临床常见标本采集

2022-07-22

第一篇:临床常见标本采集

临床常见标本的采集方法

一、静脉血标本的采集

1.操作者先洗手或用手消毒剂喷雾后揉搓待干;2.根据受检者检验项目选择真空采血 管;3.在穿刺点上方约6cm处系紧压脉带,嘱受检者紧握拳头,使静脉充盈显露,进行皮肤消毒;4.取下双向采血针头无菌帽,以左手拇指固定静脉穿刺部位下端,右手拇指和食指持采血针柄,使针头与皮肤呈30°角沿静脉走向快速刺入皮肤,然后呈5°角向前刺破静脉壁,进入静脉腔。见回血后,将针头顺势深入少许即可;5.将采血针的另一端刺入所需的真空采血管盖中央的胶塞中,血液自动流入试管。如需多管血样,将松开压脉带,嘱受检者松拳,用消毒干棉球压住穿此处,快速拔出针头,嘱受检者按压局部数分钟;6.取下采血针放入利器盒,将所采血样分别贴上相应的条码,抗凝血需立即颠倒混匀,及时送检。

二、动脉血气标本的采集

1.受检者取坐位或卧位,休息5min,应正常呼吸,避免憋气及过度通气,以免影响检 查结果;2.选择动脉血管后,常规皮肤消毒,用动脉采血针(内有肝素)垂直刺入血管,针管自动吸入0.5ml后,用消毒干棉球压住穿刺处快速拔出针头。局部按压5min以上,防止血肿形成;3.拔出后立即将针头用橡皮封闭,隔绝空气。随即挫动注射器,使血液与肝素充分混匀,立即送检。送检过程中要防止针头橡皮脱落,造成空气直接进入注射器。如有不慎脱落,必须如实向检验人员说明情况,并告知临床医生,以免影响检验结果和临床诊断。如确因不能及时送检,可将标本短时间内保存于4℃冰箱中。

三、生化检验标本的采集

注意病人生理因素对检验结果的影响,如年龄、性别、体型、情绪、运动、体位改变等。研究表明,CH、ALP、UA等项目易受年龄的影响,性激素的测定男女差别巨大。受情绪影响较大的项目有GLU、GH、CA、Cor、PRL等。另外,血清中CH、ALB、ALT、ALP、AST、TG、AMY及血清Ca等项目受体位改变因素影响较大。还应注意饮食对测定结果的影响,包括病人是否真正空腹及不进流食。空腹一般控制在12—16h最佳,过长或过短对某些测定结果可产生影响,如GLU、BUN、CR、ALB、UA、TG、电解质、肝功能等。个别项目需病人控制饮食,如血脂测定前最好连续素食3天,以防产生假性结果。注意药物对测定结果的影响,目前以证明至少有100多种药物对多项生化检验结果有影响,如利胆剂可使血清CH升高;肝素使血清CH降低,APTT显著升高,大剂量的维生素C对氧化酶法测定血清GLU有负干扰,CH、TG的Trinder反应产生负干扰,咖啡因造成血GLU、CH增高,冠心平导致血清中TG和LDH增高,大剂量青霉素可使血清CK、ALT、CR升高而BIL降低等。尽可能在标本采集前2d停服药物,却因治疗需要无法停药者,应在检验申请单上注明用药种类和剂量,以备参考。

此外,对采样时间要求严格的检验项目,应详细告诉病人真确记录时间,何时采取标本等事宜,如24h尿蛋白和电解质测定,糖耐量试验等。对于如激素易受生理因素影响的项目,需多次测定时,最好选择每天的同一时间采样,以便减少昼夜变化的影响,便于比较和分析。

四、葡萄糖耐量试验标本的采集

OGTT检查前三天停用胰岛素、肾上腺皮质激素等药物,可正常饮食(每天碳水化合物量一般控制在250—300g)。试验前一天晚上餐后不再进食(空腹8—124h)。标本采集后应立即送检,切忌不同时间点的多份标本采集后一起送检。

五、血液流变学标本的采集

采集前三天停用具有溶栓抗凝作用和降脂的药物,女性避开月经期。采集前空腹12h以上,前一天晚上低脂饮食,患者处于静息状态。避免在输液过程中采血,禁止在输液手臂同侧采集血液,抽血时病人取坐位肘部静脉采血。采血后立即送检并检测,最好在4h内完成,存放于4℃冰箱可延长至12h.血样不宜在0℃以下存放,以免RBC发生破裂。

六、疟原虫标本的采集

间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至十余小时采血为宜,恶性疟患者应在发作开始时采血。怀疑疟疾的患者一次检查阴性应多次复查,必要时骨髓涂片检查疟原虫。采集的静脉血标本应尽快送检,标本应及时制成学膜片。血膜片可于室温中保存,尽早检查。

七、微丝幼标本的采集

以晚上22时至次日凌晨2时病人从睡眠中醒来后,立即采血为宜。如夜间采血确有困难的病人可采用诱出法,即在白天口服海群生2~6mg/kg体重,15~30min后采集血液。采用试管浓集法:取含有0.4ml枸橼酸钠的真空试管(黑色盖子),采集静脉血2ml注入试管,轻轻颠倒混匀6~8次,防止标本凝固。标本采集后应尽快送检,并及时制成血膜片尽快检查。检验后的剩余血液可以放在冰箱保存3d

八、乳酸测定标本的采集

检测前三天,待检者不要做剧烈运动,抽取标本前禁食12h.。在患者处于安静状态后2h采集标本,并嘱患者不可用力握拳。

九、血药浓度监测标本的采集

对于治疗药物的检测,应根据药代动力学选择服药后的最适时间抽血检测。欲了解药物的长期效应,通常在药物的第5个半衰期(药物的稳定期)采血;欲了解药物的峰值效应,通常在用药1~2h采集(地高辛和毛地黄毒苷为6~8h)。

十、激素检测标本的采集

许多激素在一天24h内的分泌量不同的。如可的松在血液中的峰值为早晨4~6时,GH、LH和FSH均以阵发性方式释放。在测定此类激素时,有必要采集连续时间间隔的数份血标本,以其中间值为测定值;而血清中肾素活性在体位由卧位变为站位时,将出现明显增高。ACTH分泌峰值期在6~10时,低值期在0~4时,波动幅度为150%~200%。妇科激素采血前建议静坐30min,标本采集前需要停止类固醇药、甲状腺素、ACTH、雌激素或性腺激素的治疗,否则会影响检测结果。抽血检查时患者和医生应准确把握月经周期,以便解释检验结果。

