第一篇：辅助生殖技术简介
辅助生殖技术
人类辅助生殖技术的临床研究进展
作者：
作者单位：
出处：
摘要： 张寅;伍琼芳 (1)南昌大学研究生院医学部,南昌330006; (2)江西省妇幼保健院辅助生殖中心 国际生殖健康/计划生育杂志 2012; 31(2) : 108-114 不孕不育是一个高度遍及全球的生殖健康问题,近年来不孕症患者呈逐年增长趋势。该病已
成为影响人类发展与健康的一个全球性医学和社会学问题。自从1978年世界上首例“试管
婴儿”-英国的Louise Brown经体外受精(IVF)而诞生,辅助生殖技术(ART)逐渐成为不孕夫
妇的重要治疗手段。ART包括人工授精(hi)、体外受精与胚胎移植(IVF-ET)、胞浆内单精
子注射(ICSI)、生殖细胞及胚胎冷冻技术等。而其他ART也在快速改革发展,包括一些建立
在辅助生殖与人类基因组之间的桥梁。一系列辅助生殖相关技术,如未成熟卵母细胞体外培
养成熟(WM)、移植前遗传学诊断(PGD)、单胚胎移植以及冷冻技术等获得了较大的发展,
为降低常规IVF-ET的费用、风险等提供了可能。综述当前临床及实验性ART技术的相娑
研容讲屐.
来源库： 中国生物医学文献数据库
提高辅助生殖技术的成功率
作者：
作者单位：
出处：
摘要： 乔杰;李红真 北京大学第三医院妇产科生殖医学中心,北京 100083 国际生殖健康/计划生育杂志 2013; 32(1) : 1-2 在世界范围内,约10%-15%的育龄夫妇受到不孕症的困扰。自1978年首例试管婴儿诞生
以来,辅助生殖技术(ART)呈蓬勃发展之势,并由此引发相关领域在临床医学和分子生物学、
分子遗传学等方面的快速进展。但至今,ART的成功率并不理想,且进步缓慢。探讨影响A
RT成功率的因素,并予以相应的改进,以改善ART成功率是临床医生和科研工作者不断追
求的目标和努力的方向。选择适宜的促排卵方案、深人研究导致不孕症的病因、降低ART
的并发症,将有助于ART的发展,更好地服务于患者。
来源库： 中国生物医学文献数据库
第二篇：人类辅助生殖技术规范
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人类辅助生殖技术规范
人类辅助生殖技术规范(2003)
发文日期：2003-07-10
实施日期：2003-10-01
发文机关：卫生部
人类辅助生殖技术(Assisted Reproductive Technology，ART)包括体外受精-胚胎移植(In Vitro Fertilization and Embryo Transfer，IVF-ET)及其衍生技术和人工授精(Artificial Insemination，AI)两大类。从事人类辅助生殖技术的各类医疗机构和计划生育服务机构(以下简称机构)须遵守本规范。
一、体外受精-胚胎移植及其衍生技术规范
体外受精-胚胎移植及其衍生技术目前主要包括体外受精-胚胎
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移植、配子或合子输卵管内移植、卵胞浆内单精子显微注射、胚胎冻融、植入前胚胎遗传学诊断等。
(一)基本要求。
1、机构设置条件
(1)必须是持有《医疗机构执业许可证》的综合性医院、专科医院或持有《计划生育技术服务机构执业许可证》的省级以上(含省级)的计划生育技术服务机构;
(2)中国人民解放军医疗机构开展体外受精-胚胎移植及其衍生技术，根据两个《办法》规定，由所在的省、自治区、直辖市卫生行政部门或总后卫生部科技部门组织专家论证、审核并报国家卫生部审批;
(3)中外合资、合作医疗机构必须同时持有卫生部批准证书和原外经贸部(现商务部)颁发的《外商投资企业批准证书》;
(4)机构必须设有妇产科和男科临床并具有妇产科住院开腹手术的技术和条件;
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(5)生殖医学机构由生殖医学临床(以下称临床)和体外受精实验室(以下称实验室)两部分组成;
(6)机构必须具备选择性减胎技术;
(7)机构必须具备胚胎冷冻、保存、复苏的技术和条件;
(8)机构如同时设置人类精子库，不能设在同一科室，必须与生殖医学机构分开管理;
(9)凡计划拟开展人类辅助生殖技术的机构必须由所在省、区、市卫生行政部门根据区域规划、医疗需求予以初审，并上报卫生部批准筹建。筹建完成后由卫生部组织专家进行预准入评审，试运行一年后再行正式准入评审;
(10)实施体外受精-胚胎移植及其衍生技术必须获得卫生部的批准证书。
2、在编人员要求
机构设总负责人、临床负责人和实验室负责人，临床负责人与实验室负责人不得由同一人担任。
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生殖医学机构的在编专职技术人员不得少于12人，其中临床医师不得少于6人(包括男科执业医师1人)，实验室专业技术人员不得少于3人，护理人员不得少于3人。上述人员须接受卫生部指定医疗机构进行生殖医学专业技术培训。
外籍、中国台湾地区、香港和澳门特别行政区技术人员来内地从事人类辅助生殖诊疗活动须按国家有关管理规定执行。
(1)临床医师
①专职临床医师必须是具备医学学士学位并已获得中级以上技术职称或具备生殖医学硕士学位的妇产科或泌尿男科专业的执业医师;
②临床负责人须由从事生殖专业具有高级技术职称的妇产科执业医师担任;
③临床医师必须具备以下方面的知识和工作能力：
掌握女性生殖内分泌学临床专业知识，特别是促排卵药物的使用和月经周期的激素调控;
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掌握妇科超声技术，并具备卵泡超声监测及B超介导下阴道穿刺取卵的技术能力，具备开腹手术的能力;具备处理人类辅助生殖技术各种并发症的能力;
④机构中应配备专职男科临床医师，掌握男性生殖医学基础理论和临床专业技术。
(2)实验室技术人员
①胚胎培养实验室技术人员必须具备医学或生物学专业学士以上学位或大专毕业并具备中级技术职称;
②实验室负责人须由医学或生物学专业高级技术职称人员担任，具备细胞生物学、胚胎学、遗传学等相关学科的理论及细胞培养技能，掌握人类辅助生殖技术的实验室技能，具有实验室管理能力;
③至少一人具有按世界卫生组织精液分析标准程序处理精液的技能;
④至少一人在卫生部指定的机构接受过精子、胚胎冷冻及复苏技术培训，并系统掌握精子、胚胎冷冻及复苏技能;
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⑤开展卵胞浆内单精子显微注射技术的机构，至少有一人在卫生部指定机构受过本技术的培训，并具备熟练的显微操作及体外受精与胚胎移植实验室技能;
⑥开展植入前胚胎遗传学诊断的机构，必须有专门人员受过极体或胚胎卵裂球活检技术培训，熟练掌握该项技术的操作技能，掌握医学遗传学理论知识和单细胞遗传学诊断技术，所在机构必须具备遗传咨询和产前诊断技术条件。
(3)护士
护士须有护士执业证书，受过生殖医学护理工作的培训，护理工作的负责人必须具备中级技术职称。
3、场所要求
(1)场所须包括候诊区、诊疗室、检查室、取精室、精液处理室、资料档案室、清洗室、缓冲区(包括更衣室)、超声室、胚胎培养室、取卵室、体外受精实验室、胚胎移植室及其它辅助场所;
(2)用于生殖医学医疗活动的总使用面积不小于260平方米;
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(3)场所布局须合理,符合洁净要求，建筑和装修材料要求无毒，应避开对工作产生不良影响的化学源和放射源;
(4)工作场所须符合医院建筑安全要求和消防要求，保障水电供应。各工作间应具备空气消毒设施;
(5)主要场所要求
