胱氨酸蛋白酶抑制剂C

胱氨酸蛋白酶抑制剂C（精选8篇）

胱氨酸蛋白酶抑制剂C 第1篇

1 对象与方法

1.1 对象

血清标本来自本院体检健康者、儿科住院患者 (无肾脏病史及其他慢性病史) , 共1 250份, 其中年龄为4天~13岁人群标本150份, 为儿童组;14~59岁人群标本980份, 男性560份, 女性420份, 为成人组;60岁及以上人群标本120份, 为老年组。

1.2 仪器与方法

用颗粒增强散射免疫比浊法检测Cystatin C浓度, 仪器为日立公司生产的全自动生化分析仪, 试剂购自上海德波公司。抽取受检者静脉血液, 在3 h内将血清分离后低温储存, 共收集了42天, 用颗粒增强散射免疫比浊法检测Cystatin C浓度时, 同时测定定值质控血清, 在定值质控血清质量符合要求的情况下进行Cystatin C浓度检测。

1.3 统计分析

采用统计学总体均数的置信区间t分布 (95%置信区间) 方法分析结果, 每组总体均数μ的95%置信区间为为样本均数, ν为自由度 (n-1) , s为标准差, 所有统计数据均使用SPSS统计软件处理。

2 结果 (见表1、表2、表3)

结果显示, 5个月以内儿童Cystain C的正常参考值为0.80~2.30 mg/L;5个月~13岁儿童的正常参考值为0.50~1.10mg/L;14~59岁男性的正常参考值为0.52~0.87 mg/L;14~59岁女性的正常参考值为0.43~0.72 mg/L;60岁及以上老年人的正常参考值为0.65~1.73 mg/L。

3 讨论

胱氨酸蛋白酶抑制剂C在衡量小儿的肾功能方面有独到之处。由于肌酐随年龄、性别而变化, 故用其评价儿童肾功能有一定困难。而正常儿童出生后到5个月以内的Cystatin C水平明显高于5个月以上儿童, 且随着肾小球滤过功能的成熟, 1岁左右接近成人水平。故可用其反映小儿肾功能的改变。

本组结果显示, 60岁以下的成年人, 女性的Cystatin C水平比男性略低, 并且女性不受经期、避孕药、激素及酒精摄入等因素影响;60岁及以上的老年人可能由于生理因素, 血清中Cystatin C的含量偏高。据一些资料显示[4], 只有甲基去氢氧化可的松和环孢素A可升高或降低血清Cystatin C的浓度。

通过同国外人群Cystatin C正常参考值的比较, 发现兰州地区人群Cystatin C的正常参考值略低于国外人群, 这可能是人种差异造成的。

胱氨酸蛋白酶抑制剂C是一种理想的反映肾小球滤过率 (GFR) 的标志物, 能替代内生肌酐清除率来反映肾小球滤过功能[5]。本研究对兰州地区部分人群进行抽样调查, 建立不同人群Cystatin C的正常参考值, 以便能使Cystatin C的检测应用于临床。

参考文献

[1]Filser D, Ritz E.Serum cystatin C concentration as a marker of renaldysfunction in the elderly[J].Am J Kidney Dis, 2001, 37:79.

[2]Tian S, Kusano E, Ohara T, et al.Cystatin C measurement and its practi-cal use in patients with various renal diseases[J].Clin Nephrol, 1997, 48:104～108.

[3]Le Bricon T, Thervet E, Froissart M, et al.Plasma cystatin C:a bettermarker of glomerular filtration rate than creatinine in kidney transplanta-tion[J].Clinical Biol Chem, 2000, 33:232.

[4]李玉林, 徐国宾, 朱立华.Cystatin C与肌酐在评价肾小球滤过功能中的比较研究[J].中国实验诊断学杂志, 2001, 5:154～156.

胱氨酸蛋白酶抑制剂C 第2篇

【摘要】　目的 探讨2型糖尿病肾病患者同型半胱氨酸和C反应蛋白水平变化情况。方法 采用回顾性分析我院收治2型糖尿病肾病患者临床资料，观察其同型半胱氨酸和C反应蛋白水平情况。结果 糖尿病肾病组血糖、24h蛋白尿、同型半胱氨酸、CRP含量均高于对照组，同时同型半胱氨酸水平>15μmol/L患者CRP含量明显高于同型半胱氨酸水平≤15μmol/L组，P<0.05，差异均有统计学意义。结论 同型半胱氨酸和C反应蛋白升高可能是糖尿病肾病发病的危险因素，对于糖尿病肾病患者进行同型半胱氨酸和C反应蛋白水平监测具有重要的临床意义。

【关键词】　2型；糖尿病肾病；同型半胱氨酸；C反应蛋白Analysis of homocysteine and C-reactive protein levels in patients with type 2 diabetic nephropathyHuang Weiqing Zhao Qilin (Suining People's Hospital)

【Abstract】　Objective To investigate the type 2 diabetic nephropathy in patients with homocysteine and C-reactive protein levels. Methods A retrospective analysis of our hospital clinical data of patients with type 2 diabetic nephropathy, observed homocysteine and C-reactive protein levels. The results of diabetic nephropathy blood glucose, 24h proteinuria, homocysteine, CRP levels were higher homocysteine levels> 15μmol / L in patients with CRP levels significantly higher than the levels of homocysteine ≤ 15μmol / L group, P <0.05, differences were statistically significant. The conclusions of homocysteine and C-reactive protein levels may be risk factors for diabetic nephropathy, homocysteine and C-reactive protein levels in monitoring patients with diabetic nephropathy has important clinical significance.

