早期釉质龋范文（精选3篇）
早期釉质龋 第1篇
1 材料和方法
1.1 要实验试剂和仪器
乳酸 (天津市纵横兴工贸有限公司化工试剂分公司) ;羧甲基纤维素钠800-1200 (国药集团化学试剂有限公司) ;氢氧化钾 (福建医科大学药学系药剂室赠送) ;扫描电镜 (XL- 30ESEM 环境扫描电镜, 荷兰) ;万能实验机 (Instron- 1342型, 日本) ;5 号尖探针及CPI探针 (上海医疗器械有限公司手术器械厂) ; 测力器 (测力范围0～4.9 N, 长沙市天天齿科器材有限公司) ;体视显微镜 (×20) ( XTB- B型, 桂光牌) ;电子天平 (Sartorius B210型, Sartorius生产) ;磁力加热搅拌器 (国光79-2型, 常州) ;pH精密试纸 (测试范围3.8～5.4, 杭州富阳特种纸业有限公司) 。
1.2 实验牙的制备
购买新鲜的小黄牛 (年龄相近) 前牙数颗[2,3,4], 经肉眼观察唇面完整无损后, 再经体视显微镜 (×20) 观察无缺损、无裂纹、无白斑、无色素沉着者作为实验对象, 共22 颗。除去所有离体牛牙的牙石、菌斑, 刮尽软组织, 截去大部分牙根、拔净牙髓, 剩余牙根处打孔后以塑料线穿过, 冲洗吹干牛牙, 封闭穿线孔, 自然干燥牛牙。在每颗牛牙唇面中部贴上预先准备好的6 mm×8 mm大小的纸片, 其余牙面用无色指甲油封闭 (指甲油涂2 层) , 让指甲油充分自然风干4 h以上后揭去牙面上的纸片, 纸片原来所覆盖的牙面即是开窗区, 大小为6 mm×8 mm。
1.3 构建化学人工早期龋模型
参考口腔实验病理学, 配制脱矿凝胶100 ml (含0.1 mol/L乳酸, 5%羧甲基纤维素钠, pH值由饱和KOH调至4.0) 。将牛牙每4 个1 组, 悬挂于含100 ml脱矿凝胶的烧杯中 (保证每颗牛牙有25 ml的脱矿凝胶充分浸泡) , 密封烧杯, 置入37 ℃的恒温箱中孵育。每天更换脱矿凝胶1 次。3 d后取出牙体, 以双蒸水充分冲洗后置入盛有双蒸水的烧杯保存。
1.4 比较两种探针探诊牛牙人工早期龋对釉质的影响
1.4.1 制作简易测力器 全新的5 号尖探针和CPI探针各一支[5], 将其各自的工作区截断后分别与2 支齿科专用测力器一端采用焊接的方式制成2 支简易的可测垂直向压力的探针 (图 1、2) 。
1.4.2 制作牛牙石膏模型 将已制作完开窗区的牛牙置入新鲜调拌好的硬石膏, 除了唇面外其余牙面都要充分包埋于石膏中, 在石膏未结固之前调整开窗区位置, 尽量使之与水平面平行。修整石膏外形后待其自然干燥。每个牛牙做一个石膏模型, 共22 个。
1.4.3 定性实验 将任选的2 个石膏模型暴露牙体唇面的一面朝上放在万能实验机的承压平台上。实验机夹头夹紧测力器的非工作端, 通过机器的加力, 工作端的CPI探针以每0.09 mm/s的速度垂直向去探诊牛牙开窗区的左侧部分, 力度从0→3.43 N, 当力量达到3.43 N时停止探诊, 探针在实验机的辅助下逐渐退出牙体, 待探针尖端完全退出后, 调整石膏模型位置重新探诊第2 个点, 从牙颈至切端的方向在开窗区左侧部分共探6 个点。CPI探针探诊结束后, 卸下CPI探针换上5 号尖探针, 再以相同的方式去探开窗区的右侧部分。1 颗牙共探12 个点, 左右2 个点尽量在同一水平线上。牛牙经探诊后拆除石膏, 将牛牙固定在铜样品台上, 采用PHILIP XL- 30ESEM扫描电镜, 在25 kV加速电压下观察早期龋表层结构特点及2 个探孔的情况, 并取点摄影。
1.4.4 定量实验 另选20 个模型用作定量实验, 每个牛牙开窗区按定性试验中的探诊方法进行探诊, 通过实验机可测出2 组数值, 每组6 个 (每个数值代表在相同力度下2 种探针在牛牙人工早期龋脱矿釉质内的位移深度) 。20 个模型共240 个数值, 即CPI探针120 个, 5 号探针120 个。
