有研究表明野生雪莲具有增强运动耐力、抗体力性疲劳和消除疲劳的作用, 但对天山雪莲培养物的抗疲劳评估的研究极少。本研究探讨天山雪莲培养物对小鼠的抗疲劳作用, 为今后研究缓解体力疲劳保健产品提供资料。
1 材料与方法
1.1 样品
雪莲培养物胶囊, 内容物为浅褐色粉末。由大连普瑞康生物技术有限公司提供。
1.2 实验动物
选用吉林大学基础医学院动物实验中心提供的ICR清洁级雄性小鼠, 体重18～22g。生产许可证号:SCXK- (吉) 2003-0001。
1.3 剂量选择
厂家推荐成人 (体重以60kg计) 每天摄入2次, 每次4粒, 每粒300mg (其每粒配方为天山雪莲培养物12mg, 淀粉288mg) 定型产品, 即为40mg/kg BW d, 以厂家日推荐成人摄入量的1、10、和30倍设置灌胃剂量, 即40、400、1200mg/kg BW d, 各剂量组以蒸馏水稀释, 蒸馏水作阴性对照组。各组小鼠灌胃量均为0.2mL/10g BW d, 连续灌胃30d。
1.4 实验方法
1.4.1 负重游泳试验
末次给予受试物30min后, 置小鼠在游泳箱中游泳, 水深约30cm, 水温 (25±1) ℃, 鼠尾根部负荷5%体重的铅皮。记录小鼠自游泳开始至死亡时间, 作为小鼠游泳时间 (min) 。
1.4.2 血清尿素测定
末次给予受试物30min。在温度为 (30±0.5) ℃的水中游泳90min, 休息60min摘眼球采血, 取血清, 进行尿素含量测定 (试剂盒:北京中生生物工程技术公司提供) , 采用意大利产AUTOLAB—PM4000/3全自动生化分析仪测定。
1.4.3 肝糖原测定
末次给予受试物30min处死小鼠取肝脏, 经生理盐水漂洗后用滤纸吸干, 精确称取肝脏75mg。每管加入225μL试剂盒提供的碱溶液, 用簿膜封住管口, 扎一透气孔, 沸水溶20min。冷却后加入7.2mL蒸馏水, 充分混匀。按试剂说明书操作加入显色剂 (试剂盒:南京市建成生物工程研究所提供) , 沸水浴5min, 用722分光光度计在620nm波长进行比色测定。按说明书提供的公式计算肝糖原。
1.4.4 血乳酸测定
末次给予受试物30min后采血20μL, 再在温度为 (30±0.5) ℃的水中不负重游泳10min, 分别于游泳后立即 (游泳后0min) 和游泳后休息20min各采血20μL, 采用山东省科学院生物研究所生产的生物传感分析仪测定以上3个时间点的血乳酸值 (溶血剂及测定液均由该所提供) 。以3个时间点血乳酸曲线下面积判断结果。
1.5 统计学方法
实验数据用SPSS 10.0软件方差分析进行统计。
2 结果
经口给予雪莲培养物胶囊30d, 各实验组小鼠增重与阴性对照组比较无显著性差异 (P>0.05) , 中、高剂量组游泳时间长于阴性对照组, 小鼠游泳后血清尿素低于阴性对照组, 且差异有显著性 (P<0.05) , 说明雪莲培养物胶囊能延长小鼠负重游泳时间、抑制小鼠游泳后血清尿素升高而对小鼠增重无影响。各实验组肝糖原含量与阴性对照组相比无显著性差异 (P<0.05) , 说明雪莲培养物胶囊对肝糖原储备及小鼠增重未见影响。中高剂量组小鼠游泳后3个时间点血乳酸曲线下面积与阴性对照组比较差异有显著性 (P<0.05) , 说明雪莲培养物胶囊能减少游泳时血乳酸的产生而对小鼠增重无影响。
经口给予小鼠雪莲培养物胶囊40、400、1200mg/kg BW d, 连续灌胃30d, 与阴性对照组比较400、1200mg/kg BW d剂量组能延长小鼠负重游泳时间, 减少小鼠游泳时血清尿素的产生, 减少游泳时血乳酸的产生, 各实验组对肝糖原储备均未见影响。由此判定雪莲培养物胶囊具有缓解体力疲劳功能。
3 讨论
在运动中, 机体运动能力的降低是由于体力性疲劳的出现所致。对抗体力性疲劳包括两大方面, 即延缓体力性疲劳的产生和促进体力性疲劳的消除。运动耐力的提高是抗疲劳能力增强的最有力表现, 游泳时间的长短可以反映运动疲劳的程度。实验结果表明, 雪莲培养物组小鼠游泳时问延长以及剧烈运动后血清尿素氮、血乳酸的含量降低, 正是机体耐力增加和对剧烈运动而产生的代谢产物分解能力增加的表现, 提示雪莲培养物具有延缓疲劳产生的作用;此外, 安静后小鼠血乳酸含量降低明显, 说明机体对乳酸的分解加速, 提示雪莲培养物具有促进消除疲劳的作用。
摘要：以雪莲培养物为研究对象, 通过小鼠负重游泳试验, 以血清尿素测定、肝糖原含量测定以及血乳酸测定为指标, 研究雪莲培养物对小鼠抗疲劳活性。试验结果表明:雪莲培养物能延长小鼠负重游泳时间, 降低小鼠游泳时血清尿素的增加, 降低游泳时血清乳酸的水平, 显著增加肝糖原储备量, 具有良好的抗疲劳生理活性。
关键词：雪莲培养物,抗疲劳,游泳试验
参考文献
[1] 赵莉, 王晓玲.新疆雪莲的化学成分、药理作用及其临床应用[J].西南民族大学学报, 2003.
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