十一、尿液分析表本的采集

患者留取标本前24h禁止服用维生素C等药物,勿食深色素食物。禁服磺胺类药物,禁止加甲醛等防腐剂。嘱患者清洁尿道口及周围皮肤,防止粪便、清洁剂、粉剂、油类及有色物质等污染尿液。最好留取晨尿或“二次晨尿”(清晨排空膀胱,空腹收集2h的尿液),也可随时留取中段尿,尿量不少于10ml。尿标本2h内送检,避免强光照射。

十二、尿三杯试验标本的采集

取尿杯3个,标明

1、

2、3。于清晨第一次排尿时,分为三段排于3个尿杯中,每杯不少于5ml。第一杯留取最前段部分尿液,第二杯留取中段尿液,第三杯尽量留取最后段部分尿液。注意尿液要一次性排出,中间不可间断,留尿后立即送检。

十三、尿红细胞位相标本的采集

留取标本前病人按常规尿检准备。留取早晨第一次尿的中段尿(晨尿)10ml于洁净容器中(必要时清洗外阴),2~8℃冷藏保存。早上8时到检验科时,留取新鲜的中段尿10ml于洁净容器里(必要时清洗外阴),两次留取的尿液一并及时送检。注意留尿前不要喝大量的水(B超以后的尿不能用)且保证尿样不受污染(女性以避开行经期)。

十四、24h尿蛋白定量标本的采集

留取标本前病人按常规尿检准备。准备一洁净、无污染的干燥盛尿大容器,从检验科领取5ml甲苯作为防腐剂。具体步骤:1.在收集标本的第一天(如早晨7时),病人排空膀胱中的的尿液,弃去不要。此后,连续收集24h的全部尿液排入大容器中。留取第一次尿液时把5ml甲苯一并倒入;2.在结束收集标本的第二天(如早晨7时),病人排空膀胱中的尿液,收集于盛尿容器里;3.准确测量并记录总尿量;4.充分混匀全部尿液,取出约5ml于常规尿管中,贴上标识,送检验科检测,其余尿液弃去不要。注意24h留尿完毕后,须将全部标本充分混匀,准确记录尿量,再取出约10ml检测标本。

十五、大便常规标本的采集

必须使用洁净、干燥、无吸水性的的容器,禁止用棉拭子、纸巾、纸盒等留取或存放。尽量选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便,外观无异常的粪便必须从表面、深处和粪端多处获取标本。检查绕虫卵时,需用软黏透明纸拭子,在清晨排便前自肛门周围拭取标本,也可用棉拭子拭取,但必去立即送检。检查痢疾阿米巴滋养体,应于排便后迅速送检,立即检查。冬季采取保温措施。

十六、精液常规标本的采集

检查前禁欲(性生活、手淫及遗精)3~7d,已明确精子形成低下时,应禁欲7d后再收集标本。排精次数与禁欲时间可能对检查结果产生一定的影响,有报道禁欲时间过长,精液量虽然增多,但精子活力有所下降。留取标本前排净尿液,必要时清洗外阴部。用手淫或其他的方法,将一次射出的全部精液收入洁净、干燥的加盖容器内,有报道分布射精收集的各段精液分析中,最前段精液中精子的密度最高,以后各段渐依次减少,故精液采集时应收集全部标本。勿使用可能被酸碱污染或对精子产生影响的容器,乳胶或避孕套内含有抑制精子活力的滑石粉,应禁止使用。标本送检时需正确注明采样时间,30min内保温送检。精液常规检查如果出现一次异常结果,应隔1周后再复查,连续检查2次至数次,间隔应大于7d不能仅凭一次检查结果作出判断。

十七、常见临床微生物标本的采集

微生物检验工作的成败除了实验室的能力和效率外,很大程度上要看标本采集和送检环节的质量。由于标本的采集和处理不当,可能造成检验结果的假阳性和假阴性。因此微生物标本的采集应遵循如下原则:1.尽量在抗菌药物使用前采集标本。采集标本前应至少停药3d.如病人不能停药,应在下次抗生素使用前采集。2.标本采集时,应严格执行无菌操作,减少或避免机体正常菌群及其他杂菌的污染。3.标本采集后应立即送至微生物实验室,放置时间过长会影响检验结果。如不能立即送检,一般应放2~8℃冷藏的条件下保存(血液培养采集后若不能及时送检,可于室温保存)。某些菌种(淋病奈瑟均、脑膜炎奈瑟菌、嗜血杆菌、肺炎链球菌等)。不仅要及时送检,而且再送检的过程中要注意保温。4.盛标本的容器必须经灭菌处理(到微生物实验室领取),但不得使用消毒剂和酸类剂处理,以免残留物影响细菌的生长。送检时,标本切勿污染容器的瓶口和外壁,防止污染和传播。5.送检标本应注明标本来源和检验目的,以正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。 1. 血液及骨髓标本的采集:

采血的部位多为肘中静脉,疑为亚急性细菌性心内膜炎时,以肘动脉和股动脉采血:为宜。切忌在静脉点滴抗菌药物的静脉处采血。采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入血培养瓶前,应更换针头或过火消毒。血培养瓶不用时放常温即可,不必放在冷藏室。

采血次数及间隔时间:急性发热性疾病(如脑膜炎、细菌性肺炎等)需尽快进行抗菌治疗。急性骨髓炎、化脓性关节炎等需要紧急手术的患者,立即从两臂分别采取2份标本。对感染性心内膜炎的患者再24h内采血3次,每次间隔不少于30min,必要时次日再作血培养2次。对发热原因不明者两次抽血间隔为60min,必要时于24~48h后再抽血2次。国外资料统计,1次血培养菌血症的检出率为80%,2次可达90%,3次可达99%.每次采血量成人5~10ml,婴幽儿为1~2ml。培养基:血液为10:1,以稀释血液中的抗生素、抗体、补体、溶菌酶等杀菌物质。有人主张对于长期接受抗菌药物治疗的病人,培养基:血液应大于20:1.骨髓一般采集1~2ml 血标本的采集和培养各环节必须严格无菌操作,以免发生标本的污染。同时,不可将血培养中出现的不常见细菌或一些皮肤表面的正常细菌随意的判断为污染菌。因为对一些大量使用抗生素、免疫制剂以及机体免疫力降低的病人,条件致病菌或非致病菌均可引起菌血症、败血症。两次血培养结果为同一种细菌,患者2~3周后血中抗体效价明显升高,应该作为菌血症的病原菌处理。

厌氧菌培养应作为血培养检查的常规方法,特别是疑为厌氧菌感染者。同时还必须注意L型细菌的培养。 2. 脑脊液标本的采集:

对患者进行腰椎穿刺,采集脑脊液3~5ml,盛于无菌试管和血培养瓶中送检。脑脊液标本尽量在抗生素治疗前采集,穿刺过程中应严格无菌操作,防止污染。由于脑膜炎奈瑟氏菌离体后容易自溶,流感嗜血杆菌及肺炎链球菌容易死亡,故标本采集后应立即送检微生物实验室。脑膜炎奈瑟氏菌等许多细菌对外界抵抗力比较弱,应注意保暖、防止干燥和日光直射。为防止采集的标本浑浊,最好进行“床边接种”,否则影响培养的阳性率。为了提高细菌的培养的阳性率,可在接种血平板、巧克力平板的同时,接种血液增菌培养基。 3. 尿液标本的采集:

中段尿采集法是临床最常见的采集方法,以晨尿为宜。女性病人在采样前应先用肥皂水或0.1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口:男性病人翻转包皮,用肥皂水清洗尿道口。对留置导尿者,可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁,用针管的细针头斜穿入管壁采集尿液:或拔去闭式引流的集尿袋,弃去导尿管前端的尿液,留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。切忌直接从集尿袋的下端关口留取标本。

确定菌尿是来自肾脏,可通过尿管采集肾盂尿。充分冲洗膀胱,以最后一次冲洗尿作为对照,然后将导尿管插入输尿管,做好左右标记,收集3次尿液。如果尿管细菌数比对照尿细菌数多或第三次尿比第一次多,则该细菌可能来自肾脏:相反,第一次尿菌数多余第三次尿菌数,则可能来自膀胱。 尿厌氧菌培养或儿童婴幼儿的中段尿留取困难,必要时可经耻骨上穿刺收集无污染的膀胱内尿液。厌氧菌的培养尚需在取得尿液后,针头插于橡皮塞上立即送检。

尿液标本采集和培养最大的问题是杂菌污染,所以应严格无菌操作。耐心细致的向病人说明如何留取中段尿。室温下,尿标本耽搁稍久可致尿内的细菌明显增高,影响病原菌和污染菌的区分。不能立即送检者,可暂时放4℃冰箱保存,但不能超过8h。此外,应在用药前或停药3d后采集尿液,因为治疗所用药物多数均通过尿液排泄。尿液标本不得加入防腐剂和消毒剂,否则影响细菌的培养结果。 4. 下呼吸道标本的采集:

合格痰标本的采集是取得正确检验结果的关键。临床微生物工作人员应耐心指导患者如何采集标本,要求采集肺深部的痰液(不是唾液),一般以晨痰最好。清水反复漱口后用力咳嗽,从呼吸道深部用力咳出新鲜的痰液于无菌容器内送检(尽可能的减少口腔正常菌群的污染)。痰量少者,可用4℃10%NaCL溶液雾化吸入导痰。

支气管扩张症或支气管有相通的巨大空洞的患者,清晨起床后进行体位引流,可采集大量痰液;对咳嗽乏力和昏迷病人,可用吸痰管经鼻腔或口腔抵达气管内吸引痰液;用纤维支气管可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌,但应避免咽喉部正常菌群的污染;双侧肺部感染伴人工气道(如气管切开或气管插管)的患者,可用吸痰管经人工气道插至叶支气管水平吸引痰液;对重症、难治、有免疫缺陷或因厌氧菌引起的医院内肺部感染,必要时可采用环甲膜穿刺经气管吸引(TTA)、经胸壁穿刺肺吸引(LA)经纤维支气管或人工气道作防污染双套管毛刷(PSB)或防污染支气管肺泡灌洗(PBAL),采集无口咽部菌群污染的痰液,进行精确的感染病原学诊断。

痰液标本不能及时送检者,可暂置4℃冰箱存放。如室温下耽搁数小时,使定植于口咽部的正常菌群过度生长,肺炎链球菌、嗜血杆菌等苛氧菌的检出率将明显下降。 5. 咽拭子及鼻咽拭子标本的采集:

咽部是呼吸和食物的通道,晨起采集最好。医生采集标本时应戴口罩和手套,以防传染。病人先用清水漱口,由检查者将舌向外拉,使悬雍垂尽可能向外牵引,将咽拭子越过舌根,到咽喉壁或悬雍垂的后侧反复涂抹数次,避免接触口腔和舌黏膜,尽可能减少污染。检查脑膜炎奈瑟氏菌或白喉棒状杆菌时,如咽部有明显发红或有伪膜存在,应在局部涂抹取材后,小心地将棉拭子立即放入无菌管中。对局部无病变或带菌者检查,应于咽部或扁桃体上用棉拭子涂抹。采集扁桃体部位的标本时,应以小窝为宜;高度疑似白喉时,应在咽喉部深层组织中采集标本,而表面渗出液多为类白喉棒状杆菌和葡萄球菌。标本的采集虽然在时间上无严格控制,但最好在抗生素治疗前采集。采集前数小时不得用消毒药水漱口或涂抹病灶居部。标本采集后应立即送检。因为苛氧菌(如肺炎链球菌、嗜血杆菌、卡他布兰汗菌)离开人体后容易死亡。

6. 化脓及创伤感染标本的采集:

对采集标本的部位,应用无菌生理盐水洗净病灶表面的污染菌,对皮肤粘膜充分消毒。采集标本前,病灶部位应避免使用抗菌药物和消毒剂。如果局部伤口已用磺胺类药物和抗生素治疗,则应在培养基内加入相应的物质(如青霉素酶、对氨基苯甲酸等),以提高细菌培养的阳性率;创面出血敷用药物2h以内,烧伤在12h内,不应采集标本,此时细菌培养阳性率较低。

开放性脓肿及脓性分泌物的采集:首先用无菌生理盐水擦洗病灶表面。用无菌棉拭子采取脓液及病灶深部的分泌物,置培养基送检。如为瘘管,应在无菌条件下采取组织碎片于无菌试管中送检。

闭锁性脓肿的采集:对病灶周围的皮肤及黏膜表面先用2.5%~3.0%的碘酊消毒,再用75%的酒精脱碘,用无菌注射器穿刺抽取内容物立即送检。疑为厌氧菌感染时,取材后立即排空注射器内空气,同时将针头插入橡皮塞中立即送检。

大面积烧伤创面分泌物的采集:由于创面的部位不同,细菌的种类也不同,应用无菌棉拭子采集多部位的分泌物,分别送检。有时也可将浸有脓液的最内层敷料放入无菌平皿内送检,或放入无菌肉汤中送检。

对怀疑放线菌感染的标本,常用无菌棉拭子挤压瘘管,选取流出脓液中“硫磺样颗粒”,盛于无菌试管中送检;或将无菌纱布条塞入瘘管中,次日取出送检。

标本采集后应立即送检,否则应放冰箱保存,以防杂菌污染。另外采集标本时应注意观察分泌物的形状、颜色及有无恶臭味等,作为培养和鉴定提供依据。 7. 粪便标本的采集:

大多采用自然排便采集法,即排便后,挑取有脓血、黏液、糊状、米泔样等性状异常部分的粪便,盛入无菌广口瓶中送检。不能立即送检者应放入Cary-Blair运送培养基中保存。对不易取得粪便或排便困难的患者或婴幼儿,可采用直肠拭子采集法。将拭子前端用无菌甘油水湿润,,插入肛门4~5cm处(幼儿2~3cm),轻轻旋转擦取直肠表面的黏液后退出,置培养基中送检。腹泻病人应尽量在急性期用药前采集(3d以内)。以提高细菌培养阳性率。怀疑厌氧菌感染(主要是艰难芽孢梭菌)时,最好排便后立即培养。尽管粪便标本中有很多杂菌,但采集时也应放入无菌瓶中送检,以免影响致病菌的分离及误诊。在不得已时可将粪便至于无菌容器内4℃保存,但不能超过24h.不能采用冷冻-20~-80℃保存,会使活菌数量显著减少。

8. 胆汁的采集:

无菌操作,有专职医师用导管做十二指肠引流,采取的胆汁分为A、B、C三部分。A液来自总胆管,橙黄或金黄色;B液来自胆囊,黄绿色;C夜来自肝胆管,柠檬色。因引流是导管通过口腔,易污染口腔中的正常菌,一般认为B液适宜做细菌培养。行胆囊造影术,可同时采集胆汁,即胆囊穿刺法。另外,在进行胆囊及胆管手术时,可由总胆管、胆囊直接穿刺采集胆汁。这两种操作方法不易污染,适宜作细菌培养。采集标本后立即送检,否则应放入4℃冰箱保存。由于胆汁细菌培养阳性率较低,在接种血平板及其他平板的同时应接中肉汤培养基增菌,待肉汤浑浊后再转种相应的平板,以提高培养阳性率。

9. 穿刺液标本的采集:

穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等,由临床医师行穿刺术抽取。标本的抽取,在病人用药前或停药1~2天后行无菌操作,防止污染。胸腹水可抽取5~10ml,心包液、关节液、等抽取1~5ml,放入无菌瓶或肉汤曾均培养基中,混匀后立即送检。不能立即送检的可暂时置于4℃冰箱保存。怀疑厌氧菌感染时,抽取后立即排空注射器内空气,针头插入橡皮塞中立即送检或床边接种。

10. 生殖道标本的采集:

生殖器官是开放性器官,采集标本过程中应严格无菌操作,减少杂均污染,根据不同的感染类型及病变特征采集不同的标本。采集尿道标本时,应用无菌生理盐水局部冲洗,以无菌拭子插入尿道口1~2cm停留10s,轻轻旋转拭子后退出;对外阴部糜烂、溃疡者,生理盐水冲洗后用无菌拭子擦去病灶边缘的分泌物;阴道及尿道口的分泌物需在窥阴镜下,用无菌长棉拭子采集,子宫内分泌物用无菌导管抽取,导管外套一层保护膜,插入子宫过后再穿刺该膜,负压吸引,可减少阴道菌群的污染,女性盆腔脓肿时,在阴道局部消毒,由直肠子宫凹陷处进针抽取。前列腺液的采集皮肤消毒后,有临床医师行前列腺按摩采集。怀疑淋病奈瑟氏菌感染时,由于其抵抗力差且有自溶性,标本采集后应立即送检,或床边接种,以提高细菌培养阳性率。阴道内有许多正常菌群,采集宫颈标本时,应尽可能不触及阴道壁。生殖道厌氧菌感染也多见,采集标本时应避免与氧气接触,应作床边接种或置厌氧运送培养基中送检。

十八。其他特殊项目的标本采集

肿瘤标志物组合,避免产生大量气泡和用力振荡试管而造成标本溶血。若检测PSA,采血前48h内不得作前列腺按摩、前列腺指诊、穿刺、灌肠、直肠指诊、直肠内超声和膀胱镜检查等,否则会使测定结果偏高;检测β-HCG时,若使用激素类药物,应在送检单上注明,怀孕或流产后检测HCG时最好也要注明;甲状腺功能检测抽血时宜用酒精消毒(不可用碘酒或碘伏);微量元素标本才几千患者应出入静息状态,避免剧烈运动和情绪激动。

标本的输送、验收与拒收 一.送检

送检人员受到样本后,须在各病区护士站LIS系统中将接受到的标本进行条码确定。标本送到检验科后,在检验科LIS系统中,检验人员将送检到的标本条码接受。正常作息时间内的急诊标本,由护工送至各专业组,并进行验收登记;夜间值班时的急诊标本,由护工将标本送至急诊检验室,由值班人员进行核对、接收、登记和处理,对不合格标本与临床联系后拒收和回退。标本收集人员必需清点标本个数是否与送检单相符,并安全送到检验科。送检过程中要注意环境对标本的影响。有时应避光(如阳光直射下血中胆红素会分解),样本有温度要求,应确保样本置于适合的容器内。要保证标本运送途中的安全,防止过度震荡,标本被污染,唯一表示的条码丢失和混淆,标本对环境的污染,水分蒸发等。对于疑有高致病性病原体标本,应按《病原微生物实验室管理条例》的相关要求运送。同时,由于血细胞的代谢、气体交换及物质转移等因素,标本放置时间过久,易使血细胞内外多种成分发生变化,导致分析结果发生误差。因此标本采集后应及时送检,有些检测项目的标本(如血气分析)应立即送检。晨起批量标本采集,各临床科室应充分考虑采样与送检之间的间隔时间,一般要求在上午上班前送达相应实验室。 二.验收

标本送至实验室后有专人验收,验收基本程序:1.唯一性标识是否正确无误;2.申请检验项目与标本是否相符;3.标本容器是否正确,有无破损;4.检验标本的外观和标本量,包括有无溶血,血清有无乳糜状、抗凝血中有无凝块,,以及细菌培养的标本有无污染的可能;5.检查标本采集时间到接收时间的间隔;6.特殊标本需要送收双方签收。 三.拒收

遇到下列情况检验科可以拒收标本:1. 唯一性标识错误、不清、涂改、脱落和丢失,标本标识码与申请单或采样清单不一致;2.用错标本容器(如用错真空采集管)或容器破损难以补救;3.人为因素的严重溶血、脂血标本;4.抗凝血中有凝块,抗凝血未加抗凝血剂或血液与抗凝剂比例不正确(如血沉、抗凝因子测定等);5.标本量严重不足;6.不应接触空气而接触了空气(如血气分析),细菌培养的标本被污染;7.采集标本离送检间隔时间过长。

