第三方传播媒介的力量, 通过达成传播合作伙伴计划等方式, 将赛事传播价值最大化。在开发第三方传播媒介时, 赛事组织方应遵循适度原则, 即根据赛事规模选择适量的传播媒介, 这一方面提高了体育赛事对传播媒介的吸引力, 另一方面也维护了传播媒介的利益, 达到体育赛事和传播媒介的双赢效果。

3 结语

体育赛事市场开发是体育赛事获取资金的重要渠道, 对于一些商业体育赛事来说, 市场开发工作的好坏直接关系到体育赛事的生死。本文根据1P理论对体育赛事组织方进行市场开发提出了开发品牌利益相关者、开发目标市场利益相关者、开发生产流程中的范围经济相关方和开发传播过程中的范围经济相关方等市场开发策略建议, 以期帮助赛事组织方有针对性地进行市场开发, 提高市场开发工作效率, 获得良好的市场开发效果。

摘要：改革开放以来, 我国体育赛事市场开发经历了从无到有、从小到大的成长历程。体育赛事的市场化运作为推动我国体育产业的发展起到了积极的促进作用。但是由于体育赛事组织者对赛事市场认识不足等原因, 一些体育赛事的市场开发显得盲目无序、缺乏策略, 这在一定程度上影响了我国体育赛事市场的开发。有鉴于此, 本文运用1P理论对体育赛事市场开发提出了开发品牌利益相关者、开发目标市场利益相关者、开发生产流程中的范围经济相关方和开发传播过程中的范围经济相关方等市场开发路径建议。

关键词：体育赛事,市场开发,1P理论,赞助

参考文献

[1]吴超林, 杨晓生.体育产业经济学[M].北京:高等教育出版社, 2004.

[2]姚洁.中国体育赛事市场开发研究[J].经济师, 2006 (5) .

[3]王建国.1P理论:网状经济时代的全新商业模式[M].北京:北京大学出版社, 2007.

金融网络营销 从1P到4P 第2篇

在过去的一段时间里,受金融危机影响,大部分人形成了一种危机心理,降低收入预期,对支付的谨慎度相应提高,为节省消费成本,从而选择电子商务。这无疑推动了电子商务和网络金融的发定位,抓住当前最有实力的市场群体,然后让他们去影响身边的其他群体。在这一点上,腾讯平台就做得很好。展。另外,由于网民中 “80后”和“90后”的比重较大,他在未来,高互动性网站将会成为金融营销的核心网们对互联网有很强的粘性,又是金融营销的主要受众之一,所以即使是在经济形势尚不确定的状态下,选择金融网络营销也很合时宜。

但是,目前国内金融网络营销做得出色的案例尚为数不多。这有两方面的原因:一是金融企业网络营销意识不够;二是很多互联网平台还仅仅局限于帮助金融企业投放广告,这对金融营销来说已经没有新意。

与国外网络营销的成熟程度相比,中国金融企业网络营销行为还处于初级阶段,存在很大提升的空间。

相比大金融机构,新崛起的非国有商业银行和中小金融企业反而会更多地寻求创新和突破,比如招商银行、民生银行。

因此,中小银行往往才是互联网最佳合作机构,特别是对于新兴市场的培育,他们的合作空间更大。在美国,市场上有一两万个银行,这其中就有很多小银行,他们会细分市场,有自己特定的服务对象。如有的小银行就专门服务于牙医诊所,为他们提供贷款。

对于互联网企业来说,虽然目前环境很适合发展,但不能“靠天吃饭”,应该适时调整自己的角色定位和营销方略,不断创新,扩展营销空间,只有这样,才有可能在下一轮竞争中胜出。

互联网应该随着网民群体特点的改变而转变自己的定位,抓住当前最有实力的市场群体,然后让他们去影响身边的其他群体。在这一点上,腾讯平台就做得很好。

在未来,高互动性网站将会成为金融营销的核心网站。比如Facebook、Twitter,国外金融机构通常会利用他们来做新产品推广。在这些SNS社区里,人们之间互动性高,传播性高,很容易产生信任感。

此外,互联网还要善于创新。对于金融企业和网民来说,互联网只有给他们新鲜的有吸引力的东西,触动人们的神经,才会有大发展的机会。

互联网企业不应该只是为金融企业做一些简单的常规性传播,它需要在原来的模式上有重大的变革,才会为新的网络交易提供更好的成长空间。

随着电子商务的发展,网络已经不再是一个单纯的媒体角色,一个行销和传播的工具,它更应该作为一个金融服务工具,在金融营销中发挥综合的作用。角色改变后,互联网就变成了一个威力无比的渠道,成为金融营销的一部分。目前中国金融网络营销实际还只是简单的1P(Promotion)营销,而不是4P(Product、Price、Place、Promotion)营销。从这一点来说,中国金融网络营销之路还有很大的发展空间。