【Key words】　type 2; diabetic nephropathy; homocysteine; C-reactive protein

近年來随着糖尿病发生率的增高，糖尿病肾病的发生率也呈现上升趋势，逐渐引起临床的广泛重视[1]。糖尿病肾病是糖尿病常见的并发症，严重影响患者的生活质量。本研究对我院收治的糖尿病肾病患者临床资料进行观察和分析，现报告如下：1　 资料与方法1.1　 临床资料 选取我院2010年1月-2011年3月收治的糖尿病肾病患者120例作为本次观察对象，其中男性68例，女性52例，年龄48岁-76岁，平均年龄62.5±12.3岁，患者均参照WHO糖尿病诊断标准，确诊为2型糖尿病患者，同时血肌酐>133μmol/L，尿素氮>7.8mmol/L，尿微量清蛋白排泄率>30mg/24h，符合糖尿病肾病诊断标准。排除标准：（1）孕妇及哺乳期妇女；（2）严重的小血管及肝脏疾病；（3）原发性肾脏病。选择我院体检者作为健康对照组100例，其男女比例、年龄分布等一般性资料经过统计学软件比较分析均无明显差异。1.2 　方法1.2.1　 仪器：ＨITACH17170全自动生化分析仪及罗氏P模块全自动生化分析仪1.2.2 　方法 抽取患者和健康体检者清晨空腹静脉血5ml，通过葡萄糖氧化酶法测定 血糖；酶法测定同型半胱氨酸；同型半胱氨酸水平以15μmol/L为界限对患者进行分组。应用免疫比浊法测定血清中C反应蛋白（CRP）含量，正常参考值为0~8mg/L。留24h尿检查尿蛋白。1.3 　观察指标1.3.1 　观察糖尿病肾病组和对照组血糖、24h蛋白尿、同型半胱氨酸、CRP含量情况；1.3.2 　观察不同同型半胱氨酸水平CRP含量情况。1.4 　统计学分析 采用统计学软件SPSS 13.0建立数据库，通过t检验分析，P<0.05，差异有统计学意义。2 　结果2.1 　糖尿病肾病组和对照组血糖、24h蛋白尿、同型半胱氨酸、CRP含量情况比较（如表1）

表1糖尿病肾病组和对照组血糖、24h蛋白尿、同型半胱氨酸、CRP含量情况比较2.2 　不同同型半胱氨酸水平CRP含量情况比较（如表2）

表2不同同型半胱氨酸水平CRP含量情况比较3 　讨论

胱氨酸蛋白酶抑制剂C 第3篇

1 对象与方法

1.1 受试对象

1.1.1 正常对照组

选择健康志愿者32名, 经过问卷调查、体格检查以及生化、尿液、B超和心电图等检查排除高血压、糖尿病、高血脂、肝病、肾病及其他系统的疾患, 年龄20~70岁) , 其中男20例、女12例。

1.1.2 慢性肾脏病患者

选择2008年5月至2010年11月来洛阳市洛阳白马医院肾内科就诊的患者67例, 男42例, 女25例, 年龄范围25~69岁。诊断标准符合美国“肾病基金会”公布的“改善肾病预后及生存质量的倡议”临床实践 (NKF/K DOQT) 指南中的定义。

1.2 仪器与试剂

1.2.1 标本

Ccr测定要留取24h的尿量, 两组研究对象均过夜禁食12h, 次晨采集空腹肘静脉血, 尽快分离血清。

1.2.2 Cystatin C测定

采用乳胶颗粒增强免疫比浊法在BN-ProSpec特种蛋白分析仪 (Dade Bering, 美国) 上测定, 使用该仪器配套试剂。

1.2.3 Urea、Scr、Ccr测定

采用森龙股份有限公司SELO8030全自动生化分析仪测定, 试剂是该仪器配套试剂。Ccr计算公式:Ccr=Ucr (μmol/24h) /Scr (μmol/mL) /1440 (min) 。

1.2.4 统计学分析

运用SPSS 10.0统计软件对数据进行分析。

2 结果

2.1 检测结果

76例慢性肾脏病患者与正常对照组血清CystatinC、肌酐清除率 (Ccr) 差异有极显著性 (P<0.01) , 而血尿素 (Urea) 、血肌酐 (Scr) 差异无显著性, 结果见表1。

3 讨论

注:与正常对照组比较, *P<0.01

目前, 用于评价肾小球滤过功能的指标有外源性和内源性指标。外源性指标包括菊粉清除率试验和放射性核素物质测定, 被称为“金标准”。但菊粉清除率检测不方便, 放射性标记物清除率检测价格昂贵。内源性标志物用血液中肌酐、尿素和Ccr, 来估计GFR。经研究血Cystatin C也可以作为衡量GFR的指标, 并且还有一定的优越性, 尤其在肾脏功能损伤早期, Ccr≥80m L/min时0m L/min的患者中, 在Ccr及血Scr都未有异常表现时, 血Cystatin C已经有65.79%的患者出现异常[1]。.