①超声室：使用面积不小于15平方米，环境符合卫生部医疗场所III类标准;
②取精室：与精液处理室邻近，使用面积不小于5平方米，并有洗手设备;
③精液处理室：使用面积不小于10平方米;
④取卵室：供B超介导下经阴道取卵用，使用面积不小于25平方米，环境符合卫生部医疗场所II类标准;
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⑤体外受精实验室：使用面积不小于30平方米，并具备缓冲区。环境符合卫生部医疗场所I类标准，建议设置空气净化层流室。胚胎操作区必须达到百级标准;
⑥胚胎移植室：使用面积不小于15平方米，环境符合卫生部医疗场所II类标准。
4、设备条件
(1)B超：2台(配置阴道探头和穿刺引导装置);
(2)负压吸引器;
(3)妇科床;
(4)超净工作台：3台;
(5)解剖显微镜;
(6)生物显微镜;
(7)倒置显微镜(含恒温平台);
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(8)精液分析设备;
(9)二氧化碳培养箱(至少3台);
(10)二氧化碳浓度测定仪;
(11)恒温平台和恒温试管架;
(12)冰箱;
(13)离心机;
(14)实验室常规仪器：pH计、渗透压计、天平、电热干燥箱等;
(15)配子和胚胎冷冻设备包括：冷冻仪、液氮储存罐和液氮运输罐等。
申报开展卵胞浆内单精子显微注射技术的机构，必备具备显微操作仪1台。
5、其它要求
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开展体外受精与胚胎移植及其衍生技术的机构，还必须具备以下条件：
(1)临床常规检验(包括常规生化、血尿常规、影像学检查、生殖免疫学检查);
(2)生殖内分泌实验室及其相关设备;
(3)细胞和分子遗传学诊断实验室及其相关设备;若开展植入前胚胎遗传学诊断的机构，必须同时具备产前诊断技术的认可资格;
(4)开腹手术条件;
(5)住院治疗条件;
(6)用品消毒和污物处理条件。
(二)管理。
1、实施体外受精与胚胎移植及其衍生技术的机构，必须遵守国家人口和计划生育法规和条例的规定，并同不育夫妇签署相关技术的
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《知情同意书》和《多胎妊娠减胎术同意书》;
2、机构必须预先认真查验不育夫妇的身份证、结婚证和符合国家人口和计划生育法规和条例规定的生育证明原件，并保留其复印件备案;涉外婚姻夫妇及外籍人员应出示护照及婚姻证明并保留其复印件备案;
3、机构必须按期对工作情况进行自查，按要求向卫生部提供必需的各种资料及报告;
4、机构的各种病历及其相关记录，须按卫生部和国家中医药管理局卫医发[2002]193号"关于印发《医疗机构病历管理规定》的通知"要求，予以严格管理;
5、机构实施供精体外受精与胚胎移植及其衍生技术，必须向供精的人类精子库及时准确地反馈受者的妊娠和子代等相关信息;
6、规章制度
机构应建立以下制度
(1)生殖医学伦理委员会工作制度;
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(2)病案管理制度;
(3)随访制度;
(4)工作人员分工责任制度;
(5)接触配子、胚胎的实验材料质控制度;
(6)各项技术操作常规;
(7)特殊药品管理制度;
(8)仪器管理制度;
(9)消毒隔离制度;
(10)材料管理制度。
7、技术安全要求
(1)要求机构具有基本急救条件，包括供氧、气管插管等用品和
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常用急救药品和设备等;
(2)采用麻醉技术的机构，必须配备相应的监护、抢救设备和人员;
(3)实验材料必须无毒、无尘、无菌，并符合相应的质量标准;
(4)实验用水须用去离子超纯水;
(5)每周期移植胚胎总数不得超过3个，其中35岁以下妇女第一次助孕周期移植胚胎数不得超过2个 ;
(6)与配子或胚胎接触的用品须为一次性使用耗材;
(7)实施供精的体外受精与胚胎移植及其衍生技术的机构，必须参照人工授精的有关规定执行。
(三)适应症与禁忌症。
1、适应症
(1)体外受精-胚胎移植适应症
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①女方各种因素导致的配子运输障碍;
②排卵障碍;
③子宫内膜异位症;
④男方少、弱精子症;
⑤不明原因的不育;
⑥免疫性不孕。
(2)卵胞浆内单精子显微注射适应症
①严重的少、弱、畸精子症;
②不可逆的梗阻性无精子症;
③生精功能障碍(排除遗传缺陷疾病所致);
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④免疫性不育;
⑤体外受精失败;
⑥精子顶体异常;
⑦需行植入前胚胎遗传学检查的。
(3)植入前胚胎遗传学诊断适应症
目前主要用于单基因相关遗传病、染色体病、性连锁遗传病及可能生育异常患儿的高风险人群等。
(4)接受卵子赠送适应症
①丧失产生卵子的能力;
②女方是严重的遗传性疾病携带者或患者;
③具有明显的影响卵子数量和质量的因素。
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(5)赠卵的基本条件
①赠卵是一种人道主义行为,禁止任何组织和个人以任何形式募集供卵者进行商业化的供卵行为;
②赠卵只限于人类辅助生殖治疗周期中剩余的卵子;
③对赠卵者必须进行相关的健康检查 (参照供精者健康检查标准);
④赠卵者对所赠卵子的用途、权利和义务应完全知情并签定知情同意书;
⑤每位赠卵者最多只能使5名妇女妊娠;
⑥赠卵的临床随访率必须达100%。
2、禁忌症
(1)有如下情况之一者，不得实施体外受精-胚胎移植及其衍生技术
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①任何一方患有严重的精神疾患、泌尿生殖系统急性感染、性传播疾病;
②患有《母婴保健法》规定的不宜生育的、目前无法进行胚胎植入前遗传学诊断的遗传性疾病;
③任何一方具有吸毒等严重不良嗜好;
④任何一方接触致畸量的射线、毒物、药品并处于作用期。
(2)女方子宫不具备妊娠功能或严重躯体疾病不能承受妊娠。
(四)质量标准。
1、 为了切实保障患者的利益，维护妇女和儿童健康权益，提高人口质量，严格防止人类辅助生殖技术产业化和商品化，以及确保该技术更加规范有序进行，任何生殖机构每年所实施的体外受精与胚胎移植及其衍生技术不得超过1000个取卵周期;
2、机构对体外受精-胚胎移植出生的随访率不得低于95%;
3、体外受精的受精率不得低于65%，卵胞浆内单精子显微注射
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的受精率不得低于70%;
4、取卵周期临床妊娠率在机构成立的第一年不得低于15%，第二年以后不得低于20%;冻融胚胎的移植周期临床妊娠率不得低于10%〔移植周期临床妊娠率=(临床妊娠数/移植周期数)x100%〕;
5、对于多胎妊娠必须实施减胎术，避免双胎，严禁三胎和三胎以上的妊娠分娩。
二、人工授精技术规范
人工授精技术根据精子来源分为夫精人工授精和供精人工授精技术。
(一)基本要求。
1、机构设置条件
(1)必须是持有《医疗机构执业许可证》的综合性医院、专科医院或持有《计划生育技术服务执业许可证》的计划生育技术服务机构;
(2)实施供精人工授精技术必须获得卫生部的批准证书，实施夫
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精人工授精技术必须获得省、自治区、直辖市卫生行政部门的批准证书并报卫生部备案;