1P理论 第3篇

自2008年长庆油田超低渗透油藏开发启动以来, 探索性的将地面建设与数字化管理、与新型劳动组织架构相结合, 建立了适应超低渗透油藏快速、大规模建设的生产保障体系, 适应了“大油田管理、大规模建设”的战略发展需要。超低渗透油藏周边的储罐和管输系统已较为完善, 但是, 仍然需要在较为完善的站场自动控制系统和数字化管理的基础上, 开展泵-泵工艺技术研究和应用, 优化工艺流程, 实现节能降耗, 降低工程投资和运营成本。

2 泵-泵工艺介绍

泵-泵工艺主要应用于大型输油管道, 也叫做密闭输送工艺, 即将上一站来的输油管线与下一站输油泵的吸入管线相连, 没有设置起调节作用的旁接油罐 (见图1) , 输油站之间的工况密切联系, 类似在一个泵站上多台泵串联;且各站的输量必然相等, 进出站压力相互直接影响, 全线构成一个统一的水力系统。

3 集输系统

3.1 增压点

传统增压点采用“来油加热, 分离缓冲, 原油外输”的流程, 能耗高;运行维护成本高, 管理操作难度大。采用泵-泵工艺之后, 减少了来油加热的环节, 通过段塞捕集和补液调节稳定来液, 消除了段塞流的影响, 应用油气混输装置, 采用变频控制技术, 实现连续平稳输油, 降低了能耗和运行成本。同时研发了橇装增压集成装置, 实现增压点流程的橇装集成化、一体化和无人值守 (见图2) , 减少了占地, 缩短了建设周期, 降低了成本。

到目前已累计建成增压点137座, 其中数字化集成增压装置55套。优化后常规增压点来液稳定, 实现连续平稳输油, 降低了能耗, 延长设备寿命, 年运行成本降低48%;数字化集成增压装置使建设投资降低了15.8%, 减少了征地, 建设工期缩短20天, 年运行成本降低17万元, 较以前降低60%。

3.2 接转站

在应用缓冲罐稳定来液和消除段塞流等技术的基础上, 取消事故油罐, 由开式流程转变为密闭流程 (见图3) , 来油经过加热、缓冲后, 直接通过外输泵进行外输, 优化流程, 达到了节省占地, 减少油气损耗, 降低安全风险, 降低综合成本的目的。

先后在镇北油田镇五转等4座站场应用该流程。与同规模的接转站对比, 取消了事故罐, 减少了占地面积, 建设周期缩短了15天 (25%) , 投资降低了15%;采用变频控制, 实现泵-泵的密闭流程, 减少热能损失, 年运营成本降低17万元, 降低了21%。

3.3 脱水站

传统的脱水站采用“三相分离器+沉降罐脱水备用”流程, 上游来液不均易影响三相分离器平稳运行, 降低了设备使用寿命及处理效果, 且为开式生产流程, 不符合密闭集输工艺及低碳、环保要求。

为此研制了新型两室分离缓冲罐, 使来油在三相分离器前后两次进出缓冲罐, 进而取消了沉降罐和净化罐, 实现了密闭输油 (见图4) 。

脱水站使用两室分离缓冲装置并采用泵-泵工艺后具有如下优点: (1) 稳定来液, 消除段塞流, 三相分离器平稳运行; (2) 密闭集输流程, 充分利用资源, 减少有害气体排放, 节能减排; (3) 事故流程时分离一室可持续产生燃料气, 确保生产平稳运行; (4) 输油泵变频控制, 高低液位启停泵, 维护输油泵平稳输油; (5) 取消了净化罐, 与三相分离器联合布局, 共用操作平台, 降低建设成本。

在姬塬油田学五脱水站应用该工艺后, 取消了沉降罐和净化罐, 投资降低16%, 建设工期由75天降至50天, 充分利用上站来油的进站余压, 耗电量节约4.3%。

4 供注水系统

4.1 供水系统

传统供水站水源来水余压未得到充分利用、水中溶解氧易升高, 水罐体积大、配套设施多, 占地面积大, 投资高。

数字化泵-泵供水工艺采用变频供水、气压罐稳压、多项防护智能控制等技术, 将供水泵、气压罐、配电及仪表控制单元一体化集成, 实现泵-泵 (潜水泵组-供水泵) 的密闭叠压串联供水, 取消了中间水罐。