Cystatin C在体内以恒定速度产生, 是一种低相对分子质量蛋白, 可经肾小球自由滤过, 在近曲小管被重吸收并降解.肾脏是清除Cystatin C的唯一器官, 故Cystatin C是一种理想反映GFR变化的内源性标志物[2]。经过对临床的观察分析, 血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C (Cystatin C) 的检测对慢性肾脏病 (CKD) 患者的诊断有很高的价值。

参考文献

[1]颜承靖, 周万青.血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在肾脏疾病中的应用[J].临床检验杂志, 2006, 24 (5) :376-377.

胱氨酸蛋白酶抑制剂C 第4篇

1.1 研究对象

为我院2007年6月至2008年8月的慢性肾脏病 (CKD) 住院患者132例, 男72例, 女60例。年龄20岁～76岁, 平均年龄 (50.4±10.4) 岁。依据美国K/DOQI指南将患者GFR水平分为5组, 1期42例 (GFR≥90mL/min) ;2期24例 (GFR89～60mL/min) ;3期22例 (GFR59～30m L/min) ;4期28例 (GFR29～15m L/min) ;5期16例 (GFR<15m L/min) 。

1.2 方法

同时检测Ccr与CysC。素食3d后留取24h尿, 记录尿量, 同时利用日本第一药品化学株式会社提供试剂酶法测定Scr浓度, 代入Cockcroft—Gault方程计算Ccr, 根据身高、体质量计算出体表面积, 校正后得出Ccr值。用上海德波公司提供试剂盒酶免法测定CysC。

1.3 统计学处理

计数资料以 (±s) 表示, 各组指标间关系用直线相关分析, 组间比较用t检验。用SPSS 13.0软件进行数据处理。

2 结果

2.1 在本研究132例慢性肾脏病患者中

1期患者血清Cys C浓度明显高于本院参考范围 (0.20～1.40mg/L) , 而BUN、Scr水平均为正常, Ccr则显示略有下降。随着肾功能的下降, Ccr、BUN和Scr才表现出明显的异常变化 (表1) 。

2.2 相关分析

与GFR相关分析可以看出, 各组间CysC均比Scr具有更高的相关性 (P<0.01) (表2) 。

3 讨论

慢性肾脏病是一个日益引起公众关注的健康问题, 而GFR是反应肾功能的受损最重要的指标。早期发现GFR的下降, 对于及早发现并去除引起肾功能异常的因素, 挽救和恢复受损的肾功能, 延缓肾功能损害的进展速度都具有极其重要的参考价值。目前临床常用测BUN、Scr等来判断有无肾滤过功能受损, 其存在敏感性差的缺点, 当GFR降至正常50%时, BUN、Scr仍在正常范围;GFR降至正常50%以下时, BUN、Scr始升高, 故BUN、Scr并不能很好地反映早期GFR下降情况。Ccr也受肾小管能分泌少量肌酐的干扰, 尿液收集时间记录不准确, 部分尿液丢失, 都会影响其测定值的准确性, 也受年龄和性别影响, 导致个体差异。

CysC为人体内各种有核细胞均可表达, 属于碱性非糖基化蛋白, 分子量为13.5ku, 其生成速率基本恒定, 不受炎症因素、胆红素、溶血、三酰甘油等影响, 与性别、年龄、肌肉量无关。其作用是抑制半胱氨酸蛋白酶的活性, 参与细胞内、外蛋白质水解的调控。血中CysC能自由地被肾小球滤过, 在近端肾小管上皮细胞被分解代谢, 不被肾小管重吸收和分泌, 故可以客观反映GFR。

本研究中CysC浓度与BUN、Scr浓度呈正相关, 与Ccr呈负相关, 且血清CysC与GFR相关性高于Scr与GFR相关性, 表明CysC与肾小球滤过功能密切相关。同时还发现当GFR稍下降时, 可能Scr、BUN还没有变化, 而CysC已升高, 表明CysC敏感度及准确度可能高于Scr及BUN。

总之, CysC是一种比Scr、BUN更能反映早期肾小球滤过功能受损的理想的内源性标志物, 检测CysC比Ccr获取标本方便, 操作简单。

胱氨酸蛋白酶抑制剂C 第5篇

1 资料与方法

1.1 一般资料:

对照组114例为体检合格者, 男74例, 女40例, 年龄25~75岁, 平均年龄 (48.6±11.8) 岁。156例糖尿病肾病患者均选自本院肾病科2013年1月至2015年10月住院患者, 男76例, 女80例, 年龄26~80岁, 平均年龄 (56.8±110.9) 岁。患者纳入标准为:符合2009年WHO糖尿病诊断标准的糖尿病住院患者;出现糖尿病慢性并发症DN排除:原发性高血压疾病史;非糖尿病引起的心功能不全;有尿路感染患者;肝脏功能不正常患者。

1.2 测定方法及仪器:

所有患者和健康体检者 (对照组) 同时检测Scr、Cystatin C、Ccr、UAER。24 h尿液收集在训练有素的护理人员严格指导下操作。清晨开始弃去第1次尿, 24 h完成收集后, 空腹采取血样。Scr和尿肌酐 (Ucr) 检测以苦味酸法用OLYMPUS AU640生化仪测定, 同时测定尿白蛋白, 并以尿白蛋白排泄率结果分为三组:正常蛋白尿组 (UAER<20μg/min) (1组) 、微量蛋白尿组 (UAER 20~199μg/min) (2组) 、大量蛋白尿组 (UAER≥200μg/min) (3组) 。Ccr按体表面积标准化[换算公式:Ccr=尿肌酐浓度 (μg/min) ×尿流量 (m L/min) ×1.73 m2/血清肌酐浓度 (μg/min) ×1440×体表面积 (m2) ]。血清Cystatin C采用微粒增强投射免疫分析法, 试剂盒由丹麦Dako Cytomation提供, 所有试验都设复管。尿白蛋白测定采用德国BN Prostec特定蛋白分析仪, 免疫速率比浊法测定, 试剂为原产微量白蛋白试剂盒。

1.3 统计学处理:

统计分析用SPSS11.0软件处理, 各组数据均采用 (±s) 表示, 统计分析采用q检验和直线相关分析, P<0.05差异具有统计学意义。

2 结果

第1组患者所测定的Ccr、Scr、Cystatin C值与对照组差异均无统计学意义 (P>0.05) , 第1组DM患者的Scr值与第2组Scr值差异均无统计学意义 (P>0.05) 。而其余各组两两比较均存在差异 (P<0.05) 。Scr、Cystatin C与Ccr都存在负相关性, 并且Cystatin C与Ccr的相关性较Scr与Ccr的相关性好, 可见Cystatin C更能反应肾脏的受损程度。

3 讨论

20%~40%的糖尿病 (DM) 患者最终会发展成糖尿病肾病, 是慢性肾功能不全的常见原因之一[3,4]。通过GFR测定虽然可早期发现DM患者的肾脏病变, 但不适合临床常规监测, 临床替代GFR检测的常规指标是内生肌酐清除率Ccr, 但该指标的测定需要患者收集24 h尿量, 这给患者带来极大的不便, 而且不易准确量出尿的体积。DN较早的临床表现是微量白蛋白尿, 但昼夜排泄不同, 运动、尿路感染、心功不全及高血压等都可以干扰其结果。Scr也是临床常规使用指标, 但其在肾功能损害初期往往变化不大, 用速率法测定虽然可以去除假肌酐的影响, 但采集血标本前3 d需禁食肉类食糖尿病肾病物, 避免剧烈活动或运动[5]。血Cystatin C测定不受性别、饮食、炎症、感染、血脂、类风湿因子、溶血、血糖、酮体和肝脏疾病等的影响, 而且1岁以后基本符合成人的参考范围, 而且不需要进行身高、体质量、年龄和性别的换算;Cystatin C几乎完全从肾小球滤过, 在肾小管没有严重受损情况下, Cystatin C是不会直接从血液中进入肾小管, 这说明Cystatin C是评价GFR的可靠的内源性标志物。同时, Cystatin C是一个相当稳定的指标。室温下Cystatin C至少能够稳定7 d, -20℃可以放置1~2个月。而且可以耐受温度在±7℃变化范围内波动;抽血后全血可以放置24 h, 即使不立即分离血清, 也不会带来不利的影响[6]。本院测定了DN患者血Cystatin C、Scr、内生Ccr, Scr在DN早期增加不明显, 因为第1组和第2组没有差异, 而Cystatin C在各组之间都存在差异, 说明该指标较敏感一些。分析血Cystatin C与Ccr的相关性, 能反映患者Ccr的水平, 并与Scr进行比较, 二者与Ccr相关性存在差异, Cystatin C与Ccr的相关性好, 从而为临床测定患者Cystatin C以早期发现DN提供依据。Cystatin C是临床上评定糖尿病肾病的更敏感的指标。

摘要：目的 研究分析血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C (Cystatin C) 在糖尿病肾病中的应用价值与临床意义。方法 将156例糖尿病患者按白蛋白排泄率 (UAER) 分为3组, 正常蛋白尿组 (1组) 42例, 微量蛋白尿组 (2组) 60例和大量蛋白尿组 (3组) 54例, 设立对照组 (健康体检合格者) 。测定各组Cystatin C、血清肌酐 (Scr) 、肌酐清除率 (Ccr) 。进而对各指标使用SPSS11.0统计软件进行比较分析和相关性分析。结果 在糖尿病患者中所测的Cystatin C平均值高于对照组 (P<0.05) , 而血清肌酐在1组和2组中所测的平均值并无明显差别, 且Cystatin C与Ccr的相关性较Scr与Ccr的相关性好。结论 血Cystatin C对2型糖尿病肾病的早期诊断较血清肌酐更敏感。

关键词：半胱氨酸蛋白酶抑制剂C,糖尿病肾病,肌酐清除率,检验分析

参考文献

[1]龙三太, 江华, 苏宁.糖尿病肾病患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的检测分析与检验学研究[J].中华医学检验杂志, 2015, 38 (3) :161-163.