(3)中国人民解放军医疗机构开展人工授精技术的，根据两个《办法》规定，对申请开展夫精人工授精技术的机构，由所在省、自治区、直辖市卫生厅局或总后卫生部科技部门组织专家论证、评审、审核、审批，并报国家卫生部备案;对申请开展供精人工授精的医疗机构，由所在省、自治区、直辖市卫生厅局或总后卫生部科技部门组织专家论证、审核，报国家卫生部审批;
(4)中外合资、合作医疗机构，必须同时持有卫生部批准证书和原外经贸部(现商务部)颁发的《外商投资企业批准证书》;
(5)实施供精人工授精的机构，必须从持有《人类精子库批准证书》的人类精子库获得精源并签署供精协议，并有义务向供精单位及时提供供精人工授精情况及准确的反馈信息;协议应明确双方的职责;
(6)具备法律、法规或主管机关要求的其他条件。
2、人员要求
(1)最少具有从事生殖医学专业的在编专职医师2人，实验室工
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作人员2人，护士1人，且均具备良好的职业道德;
(2)从业医师须具备执业医师资格;
(3)机构必须指定专职负责人，该负责人须是具备高级技术职称的妇产科执业医师;
(4)机构内医师应具备临床妇产科和生殖内分泌理论及实践经验，并具备妇科超声技术资格和经验;
(5)实验室工作人员应具备按世界卫生组织精液分析标准程序处理精液的培训经历和实践操作技能;
(6)护士具备执业护士资格;
(7)同时开展体外受精-胚胎移植技术的机构，必须指定专职负责人一人，其他人员可以兼用。
3、场所要求
场所包含候诊室、诊室、检查室、B超室、人工授精实验室、授精室和其他辅助区域，总使用面积不得少于100平方米 ，其中人工授精实验室不少于20 平方米和授精室的专用面积不少于15平方米;同时开展人工授精和体外受精与胚胎移植的机构，候诊室、诊室、检
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查室和B超室可不必单设，但人工授精室和人工授精实验室必须专用，且使用面积各不少于20平方米;另外，技术服务机构须具备妇科内分泌测定、影像学检查、遗传学检查等相关检查条件。
4、设备条件
(1)妇检床2张以上;
(2)B超仪1台(配置阴道探头);
(3)生物显微镜1台;
(4)离心机1台;
(5)百级超净工作台1台;
(6)二氧化碳培养箱1台;
(7)液氮罐2个以上;
(8)冰箱一台;
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(9)精液分析设备;
(10)水浴箱1台;
(11)与精液接触的器皿等须使用无毒的一次性耗材。
以上设备要求运行良好，专业检验合格。
(二)管理。
1、实施授精前，不育夫妇必须签定《知情同意书》及《多胎妊娠减胎术同意书》;
2、供精人工授精只能从持有卫生部批准证书的人类精子库获得精源;
3、机构必须及时做好不育夫妇的病历书写并按《医疗机构病历管理规定》严格管理，对每一位受者都应进行随访;
4、 实施供精人工授精的机构，必须向人类精子库反馈妊娠、子代以及受者使用冷冻精液后是否出现性传播疾病的临床信息等情况，记录档案应永久保存;
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5、严格控制每一位供精者的冷冻精液最多只能使5名妇女受孕;
6、除司法机关出具公函或相关当事人具有充分理由同意查阅外，其他任何单位和个人一律谢绝查阅供受精者双方的档案;确因工作需要及其他特殊原因非得查阅档案时，则必须经授精机构负责人批准，并隐去供受者双方的社会身份资料;
7、人工授精必须具备完善、健全的规章制度和技术操作手册并切实付诸实施;
8、机构必须按期对人工授精的情况进行自查，按要求向卫生行政审批部门提供必要的资料及报告。
(三)适应症与禁忌症。
1、夫精人工授精
(1)适应症
①男性因少精、弱精、液化异常、性功能障碍、生殖器畸形等不育;
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②宫颈因素不育;
③生殖道畸形及心理因素导致性交不能等不育;
④免疫性不育;
⑤原因不明不育。
(2)禁忌症
①男女一方患有生殖泌尿系统急性感染或性传播疾病;
②一方患有严重的遗传、躯体疾病或精神心理疾患;
③一方接触致畸量的射线、毒物、药品并处于作用期;
④一方有吸毒等严重不良嗜好。
2、供精人工授精
(1)适应症
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①不可逆的无精子症、严重的少精症、弱精症和畸精症;
②输精管复通失败;
③射精障碍;
④适应症①②③中，除不可逆的无精子症外，其它需行供精人工授精技术的患者，医务人员必须向其交代清楚：通过卵胞浆内单精子显微注射技术也可能使其有自己血亲关系的后代，如果患者本人仍坚持放弃通过卵胞浆内单精子显微注射技术助孕的权益，则必须与其签署知情同意书后，方可采用供精人工授精技术助孕;
⑤男方和/或家族有不宜生育的严重遗传性疾病;
⑥母儿血型不合不能得到存活新生儿。
(2)禁忌症
①女方患有生殖泌尿系统急性感染或性传播疾病;
②女方患有严重的遗传、躯体疾病或精神疾患;
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③女方接触致畸量的射线、毒物、药品并处于作用期;
④女方有吸毒等不良嗜好。
(四)技术程序与质量控制。
1、技术程序
(1)严格掌握适应症并排除禁忌症;
(2)人工授精可以在自然周期或药物促排卵周期下进行，但严禁以多胎妊娠为目的使用促排卵药;
(3)通过B超和有关激素水平联合监测卵泡的生长发育;
(4)掌握排卵时间，适时实施人工授精;
(5)用于人工授精的精子必须经过洗涤分离处理，行宫颈内人工授精，其前向运动精子总数不得低于20×106 ;行宫腔内人工授精，其前向运动精子总数不得低于10×106;
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(6)人工授精后可用药物支持黄体功能;
(7)人工授精后14-16天诊断生化妊娠，5周B超确认临床妊娠;
(8)多胎妊娠必须到具有选择性减胎术条件的机构行选择性减胎术;
(9)实施供精人工授精的机构如不具备选择性减胎术的条件和技术，必须与具备该技术的机构签定使用减胎技术协议，以确保选择性减胎术的有效实施，避免多胎分娩。
2、质量标准
(1)用于供精人工授精的冷冻精液，复苏后前向运动的精子不低于40% ;
(2)周期临床妊娠率不低于15%(周期临床妊娠率=临床妊娠数/人工授精周期数×100%)。
三、实施技术人员的行为准则
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(一)必须严格遵守国家人口和计划生育法律法规;
(二)必须严格遵守知情同意、知情选择的自愿原则;
(三)必须尊重患者隐私权;
(四)禁止无医学指征的性别选择;
(五)禁止实施代孕技术;
(六)禁止实施胚胎赠送;
(七)禁止实施以治疗不育为目的的人卵胞浆移植及核移植技术;
(八)禁止人类与异种配子的杂交;禁止人类体内移植异种配子、合子和胚胎;禁止异种体内移植人类配子、合子和胚胎;
(九)禁止以生殖为目的对人类配子、合子和胚胎进行基因操作;
(十)禁止实施近亲间的精子和卵子结合;
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(十一)在同一治疗周期中，配子和合子必须来自同一男性和同一女性;
(十二)禁止在患者不知情和不自愿的情况下，将配子、合子和胚胎转送他人或进行科学研究;
(十三)禁止给不符合国家人口和计划生育法规和条例规定的夫妇和单身妇女实施人类辅助生殖技术;
(十四)禁止开展人类嵌合体胚胎试验研究;