绥靖油田中一供试验效果表明, 数字化泵-泵供水站建设面积减少60%、能耗下降10-20%、建设降低20%, 实现了无人值守, 方便了油田生产管理, 节约人工成本60万元/年。同时也实现了密闭隔氧输水, 停留时间短, 确保了水质。

4.2 注水系统

由于油田滚动开发, 部分新投注水井就近插接在已建注水干线末端, 造成已建干线高压水输送距离远, 压力损失大, 到达井口时不能满足配注需求, 存在欠注的现象, 新建注水站费用大幅增加。

为此, 研制了智能增压注水装置, 该装置将增压注水泵、高压管路过滤器、仪表控制柜、变频配电柜一体化集成安装, 通过RT U远程终端控制系统, 监测生产运行动态及生产数据采集, 可实现无人值守。

智能增压注水装置具有设备橇块化、功能集成化、工厂制造建设快捷、投产迅速、节省投资、节省占地的优点, 目前已在姬塬油田刘峁塬区、合水油田庄36等欠注区域应用。

5 技术展望及探讨

综上所述, 通过对泵-泵工艺的研究和应用, 超低渗油藏地面工程投资得到有效降低, 实现了工艺流程的优化;在此基础上, 将从以下几方面的持续推进研究工作, 逐步完善泵-泵工艺系列化技术:

(1) 形成生产作业全智能化, 管理运行全自动化的橇装脱水集成装置和橇装接转集成装置等一体化集成设备, 继续优化地面建设形态。

(2) 学五脱水站泵-泵输送试点成功后, 要继续在超低渗油藏新建的脱水站扩大试验规模。

(3) 在产液稳定的井组开展对井口至增压点不加热密闭泵-泵输送工艺的研究, 将井组出油管线直接与增压点外输泵的吸入管线相连, 减少伴生气分离及放空, 增加增压点外输管道携气量, 优化工艺。

(4) 持续开展从水源井-注水井口全系统的泵-泵技术和模块化技术研究, 推进长庆油田供注水系统的技术进步。

(5) 在接转站、脱水站流程优化的前提下, 在作业区设置一定数量车载移动事故油箱, 实现技术创新和生产管理结合。

参考文献

[1]陈荣等.油田地面系统中应用泵-泵工艺输送工艺的可行性, 油气田地面工程, 2011年1月出版, 第30卷第1期, 64-65

1P理论 第4篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

GCDC和VPC23019购自美国Sigma-Aldrich公司, CCK-试剂盒-8购自日本Dojindo公司, DMEM-F12培养基以及特级胎牛血清FBS购自美国Gibco BRL公司, Cleaved-caspase-3抗体购自美国Cell Signaling Technology公司, S1P ELISA测定试剂盒购自上海前尘生物科技有限公司, 人HL-7702肝细胞株购自深圳市百恩维生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 CCK-8法测定HL-7702细胞存活率

当HL-7702细胞生长融合度至70%~80%时, 给予含GCDC或VPC23019的培养基干预24 h或30 min后, 根据CCK-8试剂盒说明书检测细胞存活率。每孔加入10%无血清培养基稀释的CCK-8工作液100μL, 37℃细胞培养箱孵育3 h, 用Multiskan MK3酶标仪测定450 nm波长处的吸光度。取4孔光密度OD平均值, 按照说明书公式计算细胞存活率, 重复实验3次后收集数据行统计分析。

1.2.2 Western blot法检测caspase-3蛋白的表达

接种于60 mm培养皿的HL-7702细胞5×106, 给予含GCDC或VPC23019的培养基干预24 h或30 min后, 用冷PBS洗两次, 加入适量细胞裂解液, 4℃静置30 min, 使用细胞刮子刮下细胞, 置入2 m L离心管中, 12 000 rpm离心10 min, 取上清约2μL采用BCA法进行蛋白定量, 剩余上清液保存于低温冰箱以备电泳。总蛋白经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后, 蛋白转移到PVDF膜上。5%脱脂奶粉封闭60 min, 然后在兔抗人caspase-3抗体 (美国Bioworld Technology公司) 孵育液中4℃过夜, 接着与相应的二抗室温孵育90 min。用ECL发光液显色后, 暗室曝光到X线片, 扫描后用Image J 1.410软件进行半定量分析。