[2]周新.检验医学指南[M].武汉:湖北科学技术出版社, 2008:263-269.

[3]满江红, 梦媛, 文杰.糖尿病肾病患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的检测对照分析与临床检验学研究[J].国际检测医学杂志, 2015, 36:99-100.

[4]何晓兰.糖尿病终末期肾病血液透析患者临床分析[J].河北医药, 2010, 32 (19) :2690-2691.

[5]齐志宏.胱氨酸蛋白酶抑制剂C的生物化学特性及其临床意义[J].北京医学, 2015, 37 (2) :126-127.

胱氨酸蛋白酶抑制剂C 第6篇

1 资料与方法

1.1 临床资料:选取2014年1月至2014年12月我院收治的159例原发性高血压疑似合并早期肾损伤患者为研究对象, 其中男91例, 女68例, 最大年龄89岁, 最小年龄35岁, 平均 (58.4±5.1) 岁, 高血压病程平均 (3.5±1.1) 年。本次所有研究对象均进行99mTc-DTPA清除率诊断, 根据99mTc-DTPA清除率诊断标准[1] (99mTc-DTPA清除率每分钟<68 m L, 可视为肾功能损伤) 将159例原发性高血压患者分为肾损伤组 (63例) 与对照组 (96例) 。两组患者近1周内均未使用过任何肾毒性药物及糖皮质激素药物;排除妊娠期、哺乳期患者。两组患者年龄、性别、病程等方面比较, 无明显差异 (P>0.05) , 具有可比性。

1 . 2 方法:采用SYNCHONLX20 全自动生化分析仪 ( Beckman -Coulter公司生产) 及北京利德曼生化技术公司提供的试剂盒进行Cys C检测。其中试剂盒线性范围在0.2~8.0 mg/L内, 报告范围内0.02~64.00 mg/L。本次所有研究对象均在治疗前进行Cys C检测, 抽取患者全血4.0 m L置于干燥管内进行送检, 以每分钟3000 r速度离心10 min, 随后根据免疫比浊法对血清Cys C水平进行检测, 每天使用浓度不同的2个标本测量2次, 且2次间隔时间需超过2 h, 共测量20 d, 随后对患者血清Cys C测定结果进行评价。

1.3 统计学分析:本次数据选用SPSS19.0统计软件处理, 其中计量资料用 (±s) 表示, 用t检验;计数资料用 (%) 表示, 用χ2检验, P<0.05为差异, 表示有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者血清Cys C检测结果比较:肾损伤组患者血清Cys C水平为 (5.7±1.1) mg/L, 对照组患者血清Cys C水平为 (0.8±0.2) mg/L, 肾损伤组患者血清Cys C水平明显高于对照组 (P<0.05) , 组间差异显著, 有统计学意义。

2.2 两组患者血清Cys C检测结果分析:肾损伤组患者血清Cys C>1.26 mg/L发生率明显高于对照组 (P<0.05) , 有统计学意义, 见表1。

注:与对照组比较, *P<0.05, 表示差异有统计学意义

3 讨论

肾功能损伤是原发性高血压患者常见并发症之一, 具有隐匿性的特点, 因此早期诊断在改善预后及减少死亡病例中具有重要临床价值。以往临床常使用血清肌酐检测来对患者肾功能损伤进行诊断, 但敏感性一般;另外同位素标志物清除率诊断结果虽然较为理想, 但诊断价格昂贵, 限制了其在临床上的应用范围。

血清Cys C是现阶段对早期肾功能损害的重要评价指标, 敏感性较高。血清Cys C是反映肾小球滤过率的一种生物学标志物, 属于分泌性糖化蛋白质, 主要存在于人体有核细胞中, 生长速度较为稳定, 能够自由经肾小球及近端肾小管上皮细胞代谢及吸收, 且浓度不受肌肉量、炎症及肾小管分泌等多种因素影响, 可准确反映人体肾小球滤过率[2,3,4]。通过本次研究可以看出, 63例肾损伤患者中, 血清Cys C平均水平为 (5.7±1.1) mg/L, 96例未出现肾损伤患者中血清Cys C平均水平为 (0.8±0.2) mg/L, 肾损伤患者血清Cys C水平明显高于未损伤患者 (P<0.05) , 有统计学意义;且原发性高血压早期肾功能损伤血清Cys C水平>1.26 mg/L发生率为85.7%, 明显高于未损伤患者 (10.4%) , 有统计学意义。由此可知, 血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C检测在原发性高血压诊断中价值较高, 具有诊断准确率高、费用低、快速、操作简便等优点。

参考文献

[1]陈肇杰, 陈晓象.血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C检测对肿瘤化疗患者早期肾损伤的诊断意义[J].临床和实验医学杂志, 2013, 12 (11) :843.

[2]董芳, 李建国, 胡波.血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在重症患者急性肾损伤诊断中的临床价值[J].中华临床医师杂志 (电子版) , 2010, 4 (9) :1673-1675.

[3]许国新, 堵亚娟.血清Cys C对高血压引起早期肾损伤的诊断意义[J].中外医学研究, 2012, 10 (36) :54-55.