(十五)禁止克隆人。
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流
程
中
的
司
法
审
查
范
围
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申
诉
书
范
本
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第三篇：人类辅助生殖技术规范
人类辅助生殖技术(Assisted Reproductive Technology，ART)包括体外受精-胚胎移植(In Vitro Fertilization and Embryo Transfer，IVF-ET)及其衍生技术和人工授精(Artificial Insemination，AI)两大类。从事人类辅助生殖技术的各类医疗机构和计划生育服务机构(以下简称机构)须遵守本规范。
一、体外受精-胚胎移植及其衍生技术规范
体外受精-胚胎移植及其衍生技术目前主要包括体外受精-胚胎移植、配子或合子输卵管内移植、卵胞浆内单精子显微注射、胚胎冻融、植入前胚胎遗传学诊断等。
(一)基本要求。
1、机构设臵条件
(1)必须是持有《医疗机构执业许可证》的综合性医院、专科医院或持有《计划生育技术服务机构执业许可证》的省级以上(含省级)的计划生育技术服务机构;
(2)中国人民解放军医疗机构开展体外受精-胚胎移植及其衍生技术，根据两个《办法》规定，由所在的省、自治区、直辖市卫生行政部门或总后卫生部科技部门组织专家论证、审核并报国家卫生部审批;
(3)中外合资、合作医疗机构必须同时持有卫生部批准证书和原外经贸部(现商务部)颁发的《外商投资企业批准证书》;
(4)机构必须设有妇产科和男科临床并具有妇产科住院开腹手术的技术和条件;
(5)生殖医学机构由生殖医学临床(以下称临床)和体外受精实验室(以下称实验室)两部分组成;
(6)机构必须具备选择性减胎技术;
(7)机构必须具备胚胎冷冻、保存、复苏的技术和条件;
(8)机构如同时设臵人类精子库，不能设在同一科室，必须与生殖医学机构分开管理;
(9)凡计划拟开展人类辅助生殖技术的机构必须由所在省、区、市卫生行政部门根据区域规划、医疗需求予以初审，并上报卫生部批准筹建。筹建完成后由卫生部组织专家进行预准入评审，试运行一年后再行正式准入评审;
(10)实施体外受精-胚胎移植及其衍生技术必须获得卫生部的批准证书。
2、在编人员要求
机构设总负责人、临床负责人和实验室负责人，临床负责人与实验室负责人不得由同一人担任。 生殖医学机构的在编专职技术人员不得少于12人，其中临床医师不得少于6人(包括男科执业医师1人)，实验室专业技术人员不得少于3人，护理人员不得少于3人。上述人员须接受卫生部指定医疗机构进行生殖医学专业技术培训。
外籍、中国台湾地区、香港和澳门特别行政区技术人员来内地从事人类辅助生殖诊疗活动须按国家有关管理规定执行。
(1)临床医师
①专职临床医师必须是具备医学学士学位并已获得中级以上技术职称或具备生殖医学硕士学位的妇产科或泌尿男科专业的执业医师;
②临床负责人须由从事生殖专业具有高级技术职称的妇产科执业医师担任; ③临床医师必须具备以下方面的知识和工作能力：
掌握女性生殖内分泌学临床专业知识，特别是促排卵药物的使用和月经周期的激素调控;
掌握妇科超声技术，并具备卵泡超声监测及B超介导下阴道穿刺取卵的技术能力，具备开腹手术的能力;具备处理人类辅助生殖技术各种并发症的能力;
④机构中应配备专职男科临床医师，掌握男性生殖医学基础理论和临床专业技术。 (2)实验室技术人员
①胚胎培养实验室技术人员必须具备医学或生物学专业学士以上学位或大专毕业并具备中级技术职称; ②实验室负责人须由医学或生物学专业高级技术职称人员担任，具备细胞生物学、胚胎学、遗传学等相关学科的理论及细胞培养技能，掌握人类辅助生殖技术的实验室技能，具有实验室管理能力;
③至少一人具有按世界卫生组织精液分析标准程序处理精液的技能;
④至少一人在卫生部指定的机构接受过精子、胚胎冷冻及复苏技术培训，并系统掌握精子、胚胎冷冻及复苏技能;
⑤开展卵胞浆内单精子显微注射技术的机构，至少有一人在卫生部指定机构受过本技术的培训，并具备熟练的显微操作及体外受精与胚胎移植实验室技能;
⑥开展植入前胚胎遗传学诊断的机构，必须有专门人员受过极体或胚胎卵裂球活检技术培训，熟练掌握该项技术的操作技能，掌握医学遗传学理论知识和单细胞遗传学诊断技术，所在机构必须具备遗传咨询和产前诊断技术条件。
(3)护士
护士须有护士执业证书，受过生殖医学护理工作的培训，护理工作的负责人必须具备中级技术职称。
3、场所要求
(1)场所须包括候诊区、诊疗室、检查室、取精室、精液处理室、资料档案室、清洗室、缓冲区(包括更衣室)、超声室、胚胎培养室、取卵室、体外受精实验室、胚胎移植室及其它辅助场所;
(2)用于生殖医学医疗活动的总使用面积不小于260平方米;
(3)场所布局须合理,符合洁净要求，建筑和装修材料要求无毒，应避开对工作产生不良影响的化学源和放射源;
(4)工作场所须符合医院建筑安全要求和消防要求，保障水电供应。各工作间应具备空气消毒设施;
(5)主要场所要求：
①超声室：使用面积不小于15平方米，环境符合卫生部医疗场所III类标准; ②取精室：与精液处理室邻近，使用面积不小于5平方米，并有洗手设备; ③精液处理室：使用面积不小于10平方米;
④取卵室：供B超介导下经阴道取卵用，使用面积不小于25平方米，环境符合卫生部医疗场所II类标准;
⑤体外受精实验室：使用面积不小于30平方米，并具备缓冲区。环境符合卫生部医疗场所I类标准，建议设臵空气净化层流室。胚胎操作区必须达到百级标准;
⑥胚胎移植室：使用面积不小于15平方米，环境符合卫生部医疗场所II类标准。
4、设备条件
(1)B超：2台(配臵阴道探头和穿刺引导装臵); (2)负压吸引器; (3)妇科床;
(4)超净工作台：3台; (5)解剖显微镜; (6)生物显微镜;
(7)倒臵显微镜(含恒温平台); (8)精液分析设备;
(9)二氧化碳培养箱(至少3台); (10)二氧化碳浓度测定仪; (11)恒温平台和恒温试管架; (12)冰箱; (13)离心机;
(14)实验室常规仪器：pH计、渗透压计、天平、电热干燥箱等;
(15)配子和胚胎冷冻设备包括：冷冻仪、液氮储存罐和液氮运输罐等。 申报开展卵胞浆内单精子显微注射技术的机构，必备具备显微操作仪1台。
5、其它要求
开展体外受精与胚胎移植及其衍生技术的机构，还必须具备以下条件：
(1)临床常规检验(包括常规生化、血尿常规、影像学检查、生殖免疫学检查); (2)生殖内分泌实验室及其相关设备;
(3)细胞和分子遗传学诊断实验室及其相关设备;若开展植入前胚胎遗传学诊断的机构必须同时具备产前诊断技术的认可资格;
(4)开腹手术条件; (5)住院治疗条件;
(6)用品消毒和污物处理条件。
(二)管理。
1、实施体外受精与胚胎移植及其衍生技术的机构，必须遵守国家人口和计划生育法规和条例的规定，并同不育夫妇签署相关技术的《知情同意书》和《多胎妊娠减胎术同意书》;
2、机构必须预先认真查验不育夫妇的身份证、结婚证和符合国家人口和计划生育法规和条例规定的生育证明原件，并保留其复印件备案;涉外婚姻夫妇及外籍人员应出示护照及婚姻证明并保留其复印件备案;
3、机构必须按期对工作情况进行自查，按要求向卫生部提供必需的各种资料及报告;
4、机构的各种病历及其相关记录，须按卫生部和国家中医药管理局卫医发„2002‟193号“关于印发《医疗机构病历管理规定》的通知”要求，予以严格管理;
5、机构实施供精体外受精与胚胎移植及其衍生技术，必须向供精的人类精子库及时准确地反馈受者的妊娠和子代等相关信息;
6、规章制度
机构应建立以下制度
(1)生殖医学伦理委员会工作制度; (2)病案管理制度; (3)随访制度;