1.2.3 双抗体夹心ELISA方法检测上清液S1P的表达

接种于96孔板的HL-7702细胞, 给予含GCDC或VPC23019的培养基干预24 h或30 min后, 取100μL细胞培养上清液, 加到S1P抗体预先包被的酶标板中, 37℃培养箱孵育90 min, 然后吸去上清液, 接着加入S1P抗体继续37℃培养箱孵育60 min, TBS漂洗3次后, 加入生物素标记的二抗37℃培养箱孵育30 min, 加入TMB显色, 终止液终止反应后, 用Multiskan MK3酶标仪 (入=450 nm) 记录吸光度。取3孔吸光度的平均数, 按公式计算上清液S1P的表达。

1.3 统计学处理

使用SPSS 13.0软件进行统计分析, 实验数据 (mean±SE) 表示, 组间差异采用单因素方差分析, 两两比较按照最小显著性差异进行, 以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 S1P通路介导GCDC引起的HL-7702细胞毒性

根据笔者前期的实验研究, 应用150 mol/L GCDC处理HL-7702细胞24 h建立胆酸盐损伤肝细胞模型, CCK-8试剂盒测定细胞存活率。未经任何处理的对照组细胞存活率为100%, 150μmol/L GCDC组处理HL-7702细胞24 h可明显地产生细胞毒性, 使细胞存活率为 (60.8±5.2 630) %明显降低, 两组比较差异有统计学意义 (P<0.01) ;1.25μmol/L及2.5μmol/L浓度的VPC23019 (S1PR1抑制剂) 未能抑制GCDC引起的HL-7702细胞毒性作用, 细胞存活率分别为 (61.6±4.0 373) %、 (62.8±4.3 243) %, 与GCDC组比较差异均无统计学意义 (P>0.05) ;5~20μmol/L浓度范围内的VPC23019 (S1PR1抑制剂) 能抑制GCDC引起的HL-7702细胞毒性作用, 其中10μmol/L VPC23019+GCDC预处理30 min的抑制作用最显著, 表现为细胞存活率升高分别为 (70.2±2.5 884) %、 (80.4±2.7 018) %、 (70±2.9 154) %, 与GCDC组比较差异均有统计学意义 (P<0.01) , 见图1。单独10μmol/L VPC23019预处理对细胞存活率无明显影响。

2.2 S1P通路介导GCDC引起的HL-7702细胞凋亡

免疫印迹法测定cleaved caspase-3表达 (是反映细胞凋亡的一个指标) , 未经任何处理的对照组cleaved caspase-3/β-actin比值为 (0.5±0.0 894) , 150μmol/L GCDC处理组HL-7702细胞24 h比值为 (1.2±0.1 788) 可明显地诱导细胞凋亡, 与对照组比较差异有统计学意义 (P<0.05) 。但是, 在GCDC作用HL-7702细胞前, 10μmol/L VPC23019预处理30 min能抑制GCDC对cleaved caspase-3表达的上调作用其比值为 (0.8±0.0 894) , 可抑制GCDC的促凋亡作用, 与GCDC组比较, 差异有统计学意义 (P<0.01) 。10μmol/L VPC23019单独处理HL-7702细胞24 h对细胞凋亡无明显的影响, 其比值为 (0.53±0.0 806) , 与对照组比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 见图2。

*P<0.05, **P<0.01, 与GCDC组比较;##P<0.01, 与对照组比较

**与对照组比较, P<0.01, ##与GCDC组比较, P<0.01

2.3 Sph K1抑制剂阻抑GCDC对HL-7702细胞S1P表达的上调作用

ELISA测定培养上清液中S1P的含量, 未经任何处理的对照组培养上清液S1P浓度为 (119.6±9.3 950) pmol/m L, 150μmol/L GCDC组处理HL-7702细胞24 h可使S1P表达明显增多为 (160.3±8.9 442) pmol/m L, 两组比较差异有统计学意义 (P<0.01) ;但是, 在GCDC作用HL-7702细胞前, 应用10μmol/L VPC23019预处理30 min可明显地拮抗GCDC对S1P表达的上调作用, 上清液S1P浓度为 (140.8±7.0 894) S1P, 与GCDC组比较差异有统计学意义 (P<0.01) , 提示Sph K1通路参与了GCDC对S1P表达的上调作用。单独10μmol/L VPC23019预处理对培养上清液S1P浓度无影响为 (121.53±9.0 774) pmol/m L, 见图3。