胱氨酸蛋白酶抑制剂C 第7篇

1 资料与方法

1.1 一般资料

高血压组185例患者中,男103例,女82例;年龄30～75岁,平均(48±18)岁;病程5～28年,均为我院心血管内科就诊患者,符合WHO/ISH1999原发性高血压诊断标准。2型糖尿病组193例患者中,男103例,女90例;年龄33～78岁,平均(51±13)岁;病程5～30年,均为我院内分泌科就诊患者,符合美国糖尿病学会(ADA)2002年2型糖尿病诊断标准。对照组30例均为我院体检中心健康体检者,男16例,女14例,年龄25～72岁。均排除继发性高血压、肾疾病、自身免疫病、1型糖尿病及其他心脑血管疾病。三组年龄、性别比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 方法

高血压组、2型糖尿病组及对照组患者均空腹14 h,清晨采集静脉血4 mL,离心后取血清,采用Beckman-Coulter全自动生化分析仪检测血清Cys C、RBP、BUN、SCr,试剂、质控品、定标品均为公司原装配套产品;同时取晨尿3 mL采用罗氏公司U411尿液分析仪作尿常规蛋白定性分析,试剂、定标品均为公司原装配套产品。

1.3 统计学方法

采用SPSS 10.0统计软件进行分析,计量资料数据以均数±标准差(x±s)表示,多组间比较采用方差分析,组间两两比较采用q检验;计数资料比较采用χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清Cys C、RBP、BUN、SCr检测结果比较

高血压组、2型糖尿病组患者血清BUN、SCr与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);血清Cys C、RBP与对照组比较,差异有高度统计学意义(P<0.01);高血压组与2型糖尿病组患者血清BUN、SCr、Cys C、RBP比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

注:与对照组比较,*P<0.01

2.2 患者尿蛋白定性血清Cys C、RBP、BUN、SCr的阳性率比较

原发性高血压、2型糖尿病患者尿常规蛋白定性、血清BUN、SCr的阳性率较低,血清Cys C、RBP阳性率较高,联合检测阳性率更高。见表2。

注:与尿蛋白定性比较,*P<0.01;与BUN比较,#P<0.01;与SCr比较,@P<0.01;与Cys C+RBP比较,△P<0.01

3 讨论

原发性高血压及2型糖尿病均是严重威胁人类健康的慢性疾病,原发性高血压病理过程主要表现为血管重构和动脉粥样硬化,2型糖尿病主要引起微血管病变,肾脏损伤是两种疾病常见的并发症。临床准确的测定及客观估计肾功能对早期肾损害的诊断有重要价值。近年来研究表明血清Cys C和RBP与肾脏GFR有良好的相关性。

Cys C是近年发现的血浆内源性小分子微量蛋白,由122个氨基酸组成,属碱性非糖基化蛋白质,相对分子质量为133 359,等电点(PI)为9.3,Cys C由人体内有核细胞产生,生产较稳定,不受个体、肌肉量、性别、年龄、肾前因素和慢性炎症的影响。由于其相对分子质量低,能自由滤过肾小球,在近端肾小管上皮细胞被分解代谢,不被肾小管重吸收和分泌,其血液中的浓度主要由GFR决定,是理想反映GFR的内源性标志物。肾脏受损情况下,GFR减低,从而导致血中Cys C水平显著升高[2]。

RBP是肝脏合成的视黄醇(维生素A)转运蛋白,广泛分布于人体血清、脑脊液、尿液[6]。人体内RBP 90%与视黄醇结合为holo-RBP,未结合的游离RBP相对分子量蛋白较低,可自由通过肾小球滤过膜[3]。85%holo-RBP与TTR结合,形成大分子物质,不被肾小球滤过,15%部分经肾小球滤过。因此,当肾脏滤过功能受损害时,血中RBP水平会明显增高[4]。

临床较常以尿蛋白定性或血清BUN、SCr的变化来了解肾脏早期损伤情况,由于尿蛋白定性灵敏度较低,尿中检出蛋白时肾脏已有显著受损;血清BUN、SCr个体差异较大,受年龄、性别、饮食等多重因素影响,血清BUN、SCr发生变化常提示肾脏损伤较严重,本研究中BUN、SCr升高的高血压及2型糖尿病患者GFR已明显降低,因此,不能以尿蛋白定性、血清BUN、SCr作为早期肾损伤的诊断指标。本实验表明:高血压及2型糖尿病患者血清BUN、SCr浓度与对照组无显著差异时,血清Cys C和RBP的含量已显著增高,表明BUN和SCr正常的高血压及2型糖尿病患者,其肾小球功能在已开始受损,结果与国外相关研究基本一致[5,6]。从表2可以看出,高血压及2型糖尿病患者尿蛋白定性、BUN和SCr检出率仅为8.20%、7.14%、9.79%;而血清Cys C和RBP的检出率分别为37.83%、33.60%,明显高于前者。血清Cys C和RBP联合应用的测出率高达52.38%。