正确标本采集应注意的问题

选择最佳采样时间,采集具有代表性的标本。

容器洁净度或无菌程度符合检验要求。注意抗凝剂、防腐剂的正确应用,防止污染。如细菌培养的容器绝对不能有防腐剂,微量元素测定对容器结晶要求远高于其他检测,24h或12h尿中某些成分分析需加防腐剂等。

静脉采血时扎止血带时间应尽可能短(一般不超过1min),抽血速度不宜过快,以免产生大量泡沫,造成标本溶血。防止过失性的采血(如采错部位、用错真空管等),防止边输液边采血,禁止在输液同侧采血。含抗凝剂的真空试管采血后须及时混匀标本(轻轻点到混匀切忌用力振荡试管),防止凝块和凝固。

需要毛细血管末梢采血时,由检验人员采集。皮肤消毒后,一定要待酒精分发干燥后采血,否则血液四处扩散而不成滴。采血时应选取无炎症、水肿、冻疮等部位,烧伤患者选择皮肤完好处采集,除特殊情况外,不要采集耳垂血。穿刺深度一般为2.0~2.5mm为宜,切忌用力挤压或离伤口较近处挤压,否则会使大量组织液渗出稀释血液,同时易激活凝血系统使血液凝固。

标本严重脂血和黄疸问题:严重脂血可干扰某些光谱反应。如影响肝功能、血脂等项目测定;黄疸产生光谱干扰苦味酸法测定Cr,造成Cr检测结果偏低。

不同试验项目在使用抗凝剂时,注意与样本的比例:如血GLU测定一般加入氟化钠—草酸钠混合抗凝剂,防止糖酵解;肾功和电解质等常使用肝素抗凝;病理性腹水、胸水和脑脊液应加入肝素,防止蛋白质凝固;24h尿PRO等生化测定则应加入甲苯等防腐剂,抑制微生物生长繁殖。凝血功能血样试管中的抗凝剂与采样量有严格的比例要求(1:9),差别过大显著影响检验结果。

溶血问题:避免标本溶血是保证标本质量的重要环节。采血时的一些不良习惯和劣质采血器具均易造成溶血,如采血时定位会进针不准,针尖在静脉中反复探测。均会造成血肿和溶血;混匀含添加剂的试管时用力过猛,或运输时动作过大;从已有血肿的静脉采血;采血时有空气进入或产生泡沫等。相对于添加剂而言,采血量不足等也会导致溶血。溶血标本可使多个项目的检验结果出现大的误差,血液中某些物质在红细胞内的浓度比血浆高许多倍。轻微溶血即可造成对检验结果的较大影响,如血清钾、镁、心肌酶等。实验时发现显性溶血标本后,应区分是病理性溶血(血管内溶血),还是技术性溶血(由于操作技术或采血容器造成的体外溶血),签发报告时注明。实验时还应特别注意排除非显性溶血对检验结果造成的影响。

第二篇:临床检验标本采集要求

临床检验样本拒收的准则

1.盛样本的容器和/检验申请单上信息缺失或不符 1.1 样本容器上无标识或标识不清; 1.2 样本容器上标签与检验申请单不符;

1.3 临床检验申请单上未写患者姓名、检测项目和检测材料中任何一项; 1.4 检验申请单上送检项目本科未开展和/或属科研项目但未事先联系确认。

2.样本不合要求

2.1 未使用合适的抗凝剂或样本类型不当; 2.2 送检样本容器破损、有渗漏或选择不当; 2.3 样本采集后保存不当;

2.4 患者准备状态不恰当,影响实验结果,如未空腹查血脂。

3.发生以下情况原则上拒收样本

中度以上溶血;中度以上脂血;抗凝血中有凝块;量太少等。

但因情况特殊、取材困难或感染疾病的咨询等,本科将会应客房要求进行检测,并在报告单上注明样本状态供临床参考。

样本拒收后处理:在我科拒收的样本,应及时重新采集,否则将和检验申请单一起退回。

临床检验分析前要求

一、临床检验单要求 1.病人信息:

申请者必需清楚写病人的姓名、性别、年龄或其它有效识别身份的信息; 2.病人的病历信息

申请者必须清楚填写病人所在临床科室名称、病历号、床号、临床诊断、临床样本类型、样本采集日期和时间、申请者姓名、申请检验日期; 3.请的检验项目:

申请者必须清楚填写检验项目名称,项目名称应规范、准确,特别是申请组合项目时,一定要与本科<检测目录>的组合内容一致,否则需填写组合项目的具体单项;

二、标本采集前患者准备须知 1.患者状态

原则上患者应在平静、休息状态下采集样本,特别是血液样本。 激动、兴奋或恐惧时,可使血红蛋白、白细胞等增高; 剧烈运动、能量消耗、体液丢失、呼吸剧烈可以造成体内多项指标变化,如谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶等一过性升高,还可引起血钾、钠、钙、白蛋白、血糖等的变化。

2.患者饮食对检验结果的影响

2.1 进食后一定时间内可使血液中许多成份发生变化。因人们饮食的多样性,生理状况差异也大,而且大多数项目的参考范围是以空腹血液测定值为基础的。故建议,原则上要求早晨空腹采血(空腹12小时左右),对进食有特殊要求的项目除外。

一顿标准餐:可使甘油三酯增高40%以上,血糖增高15%以上,进食高蛋白食物可使尿素氮、尿酸等增高,高碳水化合物食物可使血糖增高; 高脂肪食物:可使甘油三酯大幅增高,并使血液出现乳糜现象影响许多检验结果; 进食咖啡:淀粉酶、促甲状腺激素、碱性磷酸酶增高。

2.2 长期素食者低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白,胆固醇、甘油三酯会降低。 2.3 禁食过久对检验结果的影响

补体C

3、白蛋白、转铁蛋白、血糖、钾、钙、镁等浓度下降; 血胆红素、酮体、脂肪酸、甘油三酯、尿酸盐增高;

禁食刚开始时,血生长激素可升高15倍,3~4天后基本恢复正常。 2.4 咖啡因对检验结果的影响:咖啡、可乐、茶都含有咖啡因

咖啡因可使血糖微量上升,甘油三酯和皮质醇升高,胆固醇降低。 2.5 酒精对检验结果的影响:

饮酒后会使血糖立即上升和造成高甘油三酯血症;

中度酒精量可使血清肌酸肌酶、和谷草转氨酶、谷丙转氨酶升高。 2.6 抽烟对检验结果的影响

香烟中尼古丁会使血液中肾上腺素、尿中儿茶本酚胺及其代谢产物VMA升高; 生长激素对香烟特别敏感,抽烟后30分钟内浓度可升高10多倍;