(4)工作人员分工责任制度;
(5)接触配子、胚胎的实验材料质控制度; (6)各项技术操作常规; (7)特殊药品管理制度; (8)仪器管理制度; (9)消毒隔离制度; (10)材料管理制度。
7、技术安全要求
(1)要求机构具有基本急救条件，包括供氧、气管插管等用品和常用急救药品和设备等; (2)采用麻醉技术的机构，必须配备相应的监护、抢救设备和人员; (3)实验材料必须无毒、无尘、无菌，并符合相应的质量标准; (4)实验用水须用去离子超纯水;
(5)每周期移植胚胎总数不得超过3个，其中35岁以下妇女第一次助孕周期移植胚胎数不得超过2个 ;
(6)与配子或胚胎接触的用品须为一次性使用耗材;
(7)实施供精的体外受精与胚胎移植及其衍生技术的机构，必须参照人工授精的有关规定执行。
(三)适应症与禁忌症。
1、适应症
(1)体外受精-胚胎移植适应症
①女方各种因素导致的配子运输障碍; ②排卵障碍; ③子宫内膜异位症; ④男方少、弱精子症; ⑤不明原因的不育; ⑥免疫性不孕。
(2)卵胞浆内单精子显微注射适应症 ①严重的少、弱、畸精子症; ②不可逆的梗阻性无精子症;
③生精功能障碍(排除遗传缺陷疾病所致); ④免疫性不育; ⑤体外受精失败; ⑥精子顶体异常;
⑦需行植入前胚胎遗传学检查的。 (3)植入前胚胎遗传学诊断适应症
目前主要用于单基因相关遗传病、染色体病、性连锁遗传病及可能生育异常患儿的高风险人群等。 (4)接受卵子赠送适应症 ①丧失产生卵子的能力;
②女方是严重的遗传性疾病携带者或患者; ③具有明显的影响卵子数量和质量的因素。 (5)赠卵的基本条件
①赠卵是一种人道主义行为,禁止任何组织和个人以任何形式募集供卵者进行商业化的供卵行为;
②赠卵只限于人类辅助生殖治疗周期中剩余的卵子;
③对赠卵者必须进行相关的健康检查 (参照供精者健康检查标准);
④赠卵者对所赠卵子的用途、权利和义务应完全知情并签定知情同意书;
⑤每位赠卵者最多只能使5名妇女妊娠;
⑥赠卵的临床随访率必须达100%。
2、禁忌症
(1)有如下情况之一者，不得实施体外受精-胚胎移植及其衍技术
①男女任何一方患有严重的精神疾患、泌尿生殖系统急性感染、性传播疾病;
②患有《母婴保健法》规定的不宜生育的、目前无法进行胚胎植入前遗传学诊断的遗传性疾病; ③任何一方具有吸毒等严重不良嗜好;
④任何一方接触致畸量的射线、毒物、药品并处于作用期。 (2)女方子宫不具备妊娠功能或严重躯体疾病不能承受妊娠。
(四)质量标准。
1、为了切实保障患者的利益，维护妇女和儿童健康权益，提高人口质量，严格防止人类辅助生殖技术产业化和商品化，以及确保该技术更加规范有序进行，任何生殖机构每年所实施的体外受精与胚胎移植及其衍生技术不得超过1000个取卵周期;
2、机构对体外受精-胚胎移植出生的随访率不得低于95%;
3、体外受精的受精率不得低于65%，卵胞浆内单精子显微注射的受精率不得低于70%;
4、取卵周期临床妊娠率在机构成立的第一年不得低于15%，第二年以后不得低于20%;冻融胚胎的移植周期临床妊娠率不得低于10%„移植周期临床妊娠率=(临床妊娠数/移植周期数)x100%‟;
5、对于多胎妊娠必须实施减胎术，避免双胎，严禁三胎和三胎以上的妊娠分娩。
二、人工授精技术规范
人工授精技术根据精子来源分为夫精人工授精和供精人工授精技术。
(一)基本要求。
1、机构设臵条件
(1)必须是持有《医疗机构执业许可证》的综合性医院、专科医院或持有《计划生育技术服务执业许可证》的计划生育技术服务机构;
(2)实施供精人工授精技术必须获得卫生部的批准证书，实施夫精人工授精技术必须获得省、自治区、直辖市卫生行政部门的批准证书并报卫生部备案;
(3)中国人民解放军医疗机构开展人工授精技术的，根据两个《办法》规定，对申请开展夫精人工授精技术的机构，由所在省、自治区、直辖市卫生厅局或总后卫生部科技部门组织专家论证、评审、审核、审批，并报国家卫生部备案;对申请开展供精人工授精的医疗机构，由所在省、自治区、直辖市卫生厅局或总后卫生部科技部门组织专家论证、审核，报国家卫生部审批;
(4)中外合资、合作医疗机构必须同时持有卫生部批准证书和原外经贸部(现商务部)颁发的《外商投资企业批准证书》;
(5)实施供精人工授精的机构，必须从持有《人类精子库批准证书》的人类精子库获得精源并签署供精协议，并有义务向供精单位及时提供供精人工授精情况及准确的反馈信息;协议应明确双方的职责;
(6)具备法律、法规或主管机关要求的其他条件。
2、人员要求
(1)最少具有从事生殖医学专业的在编专职医师2人，实验室工作人员2人，护士1人，且均具备良好的职业道德;
(2)从业医师须具备执业医师资格;
(3)机构必须指定专职负责人，该负责人须是具备高级技术职称的妇产科执业医师;
(4)机构内医师应具备临床妇产科和生殖内分泌理论及实践经验，并具备妇科超声技术资格和经验;
(5)实验室工作人员应具备按世界卫生组织精液分析标准程序处理精液的培训经历和实践操作技能;
(6)护士具备执业护士资格;
(7)同时开展体外受精-胚胎移植技术的机构必须指定专职负责人一人，其他人员可以兼用。
3、场所要求
场所包含候诊室、诊室、检查室、B超室、人工授精实验室、授精室和其他辅助区域，总使用面积不得少于100平方米 ，其中人工授精实验室不少于20 平方米和授精室的专用面积不少于15平方米;同时开展人工授精和体外受精与胚胎移植的机构，候诊室、诊室、检查室和B超室可不必单设，但人工授精室和人工授精实验室必须专用，且使用面积各不少于20平方米;另外，技术服务机构须具备妇科内分泌测定、影像学检查、遗传学检查等相关检查条件。
4、设备条件
(1)妇检床2张以上;
(2)B超仪1台(配臵阴道探头); (3)生物显微镜1台; (4)离心机1台;
(5)百级超净工作台1台; (6)二氧化碳培养箱1台; (7)液氮罐2个以上; (8)冰箱一台; (9)精液分析设备; (10)水浴箱1台;
(11)与精液接触的器皿等须使用无毒的一次性耗材。 以上设备要求运行良好，专业检验合格。
(二)管理。
1、实施授精前，不育夫妇必须签定《知情同意书》及《多胎妊娠减胎术同意书》;
2、供精人工授精只能从持有卫生部批准证书的人类精子库获得精源;
3、机构必须及时做好不育夫妇的病历书写并按《医疗机构病历管理规定》严格管理，对每一位受者都应进行随访;
4、实施供精人工授精的机构必须向人类精子库反馈妊娠、子代以及受者使用冷冻精液后是否出现性传播疾病的临床信息等情况，记录档案应永久保存;
5、严格控制每一位供精者的冷冻精液最多只能使5名妇女受孕;
6、除司法机关出具公函或相关当事人具有充分理由同意查阅外，其他任何单位和个人一律谢绝查阅供受精者双方的档案;确因工作需要及其他特殊原因非得查阅档案时，则必须经授精机构负责人批准，并隐去供受者双方的社会身份资料;
7、人工授精必须具备完善、健全的规章制度和技术操作手册并切实付诸实施;
8、机构必须按期对人工授精的情况进行自查，按要求向卫生行政审批部门提供必要的资料及报告。
(三)适应症与禁忌症。
1、夫精人工授精 (1)适应症
①男性因少精、弱精、液化异常、性功能障碍、生殖器畸形等不育; ②宫颈因素不育;
③生殖道畸形及心理因素导致性交不能等不育; ④免疫性不育; ⑤原因不明不育。 (2)禁忌症
①男女一方患有生殖泌尿系统急性感染或性传播疾病; ②一方患有严重的遗传、躯体疾病或精神心理疾患; ③一方接触致畸量的射线、毒物、药品并处于作用期; ④一方有吸毒等严重不良嗜好。
2、供精人工授精 (1)适应症
①不可逆的无精子症、严重的少精症、弱精症和畸精症; ②输精管复通失败; ③射精障碍;
④适应症①②③中，除不可逆的无精子症外，其它需行供精人工授精技术的患者，医务人员必须向其交代清楚：通过卵胞浆内单精子显微注射技术也可能使其有自己血亲关系的后代，如果患者本人仍坚持放弃通过卵胞浆内单精子显微注射技术助孕的权益，则必须与其签署知情同意书后，方可采用供精人工授精技术助孕;