综上所述,血清Cys C和RBP的联合检测对临床早期诊断、早期治疗原发性高血压肾损伤具有较大的实用价值。

摘要：目的 探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C,Cys C)和视黄醇结合蛋白(retinol binding protein,RBP)联合检测对诊断原发性高血压、2型糖尿病患者早期肾损害的临床价值。方法 采用Beckman-Coulter全自动生化仪分别检测185例原发性高血压患者、193例2型糖尿病患者及30例健康对照组血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、视黄醇结合蛋白、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)的含量。结果 高血压及2型糖尿病患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、视黄醇结合蛋白水平均显著高于对照组(P<0.01),血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、视黄醇结合蛋白可作为诊断患者早期肾损害的敏感指标。

关键词：血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C,血清视黄醇结合蛋白,肾损害

参考文献

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[2]Taglieri N,Koening W,Kaski JC.Cystatin C and cardiovascular risk[J].Clin Chem,2009,55(11):1932-1943.

[3]陈小莉,蔡东联.视黄醇结合蛋白研究与进展[J].肠外与肠内营养,2000,7(1):18-20.

[4]候巍,杨述红,宣萍.视黄醇结合蛋白测定的临床意义[J].中国实验诊断,2002,6(5):348-349.

[5]Chaudhary K,Phadke G,Nistala R,et al.The emerging role of biomark-ers in diabetic and hypertensive chronic kidney disease[J].Curr DiabRep,2010,10(1):37-42.

胱氨酸蛋白酶抑制剂C 第8篇

近年来, 人们发现胶质细胞尤其是小胶质细胞和星形胶质细胞的活化引起的神经炎症在疼痛中起着极其重要的作用。MMP-9和-2属于明胶酶, 有研究发现它们能够由胶质细胞合成并释放到胞外, 通过促进炎症因子pro-IL-1β向成熟体IL-1β转化[2]诱导IL-1β的激活, 并作用于神经元和胶质细胞上的相应受体激活下游信号通路, 引起疼痛;MMP-9/2也能通过剪切细胞表面相关蛋白, 促进神经元上N-甲基-D-天冬氨酸受体 (N-methyl-D-aspartate receptor, NMDAR) 、α氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑酸受体 (α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid receptor, AMPAR) 等谷氨酸受体向膜上转运, 进而增加神经元兴奋性[3], 导致疼痛。因此MMP-9/2已成为近来发现的治疗神经病理性疼痛的新靶点。然而至今还没有一个安全有效的MMP-9/2抑制剂能够应用于临床。因此, 迫切需要寻找一种已经应用于临床, 同时能有效的抑制MMP-9/2活性的药物, 来治疗神经病理性疼痛。

MMP-9/2中有一个关键的结构——半胱氨酸开关, 半胱氨酸残基的氧化是MMP激活的关键[4]。L-半胱氨酸为生物体内合成的含硫非必需氨基酸, 在临床上作为重金属中毒的解毒剂, 并用于治疗由于使用抗癌药物和放射性药物所引起的白血球减少症。本研究拟验证能否使用外源性L-半胱氨酸, 作为一个半胱氨酸开关的类似物, 保护MMP-9和MMP-2中半胱氨酸残基, 抑制MMP-9/2的激活, 从而缓解神经病理性疼痛。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 药物L-半胱氨酸 (生兴生物技术有限公司) 。

1.2 动物

健康成年雄性SD大鼠, 体重为180~220 g, 由南通大学实验动物中心提供, 实验动物使用许可证号:SCXK (苏) 2014-0001。

1.3 仪器

足底测试仪 (意大利UGO BASILE公司) ;电泳仪 (美国Bio-Rad公司) ;化学发光仪 (Chemi Doc XRS+, 美国Bio-Rad公司) 。

1.4 方法

1.4.1 建立CCI诱导的神经病理性疼痛模型

大鼠坐骨神经慢性缩窄性损伤模型 (chronic constriction injury, CCI) :大鼠经水合氯醛 (300 mg/kg, 腹腔注射) 麻醉后, 分离坐骨神经并宽松结扎, 缝合肌肉层和表皮层。使用足底测试仪检测大鼠机械痛阈, 以术后14 d大鼠机械痛阈下降>40%为造模成功。假手术组以水合氯醛麻醉手术但不结扎神经。

1.4.2 观测CCI诱导的神经损伤大鼠机械学痛阈采用足底测试仪观测大鼠的机械痛阈, 具体方法如下:在安静、温度20~25℃的环境中, 将大鼠置于透明的金属网格笼中, 测定前使之适应20 min, 探觅行为停止后开始测量。以足底测试仪的平钝针尖刺激大鼠足底, 由无压力逐渐缓慢加压至动物缩足, 每次测量间隔3 min, 引起大鼠足爪抬起的最小压力为其机械性刺激缩足反射阈值。每只大鼠至少平行测量4次取平均阈值, 并计算SEM值。

1.4.3 L-半胱氨酸对CCI激活的MMP-9和MMP-2的影响

采用明胶酶谱法检测MMP-9/2的活力, 具体操作如下:大鼠使用水合氯醛麻醉处死后取脊髓 (L1~6) , 在1%NP40裂解液中剪碎匀浆, 提取上清, 经过明胶琼脂糖凝胶4B提纯, 加入上样缓冲液, 涡旋混匀, 在分离胶中加入1%的明胶, 进行聚丙烯酰胺凝胶电泳, 并对分离胶进行洗脱、孵育, 用1%考马斯亮蓝染色, 经脱色后, 使用化学发光仪采集图像。