3 讨论

磷脂是细胞膜的重要组分, 主要包含有两大类磷脂, 即由甘油构成的甘油磷脂 (phosphoglyceride) , 由神经鞘氨醇构成的鞘磷脂 (sphingolipid) 。鞘磷脂 (sphingomyelin) 是含硝氨醇或二氢鞘氨醇的磷脂, 其分子不含甘油, 是一分子脂肪酸以酰胺键与鞘氨醇的氨基相连。人体含量最多的鞘磷脂是神经鞘磷脂, 由鞘氨醇、脂肪酸及磷酸胆碱构成, 常与卵磷脂存在于细胞膜外侧。鞘磷脂的代谢产物为神经酰胺 (ceramide, Cer) 、鞘氨醇 (sphingosine, Sph) 和1-磷酸鞘氨醇 (sphingosine-1-phosphate, S1P) 等。1-磷酸鞘氨醇 (S1P) 是重要的磷脂代谢产物, 参与细胞增殖、存活和迁移等广泛的生物学效应。S1P在细胞内由鞘氨醇激酶 (Sph K) 使鞘氨醇磷酸化而形成。S1P代谢的异常调节已经成为多种肿瘤发生发展的重要机制。靶向Sph K-S1P信号通路的抑制剂、激动剂及抗体等已经成为众多肿瘤的新治疗策略。越来越多的证据表明, 鞘磷脂参与调控细胞的生长、周期和凋亡等, 鞘磷脂的重要活性代谢产物1-磷酸鞘氨醇 (sphingosine 1-phosphate, S1P) , 鞘氨醇激酶 (sphingosine kinase1, Sph K1) 是鞘氨醇生成S1P的关键限速酶, Sph K1/S1P信号通路在肝细胞存活或凋亡中有重要作用[4,5,6]。近来有研究表明, 胆汁淤积性黄疸引起肝实质细胞损伤是急慢性肝病的病因之一, 其中不同浓度的胆汁酸对肝实质细胞的损害程度相同, 胆汁酸低浓度时诱导细胞凋亡, 高浓度的胆汁酸则可导致细胞坏死[7,8,9]。细胞内鞘脂代谢平衡对于维持细胞增殖、分化和凋亡发挥重要作用, 鞘脂代谢物包括神经酰胺、神经鞘氨醇、鞘氨醇-1-磷酸盐等, 可作为重要的信号分子, 在肝细胞损伤和肿瘤的发生发展中有重要作用[10,11,12,13,14,15,16,17]。

**与对照组比较, P<0.01;##与GCDC组比较, P<0.01

本研究结果显示, 胆汁酸中的甘氨鹅脱氧胆酸盐 (GCDC) 能引起人HL-7702细胞明显的毒性损伤, 其表现为GCDC剂量依赖性地导致细胞存活率下降, 及细胞凋亡增加, 其中150μmol/L GCDC处理HL-7702细胞24 h细胞存活率下降显著, 这与先前研究结果相吻合[5,6,7,8]。引人注意的是, 本研究也发现, 在GCDC处理HL-7702细胞前, 10μmol/L VPC23019能抑制GCDC所致肝细胞毒性损伤和促凋亡作用, 表现为细胞存活率升高, 以及细胞凋亡减少。以上研究结果提示, S1P/S1PR1信号通路可能介导了胆汁酸 (GCDC) 对肝实质细胞 (如HL-7702细胞) 的毒性损伤, 而胆汁酸 (GCDC) 对肝实质细胞的毒性损伤是否通过受体下游MAPK、STAT3等信号通路呢?这期待将来进一步深入研究探索。

综上所述, 本研究首次证实S1P/S1PR1通路可介导了胆汁酸 (GCDC) 对肝实质细胞 (如HL-7702细胞) 引起的细胞毒性及致凋亡作用, 本文为临床防治胆汁淤积性肝脏损伤提供了新的实验依据。

摘要：目的:探讨S1P通路在胆盐所致HL-7702细胞毒性损伤中的作用。方法:应用甘氨鹅脱氧胆酸盐 (GCDC) 处理HL-7702细胞建立胆盐损伤肝细胞模型, 应用CCK-8试剂盒-8检测细胞存活率, ELISA方法检测细胞培养上清液S1P的表达, Western blot法测定caspase-3蛋白的表达水平。结果:应用150μmol/L GCDC处理HL-7702细胞24 h可引起毒性损伤, 10μmol/L VPC23019 (S1PR1抑制剂) 预处理30 min可对抗GCDC引起的损伤, 使细胞存活率升高, 凋亡细胞数目和cleaved caspase-3表达均减少。结论:GCDC可以引起HL-7702细胞毒性, S1P通路介导GCDC对HL-7702细胞的损伤作用。