⑤男方和/或家族有不宜生育的严重遗传性疾病; ⑥母儿血型不合不能得到存活新生儿。 (2)禁忌症
①女方患有生殖泌尿系统急性感染或性传播疾病; ②女方患有严重的遗传、躯体疾病或精神疾患;
③女方接触致畸量的射线、毒物、药品并处于作用期; ④女方有吸毒等不良嗜好。
(四)技术程序与质量控制。
1、技术程序
(1)严格掌握适应症并排除禁忌症;
(2)人工授精可以在自然周期或药物促排卵周期下进行，但严禁以多胎妊娠为目的使用促排卵药; (3)通过B超和有关激素水平联合监测卵泡的生长发育; (4)掌握排卵时间，适时实施人工授精; (5)用于人工授精的精子必须经过洗涤分离处理，行宫颈内人工授精，其前向运动精子总数不得低于20×106 ;行宫腔内人工授精，其前向运动精子总数不得低于10×106;
(6)人工授精后可用药物支持黄体功能;
(7)人工授精后14-16天诊断生化妊娠，5周B超确认临床妊娠; (8)多胎妊娠必须到具有选择性减胎术条件的机构行选择性减胎术;
(9)实施供精人工授精的机构如不具备选择性减胎术的条件和技术，必须与具备该技术的机构签定使用减胎技术协议，以确保选择性减胎术的有效实施，避免多胎分娩。
2、质量标准
(1)用于供精人工授精的冷冻精液，复苏后前向运动的精子不低于40% ;
(2)周期临床妊娠率不低于15%(周期临床妊娠率=临床妊娠数/人工授精周期数×100%)。
三、实施技术人员的行为准则
(一)必须严格遵守国家人口和计划生育法律法规;
(二)必须严格遵守知情同意、知情选择的自愿原则;
(三)必须尊重患者隐私权;
(四)禁止无医学指征的性别选择;
(五)禁止实施代孕技术;
(六)禁止实施胚胎赠送;
(七)禁止实施以治疗不育为目的的人卵胞浆移植及核移植技术;
(八)禁止人类与异种配子的杂交;禁止人类体内移植异种配子、合子和胚胎;禁止异种体内移植人类配子、合子和胚胎;
(九)禁止以生殖为目的对人类配子、合子和胚胎进行基因操作;
(十)禁止实施近亲间的精子和卵子结合;
(十一)在同一治疗周期中，配子和合子必须来自同一男性和同一女性;
(十二)禁止在患者不知情和不自愿的情况下，将配子、合子和胚胎转送他人或进行科学研究;
(十三)禁止给不符合国家人口和计划生育法规和条例规定的夫妇和单身妇女实施人类辅助生殖技术;
(十四)禁止开展人类嵌合体胚胎试验研究;
(十五)禁止克隆人。
第四篇：人类辅助生殖技术浅谈
主讲：林玫
辅助生殖技术(ART)是近几十年来发展起来的具有较大发展前景的一门新技术。是治疗不孕不育症最有效的方法。是包括妇产科、男科、遗传学、组织胚胎学、分子生物学和动物学等多学科交叉的一个新领域。广义的辅助生殖技术，包括人类对生殖的干预和促进及自我调控等方面的内容。而我们常说的辅助生殖技术，主要是指人工授精技术、体外受精-胚胎移植及其衍生技术。
一、 人工授精技术：
在针对不孕症的辅助生殖技术中，人工授精是一种简单、经济而非手术性的治疗方式，它主要是针对男方因素，比如少、弱、畸形精子症、精液不液化或液化不良、性功能障碍不能正常性交、逆行射精、不射精等等，无精症患者也可以采用供精人工授精，此外，女方阴道、宫颈畸形精液不能正常进入生殖道的以及免疫性不孕均可用人工授精助孕。
人工授精技术按照精液来源可以分为夫精人工授精(AIH)和供精人工授精(AID)。所谓夫精人工授精是指收集丈夫的精液，将其经过洗涤分离处理，通过医生操作，将洗涤处理好的精液借助人工授精管缓缓注入妻子的内生殖器官,使之达到受孕目的的一种技术;而供精人工授精则是在丈夫存在严重的男性不育问题经各种方法治疗无效而其配偶生育力正常者，为了生育目的，采用国家精子库中的精子实施的供者精液人工授精。人工授精应用于临床已有两百年历史，开始主要应用于解剖异常如严重尿道下裂，逆行射精以及阳痿、早泄等，近几十年应用于精液量减少，精子活动力低以及精液不液化的患者。随着现代生活节奏加快，环境污染，男性工作压力大、应酬多等因素的影响，男性不育的发生更显突出。目前已经有很多不育夫妇通过人工授精技术获得妊娠。
人工授精必备条件：
一是女方的输卵管至少有一侧通常且功能良好; 二是女方有正常的排卵功能;
三是男方的精液中必须要有一定的精子数量。(供精人工授精除外)从事人工授精技术必须经过省级卫生行政部门批准，患者夫妇必须提供相关证件如准生证、结婚证、身份证，不能违反国家计划生育政策。从事供精人工授精技术必须经过国家卫生部审核批准，并对授精以后妊娠者严格随访。
二、 体外受精-胚胎移植及其衍生技术
体外受精-胚胎移植及其衍生技术，一般被称为“试管婴儿”技术。现在发展的包括下列各种助孕技术：常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)，卵胞浆内单精子显微注射(ICSI),胚胎植入前遗传学诊断(PGD)，配子输卵管移植(GIFT)，人类胚胎辅助孵化(AH),卵子体外成熟技术(IVM)，生育功能的保存技术(精子冷冻、卵子和卵巢的冷冻、胚胎冷冻)等技术。
世界第一例“试管婴儿”Louis Brown于1978年7月25日在英国诞生，她的出生震惊了世界。在随后的三十年间，“试管婴儿”技术发展迅速，成功率明显提高。1985年我国台湾省出生第1例“试管婴儿”1986年香港也出生第1例“试管婴儿”。大陆首例“试管婴儿”在北医三院于1988年3月10日诞生，目前已经二十岁了，聪明、健康。目前，借助“试管婴儿”技术诞生的孩子每年数万余。许许多多各种原因不孕不育的患者通过“试管婴儿”技术圆了自己的生育梦。
“试管婴儿”并不是真正在试管里长大的婴儿，而是从女方的卵巢内取出几个卵子，在实验室里让它们与男方的精子结合，形成胚胎，然后转移胚胎到子宫内，使之在妈妈的子宫内着床、妊娠。一般正常的受孕需要精子和卵子在输卵管相遇，二者结合，形成受精卵，然后受精卵再回到子宫腔，继续妊娠。而“试管婴儿”技术是把本来见不到面的卵子和精子取出体外，受精培养，故可以简单地理解成由实验室的试管代替了输卵管的功能，因而称为“试管婴儿”。
“试管婴儿”技术适用于哪些人群?
尽管体外受精-胚胎移植技术原用于治疗由输卵管阻塞引起的不孕症，现已发现体外受精对由于子宫内膜异位症、排卵障碍、精子异常(数目异常或形态异常)引起的不孕症，甚至原因不明性不孕症都有所帮助。“试管婴儿”技术一般是针对严重不孕患者的一种治疗方法，常见的适用人群包括：
﹙1﹚女方因各种因素导致的配子运输障碍：包括输卵管梗阻，输卵管梗阻或者粘连积水经过手术疏通造口以后仍然不能受孕，手术无法解决的盆腔严重粘连导致输卵管功能不正常，反复宫外孕等等。无论是炎症、结核或子宫内膜异位症导致的输卵管梗阻或蠕动能力差、先天性的输卵管缺如还是宫外孕等原因导致输卵管切除均使精卵无法相遇，“试管婴儿”技术为这些患者架起了一座桥梁。可以说双侧输卵管不通是“试管婴儿”的绝对适应症。
﹙2﹚排卵障碍。包括多囊卵巢综合征经过反复促排卵治疗无效者，卵泡未破裂黄素化综合征经过治疗无效者等。
﹙3﹚子宫内膜异位症。子宫内膜异位症对不孕的影响是多方面的：包括输卵管可因异位症而变形、部分阻塞或因粘连而与卵巢表面阻隔;卵巢又可因异位症而移位，引起排卵障碍或黄体功能不足;以及一些免疫方面的影响等等。也可以通过该技术获得妊娠机会。
﹙4﹚男性少、弱精子症。对于因男性少、弱精子症但无法通过人工授精受孕的夫妇可以实施“试管婴儿”，而对于严重的少、弱、畸形精子症，不可逆的梗阻性无精子症，排除遗传缺陷疾病所致的生精功能障碍，体外受精失败，精子顶体功能异常等的患者，可以选择体外实施卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术受精。
﹙5﹚不明原因的不育。 (6)免疫性不孕。
什么人群不适宜“试管婴儿”技术?