1.4.5 2 种探针比较 对2 种探针探诊牛牙人工早期龋釉质产生的应变能进行比较, 即比较2种探针在探诊牛牙人工早期龋时对釉质造成破坏的体积大小 (原理详见讨论部分) 。具体计算方法如下:CPI探针探诊造成的釉质破坏体积大小按以下计算公式计算:
①当深度h<半径0.25 mm时, 体积 (V) 为:
undefined。其中, R为CPI顶端小球的半径 (0.25 mm) , h为深度。
②当深度h≥半径0.25 mm时, 体积 (V) 为:
undefined。其中, R为CPI顶端小球的半径 (0.25 mm) , h为深度。
5 号探针探诊造成的釉质破坏体积大小按以下计算公式计算:
5 号探针尖端锥度为20°, 直径为0.2 mm。体积 (V) 为:undefined。其中, h为深度, R1为5 号探针尖端的半径 (0.1 mm) , R2为5 号探针探得一定深度h时, 探针截面的半径: R2=0.1+h·tg10°。
2 结果
2.1 定性实验扫描电镜观察
结果见图 3～6。
2.2 定量实验结果
通过应变能的计算比较2 种探针探诊牛牙人工早期龋时对釉质的破坏体积大小。
图 7、8是描述2 种探针探诊人工早期龋时对釉质的破坏体积大小的直方图。表 1为2 种探针探诊牛牙人工早期龋对釉质造成的破坏的体积大小比较。
3 讨论
应变能[6]是指伴随着弹性变形的增减而改变的能量, 包括弹性变形能和塑性变形能。当实验机作用在探针上的外力消失时, 外力产生的能量通过探针转换到了脱矿的釉质上, 一部分转换成了弹性应变能, 一部分转换成了塑性变形能。因为釉质产生的弹性变形十分微小, 可忽略不计, 所以转换到釉质上的应变能几乎等于塑性变形能, 造成了釉质的塑性变形, 而其塑性变形能的大小几乎等于被破坏的釉质体积的大小。因此通过对2 种探针探诊早期龋所产生的应变能 (釉质破坏体积大小) 的分析就可以对2 种探针探诊早期龋对釉质的破坏做比较。
以上横轴代表釉质被破坏体积的大小, 纵轴代表频数。数据为非正态分布。
对原始数据进行非参数检验 (Mann-WhitneyU检验) 后得出:CPI探针的体积破坏大于5号探针。
通过对被破坏体积大小的计算, 二者对釉质造成的塑性变形能的大小在统计学上是有差异的:CPI探针大于5 号尖探针。但由于2 个数值是在同一等级范围内 (即CPI探针产生的塑性变形能大小<5 号探针产生的塑性变形能大小×10 倍) , 所以2 种探针对牛牙人工早期龋釉质破坏大小的差异无实际意义。加之, 福建省在全国第三次口腔健康流行病学调查中采用抽样方案的检查方法, 进行了12 岁年龄组龋病流行病学调查, 调查结果显示:5 号尖探针对窝沟龋的检出率高于CPI探针23.23%, 有统计学意义。说明使用CPI探针进行检查会导致一部分龋齿不能被检查, 而5 号尖探针在龋齿检出率方面具有优势。本着早发现、早治疗的原则, 在相同破坏力的情况下, 我们认为5 号尖探针仍是一种有效的龋病检查器械。
通常制作人牙早期龋模型需要7 d时间, 但有学者研究发现:酸对牛牙釉质的脱矿力明显大于对人牙釉质的脱矿力, 且牛牙的脱矿速度是人牙的2 倍。在预实验中曾发现:酸蚀时间在3 d以内的牛牙人工早期龋模型, 2 种探针探诊时在釉质内的下降深度没有差别, 提示可能只有在某个酸蚀时间段形成的牛牙人工早期龋模型, 2 种探针探诊时对其釉质结构的破坏才有差别。故此次实验将3 d作为制作牛牙人工早期龋模型的脱矿时间。至于相同外力情况下, 脱矿时间与釉质结构的破坏程度的关系, 可在今后深入研究。
根据文献报道:临床口腔医生用探针进行龋病检查时使用的平均力度为 (3.332±0.0588) N[7]。由于实验所使用的测力器的测力范围是0～4.9 N, 每0.245 N为一刻度, 故以3.43 N的力作为2 种探针的探诊力度。由于探诊力度可能与检查者手的位置、检查者所受的培训及其的经验、年龄、身心疲倦程度, 肌肉力量、身体体重等因素有关, 所以为避免人为因素的影响, 实验采用了特殊仪器——万能实验机辅助探针进行探诊。这种仪器操作简便, 工作过程稳定, 值得信赖。