吸烟者癌胚抗原、β脂蛋白、胆固醇、甘油三酯、红细胞、血红蛋白、白细胞高于不吸烟者,高密度脂蛋白低于不吸烟者。

3.药物对检验结果的影响

3.1 药理作用对检验结果的影响:

甲状腺药物:使血糖升高、胆固醇降低; 咖啡因:使血糖和胆固醇增高;

维生素C:使总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白降低;

口服避孕药:使甲状腺结合球蛋白、纤维酶原、转铁蛋白、血清铁和甘油三酯升高、白蛋白和血清锌降低;

某些药物能够造成肝、肾功能损害,引起相关指标的变化。 3.2 对检验项目的测定方法产生影响:

对于用比色法检测的项目,某些药物的物理特性比如颜色会影响比色; 药物参与检测时的化学反应,如有还原性的药物对于利用氧化还原法测定项目会有影响;某些药物可以抑制酶的活性,对于测定酶活性的项目会使结果降低。

4.标本本身对检验结果的影响

4.1 标本溶血:溶血可能是有某些疾病引起,但主要是在采血过程中或样本处置不当引起。

光学干扰,比色时若用到胆红素的吸收光谱区会产生分析误差;

红细胞内的某些物质与血清或血浆中的含量相差悬殊,如钾、镁、磷、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、血清铁等; 胆红素中的蛋白质使血清总蛋白和白蛋白升高。 注一:中度或重度溶血必须重新采集标本 注二:标本溶血的常见原因: 止血带施压时间太长; 穿刺部位皮肤有酒精残留;

针头、针筒或血液容器内有污染或水气; 使用的针头孔径太小;

针筒内的血液由针头排到容器中; 抽血时太快或用力太大;

血液与抗凝剂混合时剧烈振荡; 血液没有完全凝固就离心; 4.2 脂血标本:

脂血造成的浑浊会在比色测定时引起光线散射,导致吸光值假性增高; 脂血会造成电解质检测错误; 抽血前食入富含脂肪的食物;

空腹患者有脂血现象,属于病理因素:甘油三酯过高血浆或血清呈浑浊状;胆固醇含量高,血清或血浆外观没有变化;有乳糜微粒会在血清液面浮上一层奶油状物质。

三、样本采集

1.标本采集前准备

1.1 根据项目要求或医生的交待嘱咐病人作好采集标本前的准备工作,并告知相关注意事项;

1.2 了解各种项目的采集要求,并作好充分的准备;

1.3 按规定选用合适的容器并在明显位置注明标识(如条形码、病人姓名、送检科室、住院号等资料);

1.4 标本采集前应严格查对检验申请单信息和容器上内容是否一致。有些标本采集后应在申请单上标注采集时间、体位等;

1.5 采集抗凝血标本时,应选择合适的抗凝剂,不要随意更换成其他抗凝剂。抗凝剂与血液的量必须准确。抽血后立即轻轻颠倒混匀,避免血液凝固;

1.6 严格掌握采集标本电动机,如避免在输液臂的同侧采血,有的项目测定应注意其分泌的节律性和周期性变化;

1.7 要求病人自己留取的标本应该详细交待留取方法和注意事项。

2.标本采集方法

2.1 准备试管:取合适数量和规格的真空采血管备用;

2.2 选择静脉:患者取坐位,前臂水平伸直置于桌面枕垫上。暴露穿刺部位,选择容易固定,明显可见的肘部静脉;

2.3 扎止血带:在采血部位上端扎止血带,并嘱患者反复握拳头,使静脉充盈暴露,便于穿刺; 2.4 消毒:先用复合碘消毒棉签自静脉穿刺处从内向外,顺时针方向消毒皮肤; 2.5 穿刺:取下一次性针头无菌帽,以左手拇指固定静脉穿刺部位端,右手拇指和中指握针头沿静脉使针头与皮肤成30度角斜行快速入皮肤,然后以5度角向前突破静脉壁进入静脉腔。见回血后,将针头顺势插入少许,以防止采血针头滑出,但不可用力探刺,以免造成血肿;

2.6 抽血:将针头另一端插入真空采血管,至所需血量后,立即去掉止血带,用消毒棉签压住针孔,请患者松拳,迅速拔出针头。嘱患者继续按压针孔数分钟以防出血;

2.7 混匀:如果用的是抗凝管,则轻轻颠倒混匀,切忌振荡试管。

3.尿液标本的采集

尿液标本种类的选择和收集取决于临床医师的送检目的、病人的状况和试验的要求。理想情况下,为了达到筛查、检出分析物和有意义有形成份的目的,应收集浓缩尿液。尿液标本的种类如下:

3.1 晨尿:清晨起床后,在未进早餐和做其它运动前排泄的尿液,又称为首次晨尿。住院病人最适宜收集此类标本,但在采集前一天应提供收集容器和书面收集说明,如外阴、生殖器清洁方法,留中段清洁尿等。若采集后2小时不能进行分析的,可采取适当的防腐措施。晨尿常用于筛查、直立性蛋白尿检查和细胞学研究。

3.2 随机尿:即随时排泄,无需患者做任何准备的尿液,适用于常规及急诊筛查,但是,患者如摄入大量液体和剧烈运动后将直接影响尿液成分,从而不能准确反映患者疾病状况。

3.3 计时尿:收集一段时间内的尿液标本。准确的计时和规范的说明是确保计时尿结果可靠的重要前提,根据检测项目的不同,添加适当的防腐剂。24小时尿标本收集方法如下:

告知病人标本收集的具体步骤,尽可能提供书面说明; 在开始收集标本的第一天(如晨8:00),病人排空膀胱中的尿液,弃去该部分尿液。将此后连续24小时的尿液收集于盛尿容器内;

在结束收集标本的第二天(如晨8:00),病人排空膀胱中的尿液,收集于盛尿容器内;

送到实验室前,充分混匀全部标本,准确测量并记录尿总量; 取出一定量尿液用于实验,弃去剩余尿液。 3.4 尿液标本收集相关注意事项:

应留取新鲜尿,以清晨第一次尿为宜。急诊病人可随时留取。收集计时尿液标本时应告知病人时间段的起点和终点;

使用清洁有盖容器(一次性容器为佳),透明且不与尿液发生反应的惰性材料制成。容器不可重复使用。运送容器具有安全稳妥的密封装置,其密封装置易于操作和开启;

尿液标本应避免经血、白带、精液、粪便等混入。此外,还应注意避免烟灰、糖纸等异物混入;

标本留取后,应及时送检,以免细菌繁殖、细胞溶解等;

尿胆红素和尿胆原等化学物质可因光分解或氧化而减弱。标本送检时应避光。 3.5 尿液防腐与保存:标本收集2小时内无法进行尿液分析,或尿液中所要分析的成分不稳定,标本可加入特定的化学防腐剂,常用尿液防腐方法。 ①冷藏 不干扰常规筛查,放在4℃冰箱可保存6小时,在24小时内可抑制细菌生长。

