高效液相色谱法简称, 是一项重要的分离分析技术。自1985年版的《中国药典》将HPLC法收载以来, 其在药品检验领域中的应用范围迅速扩大, 目前已经在2000余种的药品检验中得以应用, 成为药品质量检验与控制的关键技术之一。
1 HPLC法在测定药品含量中的应用
在测定实验原料中各组分、各杂质的含量时, 可应用HPLC法进行测定, 获取更加可靠、准确、快速的检验结果。如, 在吡罗昔康含量的测定中, 由于该药物是一种酰胺类化合物, 容易被氧化和水解, 导致其水溶液的化学性质不稳定, 所以可应用HPLC法进行测定。在实际操作中, 溶剂选用0.01mol/L的盐酸甲醇溶液, 既可以增强溶剂的溶解性, 又可以增加吡罗昔康溶液的稳定性, 保证了检测结果质量;在四环素类抗生素的测定中, 可应用HPLC法对四环素类抗生素及其立体异构体进行分离测定;在螺旋霉素发酵液中有机酸含量的测定中, 可应用HPLC法测定有机酸的种类, 为分析螺旋霉素代谢机制奠定基础;在测定盐酸萘甲唑啉鼻用剂型凝胶中的盐酸萘甲唑啉含量中, 应用HPLC法进行测定, 采用乙腈将高分子物质从凝胶基质中析出, 可有效解决高分子物质堵塞液相柱的问题, 减少测定的干扰因素[1]。由此可见, 利用HPLC法对药品进行样品抽检, 能够准确检测到原料药、中间体、各组分、各杂质的含量, 杜绝假冒伪劣药品的流通, 从而保证药品质量和安全。
2 HPLC法在检测有关物质中的应用
药物在制备、贮备、运输、使用过程中可能会产生有关物质, 对药品质量和安全产生影响, 如药物制备中可能带入副产物、异构体、中间体;药品运输中可能产生聚合物、降解物等[2]。为此, 必须加强对影响药物稳定性、毒性较大的有关物质进行控制。由于有关物质的含量十分微小, 所以采用常规检测方法难以得到准确的检测结果。如, 在盐酸特拉唑嗪片的有关物质检测中, 采用常规检测法薄层色谱法 (TLC) 测定的盐酸特拉唑嗪最小检出限为0.025mg/mL, 检测灵敏度偏低。但是, 应用HPLC法进行测定, 其最小检出限可精确到0.05 μg/mL。由此可见, 应用HPLC法进行有关物质检测可大幅度提升检测灵敏度和准确性。
3 HPLC法在药物鉴别中的应用
不同的药物具备不同的药用价值, 所以必须做好药物的鉴别工作, 确保物尽其用。运用HPLC法鉴别药物, 可通过保留时间与组分结构和性质, 将其作为药物定性的参数。如, 在南北五味子的鉴别中, 运用HPLC法对两种五味子中组分含量进行测定, 采用C18柱, 流动相为配比是65:35 的甲醇-水, 流速控制在每分钟1.0m L, 检测波长控制在250nm, 能够快速鉴别出南北五味子的组分含量。由此可以看出, 将HPLC法应用在药物鉴别中, 能够开辟药物鉴别的新方法和新思路。
4 HPLC法在检验抗生素药品中的应用
在临床使用抗生素类药品的过程中, 患者经常会出现不良反应, 造成这一现象的主要原因在于药品中含有中间体、聚合物、降解产物等杂质, 所以必须加强对抗生素类药品中各项杂质的限量控制。如, 在氨苄西林丙磺舒分散片中的杂质定量分析中, 可应用HPLC法进行测定, 在短时间内将药品主成分与降解产物和有关物质进行分离, 为该制剂的限度控制奠定基础。由此可见, HPLC法在抗生素药品检验中的应用, 能够有效控制药品中的杂质含量, 保证抗生素的药效。
5 HPLC法在检测中药质量中的应用
中药的成分复杂, 质量检测难度大, 常规的检测方法很难取得准确的检测结果, 而运用HPLC法能够有效解决中药成分多样性、分离难度大的问题, 已经成为测定中药有效成分含量的有效方法之一[3]。HPLC法能够快速分离中药的待测成分与其他杂质, 为中药质量检查、成分鉴别以及含量测定奠定基础。如, 在丹岑滴丸中对隐丹参酮、黄芩苷的含量测定中应用HPLC法, 达到了分离度高、定量准确的效果, 弥补了定性检测的不足。因此, HPLC法在中药质量检测中的应用, 转变了传统看、摸、闻、尝的中药性状特征鉴别方法, 使得中药有效成分得以定量控制, 从而有利于促使中药质量检测向现代化、标准化、规范化的方向发展。
6 结语
总而言之, 高效液相色谱法是一种有效的分离分析技术方法, 在药品检验领域中显现出了极强的应用优势。随着检测器自动化程度的不断提高, 分离模式的日益增多以及联用技术的出现, 势必会推动高效液相色谱法的快速发展, 使其成为药品检验中的主流色谱分析方法, 从而提高药品检测结果的可靠性, 为加强药品质量控制提供有力依据。
摘要：高效液相色谱法是以经典液相色谱为基础发展起来的色谱方法, 具备传质阻力小、分离效率高、分离周期短、检测灵敏度高等特点, 已经成为药品检验的重要手段, 对提高药物质量控制效果起着重要作用。本文对高效液相色谱法在药品含量测定、相关物质检测、药物鉴别、抗生素类药品检验、中药质量检测等药品检验领域中的具体应用及应用效果进行论述。
关键词：高效液相色谱法,药品检验,药品含量,应用
参考文献
[1] 顾柏红.药品检验中应用高效液相色谱法进行检测的探讨[J].中国医药指南, 2012 (12) :59-60.
[2] 王鹏军.如何以常规高效液相色谱法检验中药中遇到的常见问题[J].求医问药 (下半月) , 2013 (8) :96-97.
[3] 田祥学.超高效液相色谱法在药物检验分析中的应用[J].临床医药文献电子杂志, 2015 (10) :49-50.