4 结论
5 号尖探针探诊牛牙人工早期龋对釉质的破坏并没有明显大于CPI探针, 且有研究表明: 5 号尖探针的龋检出率高于CPI探针的龋检出率[8]。故建议龋齿的流行病学调查和临床检查仍可以使用5 号尖探针, 但无论用哪种探针进行检查, 都应避免采用较重的力去探诊, 减少对釉质结构的潜在影响。
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儿童早期龋的预防和治疗 第2篇
培养良好的口腔卫生习惯。孩子在长出第一颗乳牙以后，就应该用纱布帮其清洁牙齿。在长大的过程中，可以选择专门为各个年龄段的孩子设计的牙刷和牙膏。每天必须刷牙两次，每次的时间为三分钟左右。要采用正确的刷牙方法，每个牙面都要刷干净。家长可以帮助孩子刷牙，或和孩子一起刷牙，不但起到示范作用，还能使孩子从小养成认真刷牙的好习惯。
患有龋病的母亲，应进行局部抗菌治疗。此举可抑止变形链球菌的数量，预防致龋菌在孩子口腔中的早期定植。
早期釉质龋 第3篇
关键词：荧光,没食子,牛牙釉质,再矿化
没食子是祖国的天然药物之一,在新疆民间用于龋病的防治已有多年。由于其独特的疗效引起了学者的关注并进行了研究,现有的研究表明没食子主要化学成分-没食子鞣质及其有效提取物可以有效抑制变形链球菌的生长,进而抑制龋病的发展,其毒副作用较氟化物小,有望成为一种新型防龋药物[1]。目前其矿化领域研究尚属空白,本研究的目的是就没食子对早期釉质龋再矿化作用进行研究,为药物的临床应用奠定理论和实验基础。
1 材料与方法
1.1 材料
没食子(nut gall)(新疆哈博维药厂提供);荧光光度计(RF- 5301pc型,日本岛津公司),控温磁力搅拌器(85- 2型,江苏金坛市医疗仪器厂);氟化钠(NaF,天津市达净化材料精细化工厂,分析纯),叠氮钠(天津市福晨化学试剂厂,分析纯),氯化钙(天津市致远化学试剂有限公司,分析纯),硝酸钙、氢氧化钠、磷酸二氢钾、氯化钾(天津市盛鑫精细化工有限公司,分析纯),醋酸(天津市永昴精细化工有限公司,分析纯)、HEPES(Solarbio);pH调节计(PB- 10型,Sartorius),体视显微镜(Nikon,日本),超声波清洗机(KQ- 200KDE型,昆山超声仪器厂)。
1.2 方法
1.2.1 离体牙收集
收集新鲜拔除的离体牛切牙60 颗,去除牙周膜及附着物,分离冠根。4 ℃冰箱内保存于0.2%麝香草酚液中备用[2]。
1.2.2 样本制备
取出保存的牛牙,除去表面有机污染物, 冠部超声清洗、干燥,体视显微镜下观察无龋损、氟斑、裂痕。用硬组织切割机将牙冠切成10 mm×10 mm×2 mm厚度的釉质块,唇面釉质用抛光机及碳化硅砂纸在流水下依次磨平、抛光。选择釉质块60 个,自然干燥,釉质块唇面以外涂布2 层抗酸指甲油。
1.2.3 人工龋样本制备
将釉质标本用嵌体蜡固定在自制的环形玻棒上,放入盛有脱矿溶液的玻璃器皿中,釉质表面与溶液的比率为20 mm2∶ 10 ml, 磁搅拌仪(100 r/min)持续搅拌3 d, 形成人工龋标本,60 个釉质样本初测荧光值,设为F1。
1.2.4 再矿化实验
60 个人工龋样本随机分为3 组(20 个/组),即:NaF组(阳性对照)、没食子组、去离子水组(阴性对照)。没食子用去离子水配制,浓度为4 g/L,氟化钠浓度为1 g/L,再矿化液用2 mol/L NaOH将pH调至7.0。然后各组分别进行pH循环实验,共循环12 d,每天的具体方案[3]见表 1。
再矿化溶液:1.5 mmol/L CaCl2, 0.9 mmol/L KH2PO4, 130 mmol/L KCl, 1 mmol/L NaN3, 20 mmol/L HEPES, pH=7.0
循环结束后,再次测各组荧光量,设为F2。
1.2.5 扫描电镜观察
各组取1 个样本放入2.5%戊二醛液内4 ℃固定24 h,临界点干燥、镀金,扫描电镜工作电压为20 kV,观察脱矿后及pH循环后釉质样本表面晶格变化。