1、女方有重要的脏器功能异常者，如心脏、肝脏、肾脏疾病等而不能经受妊娠及分娩。
2、夫妇的任何一方患有严重的精神疾患、泌尿生殖系统急性感染、性传播疾病。
3、女方有卵巢、子宫或乳腺恶性肿瘤者。
4、因先天性或后天性因素子宫缺如或严重受损不能接受胚胎着床、生长者等。
5、患有《母婴保健法》规定的不宜生育的、目前无法进行胚胎植入前遗传学诊断的遗传性疾病。
6、夫妇任何一方具有吸毒等严重不良嗜好。
7、夫妇任何一方接触致畸量射线、毒物、药品并处于作用期。
体外受精-胚胎移植技术流程大致包括：
1、术前常规检查：明确不孕的病因，了解是否适合做“试管婴儿”。 2.药物诱发排卵：正常状况下，下丘脑-垂体与卵巢的联系通过激素调节，最终导致每个月卵巢仅产生一个卵泡，而为了获得一定数目的卵子，可以通过抑制脑垂体自然的活动，同时使用药物刺激卵巢内产生一定合理数目的卵泡，以获得适宜受精的卵子。这就是“控制性促排卵”。目前促排卵方案很多常见的有长方案、短方案、抑制剂方案等。由于经过药物抑制脑垂体分泌，因此，取出卵子后必须要及时补充适量的孕激素以维持黄体功能，一般黄体酮的肌注用量在40-80mg不等，持续用药至妊娠后胎盘形成。(这里提醒我们妇科大夫们，当你看到患者用如此大量的黄体支持，请不要奇怪)。
3、B超监测卵泡发育：超声检查可测定卵泡的成长和数目，每一个卵泡内含有一个卵子。当卵泡足够大时，在超声引导下经阴道取出卵子，男方同时进行精液采集并经过实验室处理。
4.体外受精：卵子收集后放在一种特殊的培养液里，每个卵子在放入培养皿同精子结合以前，需要在显微镜下对其加以检查和确认。同时，来源于新鲜或冷冻精液的精子也需要特别地处理。
一般而言，卵子取出后4-6小时进行授精，受精过程的完成大概需12-15小时。授精后第二天，在显微镜下观察，有两个原核和两个极体则认为受精成功，形成合子。成熟卵母细胞的受精率约为65%-80%。对于严重少精症、弱精症、梗阻性无精子症的有效方法是卵胞浆内单精子显微注射受精，它是将单个精子直接注射入卵母细胞浆中，绕过了透明带和卵间隙等环节使之受精。无精症的患者如果可以通过附睾或睾丸取精，再进行卵胞浆内显微注射也可以获得自己的孩子。
5.胚胎培养：正常受精卵被移入新鲜培养液中，放入培养箱。通常情况下，授精后22-24小时受精卵分裂为2细胞，授精后36-50小时分裂成4细胞，48-72小时可以观察到8细胞胚胎。没有受精的卵子、退化的卵子、异常受精卵子均予以丢弃。
6、胚胎移植：一般在取卵后第三天到第五天进行胚胎子宫腔内移植。
7、移植后继续用药物支持黄体，一般移植后十四天验尿HCG或验血β-HCG即可以知道是否妊娠了，移植后二十一天左右可以在阴道B超下观察到胚胎以确定临床妊娠。 “试管婴儿”助孕技术的妊娠率及其安全性：
可以说，“试管婴儿”助孕技术的妊娠率及其安全性从该技术出现以来至今，一直都是研究的热点。体外受精-胚胎移植技术每一周期的临床妊娠率从过去的25%-30%已经提高到35%-40%，有的辅助生殖中心临床妊娠率可以达到45%-55%左右，相对于正常夫妇每一自然周期行房的自然妊娠率15%-20%左右而言，这是一个很令人振奋的消息。目前，尚没有明确数据表明，经过“试管婴儿”技术生育的孩子其先天畸形率有增加，因此，“试管婴儿”技术对于不孕不育夫妇是安全有效的。需要注意的事，由于女性卵巢储备功能随年龄呈逐渐下降趋势，因此，年龄是“试管婴儿”技术不可逾越的“鸿沟”，而高龄夫妇生育的不良妊娠率及后代畸形风险增高，因此，建议不孕不育夫妇应该积极诊治，不要讳疾忌医，当其他助孕方法失败时，及时考虑借助“试管婴儿”技术受孕。卵巢功能良好是进行辅助生殖技术的前提，由于目前我国对于供卵有较严格的限定，代孕则是禁止的。因此，女性有一个良好的卵巢功能是助孕的前提，在此，希望我们的妇科手术大夫们，在处理卵巢或附件的手术中，尽量少损伤卵巢。在患者还有生育要求时，尽量保留子宫，尽量保护卵巢，当然，有指征者除外。另一方面，虽然“试管婴儿”技术已经日渐成熟，但该技术仍然存在一些可能的风险，包括遗传学方面的风险、促排卵相关风险、伦理风险等，因此，该技术适用于有需要的人群，但决不宜滥用。国家卫生部先后出台了多个文件规范该技术的实施，对实施人类辅助生殖技术的中心均必须通过国家卫生部专家组的检查评审，经评审合格，方准许实施该技术。
影响辅助生育技术成功率的主要因素
年龄，33-35岁后生育能力开始下降;遗传因素，多数早期流产胚胎存在遗传缺陷;
移植胚胎的选择;团队的训练和质控;培养系统的质量;实验室环境。
辅助生育治疗中涉及的伦理学问题
有利于患者的原则。例：有义务告知可供选择的治疗手段、利弊、及其风险;对配子、胚胎拥有的选择处理权。 社会公益原则。如：计划生育政策;非医学需要的性别选择，不得实施生殖性克隆;禁止将异种配子和胚胎用于ART。 保密原则。如：互盲;为捐赠者保密;捐赠者的承诺义务和不可查询后代信息。 严防商业化的原则。如：掌握适应症;禁止买卖精子、卵子、胚胎，应以捐赠助人为目的。 伦理监督原则。由伦理委员会监督，成员资格、审查、咨询、论证和建议。 超排卵的临床应用是近年来辅助生殖关注的重点问题。促排卵的药物和方案在不断地更新和完善中，针对不同患者使用何种药物及何种方案促超排卵，需全面考虑患者的年龄、身体情况，患者的卵泡发育模式，治疗目的，各种药物作用的差异和患者对药物的反应性，从而在实际操作中根据患者的具体情况而制定的实施个体化的治疗方案。
第五篇：人类辅助生殖技术的妊娠结局
“人类辅助生殖技术的妊娠结局”临床指南解读
人类辅助生殖技术(assistedreproductive technology，ART)是指对配子、胚胎或遗传物质进行体内外操作而获得新生命的技术，包括人工授精(artificial insemination，AI)和体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryotransfer，IVF-ET)及其衍生技术。目前常规用于临床的方法和技术有：诱导排卵或超促排卵、精液处理、体外受精(in vitro fertilization，IVF)、卵母细胞胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection，ICSI)、胚胎冷冻与复苏、辅助孵化、未成熟卵体外培养、胚胎植入前遗传学筛查(preimplantation genetic screening，PGS)及胚胎植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis，PGD)等。
一、与男性不育因素相关的生殖结局