1.5 统计学方法

采用SPSS12.0统计学软件对研究数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差 (±s) 表示, 采用t检验;计数资料以率 (%) 表示, 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 L-半胱氨酸对CCI诱导的神经损伤大鼠机械学痛阈的影响

实验动物分为五组, CCI模型组、CCI模型加半胱氨酸给药组 (50、100、200 mg/kg, 灌胃给药) 以及对照组 (给予等体积生理盐水) 。实验结果表明, 在大鼠CCI造模后第14天, 与基础值相比, 大鼠的机械痛阈由 (13.54±0.40) g降至 (5.13±1.30) g, 表示模型成功建立。L-半胱氨酸能剂量依赖性的缓解CCI引起的痛觉异常, 50、100、200 mg/kg给药组灌胃给药2 h后CCI引起的神经痛模型大鼠的机械阈值与对照组相比, 差异具有统计学意义 (P<0.05) , 分别使CCI引起的神经痛模型大鼠的机械阈值上升到对照组的30.9%, 44.7%和68.8%。见图1。

注:与对照组相比, aP<0.05, 与对照组相比, bP<0.01;Sham=对照组, CCI=CCI模型组, NS=生理盐水。L-半胱氨酸为灌胃给药

2.2 L-半胱氨酸对CCI激活的MMP-9和MMP-2的影响

实验结果显示L-半胱氨酸能在体内显著抑制CCI诱导的MMP-9/2的激活, 50 mg/kg的剂量抑制MMP-9和MMP-2的效率分别达到44.3%和25.5%。见图2A-2B。同时, L-半胱氨酸在体外也能够显著地直接抑制MMP-9/2的活力, 10-5mol/L的L-半胱氨酸对MMP-9的抑制效率达到79.7%, 对MMP-2的抑制效率达到75.6%。见图2C-2D。

注:图2A-2B为L-半胱氨酸体内给药 (50、100、200 mg/kg, 灌胃给药) 对CCI造模后MMP-9和MMP-2活力的影响, 与对照组相比aP<0.01, 与模型组相比;bP<0.01;2C-2D为L-半胱氨酸体外给药 (10-7, 10-6, 10-5mol/L) 对CCI造模大鼠脊髓MMP-9和MMP-2活力影响, 与对照组相比, cP<0.01, 与模型组相比, dP<0.01)

3 讨论

明胶酶MMP-9和MMP-2, 在神经病理性疼痛中有着至关重要的作用。MMP-9/2一方面能够通过促进pro-IL-1β向成熟体IL-1β转化[2], 活化的IL-1β通过作用于神经元上的IL-1受体激活下游信号通路, 使神经元上N-甲基-D-天冬氨酸受体 (NMDAR) 的激活, 使钙离子内流增加, 增强突触信号传导, 进而引发疼痛[5]。另一方面, MMP-9/2还能够直接通过对NMDA受体功能性亚基NR-1以及丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen-activated protein kinases, MAPK) 家族蛋白细胞外信号调节激酶 (extracellular-signal-regulated kinases, ERK) 的磷酸化直接增强神经元兴奋性, 从而引起中枢敏化维持疼痛[6]。

半胱氨酸开关是MMP-9/2激活过程中一个关键的结构, 它由MMP-9/2肽链中的半胱氨酸残基, 与锌离子活性位点组成。一般情况下, 两者结合, 覆盖活性位点, MMP-9/2不能发挥酶活性。当半胱氨酸残基被氧化, 与酶活性位点分离, MMP-9/2则被激活, 发挥酶活性[7]。而L-半胱氨酸, 作为体内一种还原性氨基酸, 又是MMP-9/2中半胱氨酸残基的类似物, 应当能够保护其半胱氨酸残基不被氧化, 从而抑制它的激活。实验结果已证明, L-半胱氨酸能够在体外直接抑制CCI诱导的MMP-9/2激活。

本研究还发现, L-半胱氨酸对于CCI诱导的机械学痛觉异常有显著的缓解作用, 同时L-半胱氨酸体内给药也能够显著抑制CCI造模所引起的MMP-9/2的激活, 因此提示L-半胱氨酸可能通过抑制MMP-9/2活力来缓解疼痛。

已有报道发现, 在阿尔兹海默症模型中, 脑中MMP-9/2的表达增加, 促进淀粉样-β肽降解, 从而加速阿尔兹海默症的进展[8], 外源性给予L-半胱氨酸的衍生物对阿尔兹海默症也有一定缓解作用[9]。同样, 镉中毒也能诱导MMP-9/2的高表达[10], 给予L-半胱氨酸可以有效保护神经细胞[11]。而有研究表明神经病理性疼痛时脊髓和DRG中MMP-9/2表达和活力均显著上调[2], 此次实验结果证明L-半胱氨酸可以抑制MMP-9/2活力, 且能够有效的缓解疼痛症状, 与上述研究相符合。