1.2.6 数据统计分析
应用SPSS 17.0作各组再矿化前后配对t检验,单因素方差分析,组间两两比较(SNK), 取ɑ=0.05。
2 结果
2.1 荧光分析
确定荧光激发、发射波长及各组荧光图 经过初测荧光实验后,确定荧光激发波波长为375 nm,发射波波长为460 nm(图 1～5)。
荧光波谱图显示:牙釉质经脱矿后荧光强度降低,再矿化后各组荧光强度均较脱矿后有所增强,表明再矿化使脱矿程度有所降低。
经过SPSS 17.0软件分析,各组再矿化前后差异有统计学意义(P<0.05),脱矿前后有明显的不同(表 2)。单因素方差分析及SNK两两比较示氟化钠与没食子组之间差别没有统计学意义(P>0.05), 2 组效果接近。氟化钠组、没食子组和去离子水组之间差别有统计学意义(P<0.05),荧光观察结果显示氟化钠和没食子明显区别于去离子水,氟化钠和没食子效果接近。
2.2 扫描电镜观察
扫描电镜结果显示,正常釉质表面较为平坦(图 6)。经脱矿形成人工龋后可见表面大小不等的凹坑(图 7)。经氟化钠干预的再矿化循环,可见细密的颗粒附着,牙齿表面较为平坦(图 8)。经没食子作用的再矿化循环,也可见颗粒附着,牙面已恢复较为平整。图片显示牙面没有氟化钠处理组均匀(图 9)。经去离子水作用的再矿化循环,可见牙面凹坑较脱矿后整体变小,去离子水不具有再矿化作用,为单纯再矿化循环作用(图 10)。电镜从形态角度再次证实氟化钠及没食子具有促进再矿化作用。
注: 各组再矿化前后比较, P<0.05; F2/F1为再矿化后荧光值与脱矿后荧光值之比
3 讨论
本实验采用新鲜的离体牛牙作为人牙的替代者,是因为牛牙结构、理化性质与人牙接近,作为替代品已被国内外学者广为接受 [4]。在龋病发生发展的过程中,破坏性的脱矿与修复性的再矿化交替进行[5]。实验采用了pH循环模型,模拟口腔内矿化过程。对于牙齿矿化研究的方法有多种,总体分为破坏性和非破坏性方法。大多数方法操作繁琐、不能完全定量,而本实验采用的荧光法,是一种新颖的、无创的、可定量检测龋病发展过程的方法[6,7,8]。同时采用扫描电镜对牙体表面形态变化定性描述,从定性和定量两个方面对实验进行评估,保证了实验结果的可靠性。
国内外文献报道,牙齿有自荧光现象,釉质表层矿物质含量的变化与荧光强度的改变有对应关系[9],建立在此基础上,实验采用了荧光光度计,由于仪器设备差异,测样所得的波谱峰值是有差别的,有文献报道,给予370 nm波长的荧光激发,可在520nm处获得激发波峰[10,11],经过前期实验推测,对于荧光光度计,给予375 nm的激发光,在460 nm获得激发波峰值,有一定差别。实验结果证实早期釉质龋的荧光强度随着再矿化而增加。通过荧光强度的检测发现没食子组有明显的再矿化作用,但作用低于NaF组,说明没食子效果不如NaF。
扫描电镜观察,没食子组和NaF组与人工龋相比病损深度明显变浅,龋损表层颗粒沉积,病损部出现与正常表面接近的均匀面,说明两组发生了明显的再矿化。通过以上形态学研究再次证明没食子能促进早期龋的矿化,其结果与荧光研究一致。本实验通过样本再矿化前后形态学自身对照,避免了不同样本之间的不均一性,准确地反映再矿化是部分溶解的晶体被来源于溶液中的钙磷离子沉积诱导而增长的过程。结果表明没食子对早期釉质龋具有再矿化作用,其再矿化主要发生在表层和表层下,故推测没食子再矿化的作用机制可能是鞣酸与溶液中的钙离子发生反应形成络合物,通过釉质表面微孔道渗透进龋损内部,促进钙离子沉积,从而引导部分溶解晶体增长促进再矿化。这一推测尚需要进一步实验加以证实。
综上所述,本研究初步证实在早期釉质龋状态下,没食子及其有效成分具有逆转龋病,促进其再矿化的作用。虽然效果不如氟化钠,但作为一种毒副作用轻微的天然防龋药物,仍具有重要的研究前景和应用价值。
参考文献
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