所有患严重少精子症或无精子症的男性，都应在接受IVF/ICSI治疗前进行遗传学及临床咨询、染色体核型分析和Y染色体微缺失检测(证据等级/推荐强度Ⅱ-2A)。所有患不明原因梗阻性无精子症的男性，都应在接受IVF/ICSI治疗前进行与囊性纤维化相关的遗传学检测(证据等级/推荐强度Ⅱ-2A)。 【解读】约50%的不孕症与男性精液异常有关。4.6%的少精子症和13.7%的无精子症是由于染色体异常引起，其中以性染色体异常和常染色体易位最常见。染色体异常男性的精子更可能携带异常遗传物质，导致胚胎具有父源性异常遗传物质。 与严重少精子症或无精子症相关的遗传异常可能导致不良生殖结局。大多数梗阻性无精子症表现为先天性双侧输精管缺如，部分病例与囊性纤维化跨膜调节基因位点(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator，CFTR)突变有关，此类患者多采用外科手术获取精子用于IVF/ICSI。CFTR突变引起的双侧输精管缺如的男性，如果配偶为携带者，则其后代可能患轻度囊性纤维症。Y染色体微缺失的男性，其子代会出现严重的生精障碍，或伴有骨骼及其他结构异常。畸精子症患者的子代虽无明确的先天性异常，但胚胎非整倍体的发生率可能升高。 囊性纤维化是一种可以累及全身多个系统的常染色体隐性遗传病，白种人中常见，而在亚洲黄种人中较少见。该病由CFTR基因突变所致，可导致男性先天性双侧输精管缺如、单侧输精管缺如和精子质量异常。我国该病发病率很低，故对于是否需要常规检测CFFR基因突变，还有待证据积累。
二、与女性不孕因素相关的生殖结局
有不孕病史的女性，即使未采用ART而妊娠，不孕病史即是产科并发症和不良妊娠结局的独立危险因素(证据等级/推荐强度Ⅱ-2)。 【解读】 有不孕病史的女性，即使通过自然的方式获得单胎妊娠，其发生子痫前期、胎盘早剥、剖宫产、阴道手术助产的风险均比无不孕病史者升高2倍，前置胎盘的发生率升高5倍。女性随着年龄增长，不仅生育能力下降，而且不良妊娠结局的发生率也增加。肥胖影响生育，同时也是不良妊娠结局的独立危险因素。
三、与ART相关的妊娠结局和对子代的影响
1.多胎妊娠的风险：多胎妊娠是不良妊娠结局的高危因素。不孕夫妇应全面咨询并了解ART所致多胎妊娠的重大风险(证据等级/推荐强度Ⅱ-2A)。 【解读】 经诱导排卵或超促排卵治疗后的多胎妊娠率分别为5%和40%。大多数经ART获得的双胎妊娠是双绒毛膜性。经ART获得单卵双胎(大多数为单绒毛膜性)的发生率为0.9%~2%，而自然妊娠中单卵双胎的发生率为0.4%。移植第5天的囊胚比移植卵裂期胚胎更易发生单卵双胎，发生率分别为6%和2%。多胎妊娠的围产儿死亡、胎儿生长受限、脑性瘫痪和先天性异常的比例均高于单胎妊娠，在单绒毛膜性双胎妊娠中更多见。多胎妊娠母体常见并发症有贫血、妊娠期高血压疾病和产后出血等，而且分娩期的风险较高。除了医疗并发症外，多胎的经济负担和社会心理负担也加重。
与自然妊娠所获得的双胎相比，三胎及以上多胎妊娠减胎后的双胎，其胎儿生长受限、早产、新生儿低出生体重或极低出生体重的风险升高。 2.降低多胎妊娠率的策略：预计有良好预后的夫妇，可推荐使用选择性单胚胎移植，更能体现其优势(证据等级/推荐强度Ⅱ-2A)。为了降低多胎妊娠率，强烈建议推行促进选择性单胚胎移植等技术的健康保健政策(证据等级/推荐强度Ⅱ-2A)。
【解读】 因为多胎妊娠的母儿风险增高，故应努力降低多胎妊娠率。降低多胎妊娠率的策略之一是减少移植胚胎的个数，但同时有妊娠率下降的风险。2009年，Pandian等比较了选择性单胚胎移植和双胚胎移植的活产率，结果显示，1个周期的选择性单胚胎移植活产率低于双胚胎移植，但1个新鲜周期选择性单胚胎移植与1个冷冻周期选择性单胚胎移植的累积活产率与1个周期的双胚胎移植相比无差异。年龄≥40岁的女性，建议行双胚胎移植。任何年龄组移植胚胎个数>2个时，活产率均无差异，故不鼓励移植胚胎个数≥3个。策略之二是严格掌握诱导排卵和超促排卵的适应证、药物选择和剂量。策略之三是行减胎手术。但手术有导致妊娠丢失的风险，对于接受ART的夫妇来说难以接受。因此降低多胎妊娠率的策略重点应放在前2项。
3.单胎妊娠的风险：经ART所获得的单胎妊娠，其早产和低出生体重儿的发生风险增高。诱导排卵治疗可能会增加低出生体重儿的发生风险。不孕夫妇应就与治疗相关的风险进行咨询(证据等级/推荐强度Ⅱ-2B)。
【解读】 经ART获得的单胎妊娠与自然妊娠相比，不良妊娠结局的风险增加，应加强产科监护。 诱导排卵或超促排卵使母亲暴露于促性腺激素的刺激，体内超生理量的雌激素以及体外培养等操作，均对胚胎的生长环境产生负面影响。与使用自体卵相比，使用供卵者早产与新生儿低出生体重的风险增高。精子来源(射精、睾精、附睾精)对出生体重无影响，ICSI技术与早产、新生儿低出生体重等不良妊娠结局也无明显相关性。
4.冷冻周期胚胎移植：越来越多的证据显示，冷冻周期胚胎移植的妊娠结局要优于新鲜周期胚胎移植。因此，对预计有良好预后的夫妇，推荐选择性单胚胎移植，必要时使用冷冻周期胚胎(证据等级/推荐强度Ⅱ-2A)。
【解读】 与新鲜周期胚胎移植相比，通过冷冻周期移植获得的新生儿出生体重较高，小于胎龄儿和早产的发生率均较低，活婴出生体重相差90.9 g。原因可能为冷冻周期移植无需进行促排卵治疗或所需促排卵药物的剂量较低，子宫内膜环境相对较好;也可能经冷冻程序保存下来的胚胎质量更好。
5. PGD：不孕夫妇是否采用PGD，应综合考虑利弊，包括获得异常胎儿的风险、医疗风险以及经济负担(证据等级/推荐强度Ⅲ-B)。PGS是否能改善妊娠结局，目前尚无定论。与患者讨论PGD时，应阐明还没有足够信息明确胚胎单细胞活检的长期影响(证据等级/推荐强度Ⅰ-C)。
【解读】 PGD通常采取对卵裂期胚胎进行卵裂球活检或对囊胚期胚胎进行滋养层活检。传统上采用荧光原位杂交技术行染色体核型分析，近年来采用的比较基因组杂交技术可进行全基因组分析。PGS的指征包括女方高龄、反复IVF失败、反复流产等。 6.其他产科结局：ART与子痫前期、前置胎盘、胎盘早剥、产前及产后出血的发生率升高相关。
【解读】 ART的应用可能导致种植异常、胎盘形成异常，与某些产科并发症相关。但未发现人工授精与死胎、胎儿生长受限、子痫前期和胎盘早剥等并发症相关。小样本研究发现，使用供卵者发生子痫前期的风险高于使用自体卵者。
7.对子代的影响：任何ART技术都应关注胎儿出现先天性结构异常的风险(证据等级/推荐强度Ⅱ-2B)。经ART获得妊娠后，推荐在妊娠18~22周时行超声检查胎儿结构(证据等级/推荐强度Ⅱ-2A)。经ICSI获得的妊娠染色体畸变的风险增加，建议行产前诊断(证据等级/推荐强度Ⅱ-2A)。
【解读】 目前的研究已涉及ART与胎儿结构、染色体和基因印迹异常的关系。有不孕病史者无论是否通过ART而妊娠，其新生儿出生缺陷的发生率均高于无不孕病史自然妊娠者。与ART相关的胎儿结构异常有先天性心脏病、食道闭锁、肛门闭锁和生殖器官畸形等。经校正母亲年龄和产次，IVF组与自然妊娠组染色体异常的比例相似，但ICSI组染色体异常的比例明显增高。
对通过ART获得的子代随访至2~5岁，发现儿童神经和行为发育存在负面影响。对ICSI组和自然妊娠组的儿童随访至10岁，认知和运动发育未显示差异。Brinton等小样本研究显示，儿童期肿瘤的发生率与促排卵药的使用无相关性。PGS技术与儿童2岁前的精神、心理或行为异常无关，但与神经系统测试评分偏低相关。一项随访至4岁的研究显示，PGS单胎组未发现异常，而PGS双胎组神经系统测试评分降低。因此，PGS长期结局目前尚不清楚。
四、总结
大多数经ART获得的妊娠无并发症发生，并能够获得健康活婴。但随着试孕时间延长，接受ART的比例升高，围产期相关并发症的发生率也随之升高，目前尚不清楚其原因是源于患者夫妇的不孕不育因素还是源于特殊的ART。ART可能与某些不良妊娠结局和子代健康问题相关，但需要更多的证据支持。ART最主要的问题是多胎妊娠，越来越多的证据支持进行选择性单胚胎移植。
文章来源：《中华围产医学杂志》2014年第17卷第9期