主要检测:电解质、肌酐、葡萄糖、总蛋白、白蛋白、重金属、药物筛查、促卵泡激素、雌三醇等。

②甲醛 具有还原性,不适合尿糖等化学成份检查。

主要检测:管型、细胞检查,用法:每100mL尿加入400g/L的甲醛0.5mL。 ③甲苯

主要检测:尿糖、尿蛋白的防腐,用法:每100mL尿加入甲苯0.5mL。

④硼酸 保护蛋白质和有形成份,在24小时内可抑制细菌生长。有尿酸盐沉淀。干扰常规筛查的PH。

主要检测:蛋白质(白蛋白、氨基酸等)、尿酸、5-羟吲哚乙酸、羟脯氨酸、皮质醇、雌激素、类固醇等检查。 用法:每L尿中约加10g。

⑤盐酸 不能用于常规筛查,破坏有形成份,沉淀溶质,杀菌。

主要检测:钙、磷酸盐、δ-氨基乙酰丙酸、草酸盐、尿17酮类固醇、儿茶酚胺等。

用法:每L尿中加10mL浓盐酸。

⑥氟化钠 能防止糖酵解,不能用于常规筛查。 主要检测:尿葡萄糖。

⑦碳酸钠 保护卟啉和尿胆原,不能用于常规筛查。 主要检测:卟啉和尿胆原。

用法:24小时尿中加碳酸钠4g。

⑧麝香草酚 保护有形成份、干扰蛋白沉淀试验、抑制细菌和霉菌。 主要检测:有形成份。

用法:每100mL加入量<0.1g。 ⑨冰醋酸

主要检测:24小时尿醛固酮。

用法:每24小时尿加入约5~10mL。

4.痰液标本采集

4.1 痰液的一般检查应收集新鲜痰,病人起床后刷牙,漱口(用3%H2O2及清水3次),用力咳出气管深处真正呼吸道分泌物,而勿混入唾液及鼻咽分泌物;

4.2 幼儿痰液收集困难时,可用消毒棉拭纸刺激喉部反射,用棉拭子采取标本; 4.3 痰液标本收集容器须加盖,痰液勿污染容器外(用不吸水容器盛留)。

5.粪便标本采集

5.1 收集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别,一般检验留取指头大小 (约5g)新鲜粪便即可,放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内送检。容器最好用内层涂脂的硬纸盒,便于检查后焚毁;

5.2 血吸虫毛蚴孵化则留新鲜粪便不少于3g。细菌检查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内,勿混入消毒剂及其他化学药品,并立即送检检查;

5.3 检查蛲虫卵需要用软粘透明纸拭子,在清晨排便前由肛门四周拭取标本,也可用棉拭子拭取,但均须立即镜检;

5.4 检查寄生虫及虫卵计数,可用清洁、无尿污染的便盆收集24小时粪便送检; 5.5 隐血试验,应嘱患者于收集标本前3天前起禁食动物性食物,连续检查3天,并取外表及内层粪便。收集标本后须迅速进行检测,以免因长时间放置使隐血反应的敏感度降低;

5.6粪胆原定量检查应收集3天的粪便,混合称量,从其中取出约20g送检。查胆汁成份的粪便不应在室温中长时间放置,以免阳性率减低; 5.7细菌检验用标本应全部用无菌操作收集。

收集容器须加盖,勿污染容器外(用不吸水容器盛留),立即送检。

6.体液标本采集

6.1 脑脊液:标本收集后应立即送检,一般不超过1小时。收到标本后应立即检验,久置后可致细胞破坏,影响细胞计数及分类检查;葡萄糖含量降低;病原菌破坏或溶解。细胞计数应避免标本凝固,遇高蛋白标本时,可用EDTA抗凝。 6.2 浆膜腔积液:穿刺取得的标本为防止细胞变性、出现凝块或细菌破坏溶解等,送检及检查必须及时;为防止凝固,最好加入EDTA抗凝,每0.1mL可抗凝6mL积液;PH测定应用肝素抗凝专用采样器。 6.3 滑膜液:应用消毒注射器,正常时滑膜液量甚少,病理时则可多达3~10mL,因检查项目不同、容器不同,故应事先准备有关标本容器,微生物培养应置于灭菌消毒试管,显微镜镜检应用肝素抗凝标本,每mL约用肝素钠25单位(不可采用肝素锂、草酸盐或EDTA干粉,以免人为形成晶体,干扰显微镜检查),收集后立即送检。 6.4 精液标本:

①在3个月内检查2次至数次,2次之间间隔应>7天,但不超过3周; ②采样前至少禁欲3天,但不超过7天; ③采样后1小时内送检;

④用清洁干燥广口塑料或玻璃小瓶收集精液,不宜采用避孕套内的精液; ⑤应将射清清液全部送检; ⑥传送时温度应在20~40℃; ⑦和所有体液一样,精液也必须按照潜在生物危害物质处理,因为精液内可能含有肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒和疱疹病毒等。

7.微生物学检验标本

7.1 标本采集、运送这、验收和处理注意事项 ①标本采集:

A. 申请单必须清楚(姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源、采集时间、检查项目、抗生素应用情况等),以便实验室合理选用培养基。 B. 尽量在抗生素应用前采集标本。 C. 标本采集应严格执行无菌操作。

D. 采集标本的容器必须经灭菌处理或使用一次性无菌专用容器。 ②标本运送

标本采集后尽快送微生物室。 ③标本验收

A. 实验室只能接收和处理合格标本。

B. 实验室对不合格标本退回时,须注明原因,并及时与临床联系。 7.2 微生物检验标本采集和处理 ⑴尿液标本采集和处理:通常留取晨起第一次心潮澎湃 液,及时送检,并保证2小时内接种,不能及时送检时,标本应置冰箱保存,并于8小时内送检。怀疑沙门氏菌感染时,应于发病2周左右采集标本;怀疑钩端螺旋体感染时,应于发病后2周左右采集标本。常用的标本采集方法如下:

A. 中段尿采集法:成年男性和女性分别用肥皂水清洗尿道口和外阴部,再用灭菌水冲洗尿道口,然后排尿弃去前段尿液,于带盖的无菌试管中留取中段尿液5~10mL。

B. 尿尿法:用导尿法取5~10mL尿液于无菌试管中,长期留置导尿管者应更换导尿管留尿;留置导尿时,用无菌消毒法消毒导尿管外部及导管口,用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检,不可采集尿液收集袋中的尿液送检。 C. 其它方法:膀胱穿刺或肾盂尿采集法须由临床医师采集。 ⑵粪便标本采集和处理:

A. 采集时间:腹泻患者处于急性期,尽量在用药前采集;怀疑伤寒患者在发病前两周以后采集;怀疑霍乱时应立即采集送检。

B. 采集方法:一般患者,取新鲜粪便的粘液、脓血或絮状物等有意义成份2~3g或1~3mL,盛无菌容器内送检;难以获得粪便或排便困难的患者和婴幼儿,可用直肠拭子采集,再插入灭菌试管中送检。 ⑶痰及下呼吸道标本采集和处理:

A. 自然咳痰法:晨痰为佳;先嗽口,清洁牙齿和口腔;再用力咳出呼吸道深部的痰;痰量不得少1mL;咳痰困难者可先做雾化处理。

B. 小儿取痰法:用弯压舌向后压舌,将拭子深入咽部,小儿因压舌板刺激引起咳嗽,喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上送检。 C. 支气管镜、支气管穿刺、支气管肺泡灌洗等采集法:,由临床医师实施。 ⑷血液及骨髓培养标本:

A. 抗生素治疗前,严格无菌静脉采血3~5mL(儿童1~4mL);骨髓1~2mL。 B. 无菌注入专用培养瓶中送检。

C. 如已用抗生素不能停用时,可在48小时内分别于下次抗生素使用前,多次采集血液标本送检。

D. 疑为心内膜炎时,为提高阳性检出率,可酌情不同部位、不同时间多次采血送检。

⑸脑脊液培养标本:

A. 怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊液,最好在抗生素使用前采集。 B. 无菌腰穿采集脑脊液1~2mL,立即送检。 ⑹穿刺液培养标本:

A. 包括胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液等。

B. 在抗生素使用前采集或在停用抗生素2~3天后采集。 无菌穿刺采集,可在无菌容器中加入适量灭菌肝素。 ⑺胃液及胆汁培养:

A. 采集方法:抽取空腹胃液5 mL,置无菌管内送检;胆汁培养标本由十二指肠引流法、胆囊穿刺法或手术中留取胆汁5 mL,置无菌管内送检。 B. 标本采集后必须立即送检。 ⑻脓汁和病灶分泌物培养:

A. 标本采集前,先对病灶周围消毒,然后用无菌法采取脓汁或病灶分泌物和组织。 B. 标本采集后立即置无菌管内送检。 ⑼眼、耳、鼻、咽拭子分泌物培养标本: A. 用无菌拭子常规采集标本。

B. 标本采集过程中应注意避免被粘膜上正常菌群污染。 C. 标本采集后连同拭子一起置无菌管内送检。 ⑽泌尿生殖道培养标本:

A. 尿道分泌物:清洗尿道后采取尿道溢出的脓性分泌物,或用无菌拭子插入尿道2~4 mL处轻轻转动后取出,置无菌试管中立即送检。

B. 阴道、宫颈分泌物:通过阴道扩张器,用灭菌拭子采取阴道口或宫颈管1~2 mL处分泌物,置无菌试管中送检。

C. 前列腺液:清洗尿道、膀胱后用前列腺按摩法采集前列腺液于无菌试管中,立即送检。

D. 精液:受检者应5天以上未排精,清洗尿道后用手淫法或体外排精法,射精于无菌管中立即送检。

E. 溃疡分泌物:灭菌生理盐水清洗患处,用无菌拭子取其边缘或基底部的分泌物,置无菌试管中立即送检。 ⑾烧伤感染培养标本:

烧伤12小时后用无菌棉拭子采集标本:要注意从多个创面取样;烧伤严重感染时易发生败血症,创面取样的同时应采集血样做血培养。 ⑿真菌感染培养标本:

浅部真菌感染标本采集:皮癣者常规消毒皮肤,从皮损边缘刮取鳞屑,置无菌平皿中送检;皮肤溃疡则采集皮损周围脓汁或组织;毛发则采集其根部折断处,至少5~6根送检;指(趾)甲;消毒指(趾)甲并去掉其表面部分,取可疑病变部分,用刀片修成小薄片5~6片,置无菌容器中送检。 深部真菌感染标本采集:

血液:无菌采集血3~5 mL,注入血培养瓶中,立即送检;如不能立刻送检时血培养瓶应放室温,但不可超过8小时。

及脊液:采样量不少于3 mL,分别注入两支无菌试管中送检(一支做真菌培养和墨汁染色,另一支做普通培养)。

呼吸道及泌尿生殖道标本:采集方法同普通培养。 ⒀厌氧菌感染培养标本: 标本采集:严格执行无菌操作,避免标本污染和与空气接触;用注射器抽取胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁、脑脊液或无菌手术抽取脓液;抽出液体标本后,要尽快排除注射器内的空气。

标本运送:标本采集后不得冰箱储存,必须尽快(半小时内)送检;标本运送可采用注射器(已驱氧)或含运送培养基的无氧小瓶以及厌氧罐。 ⒁特殊项目的标本采集要求 A. 糖耐量试验:

①病人准备:试验前3日,每日食物总糖含量不低于150g,维持正常活动,影响试验的药物(如:咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等)应在3日前停用,试验前病人应10~16小时不进食。

②标本采集:临床上常用方法是清晨抽空腹血后,口服75g无水葡萄糖,再于给糖后0.5、

1、1.5、2小时各采血1次,每次采集2mL,尽快分离血清。 B. 人乳头瘤病毒DNA(HPV-DNA)分型检测: ①病人准备:3天内不能做阴道冲洗或使用阴道内药物,24小时内不能有性生活,非月经期采样检测。 ②标本采集:放置阴道扩张器,用专用取样刷置于子宫颈口与粘膜交界处逆时针转三圈,停留10秒钟;

③将取样刷放于专用试管中,在切口处折断多余部分; ④拧紧盖子送检。尽量避免保存液在取样过程中溢出,否则样本量不够无法检测。 标本保存:4℃可保存3周,-20℃可保存半年。 C. 高血压项目:

①病人准备:β-阻断剂、血管扩张药、利尿剂及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平,一般要在停药后3周测定。不适合停药的病人改服胍乙啶等的影响PRA较小的降压药。钠摄入量影响机体PRA水平,故病人测定PRA前3天应适当减少盐报入量,最好同时测定取血前24小时的尿钠含量,以供分析PRA结果时参考。

②标本采集:肘静脉取血5mL,迅速注入放在水浴冷却的酶抑制剂的专用抗凝管中,摇匀,即刻现放回冰水浴中冷却,待离心时取出。1000rpm离心5分钟(最好4℃离心)分离血浆。此操作应在15分钟内完成。(外送时,取2mL血浆送检)。 ③标本保存:低温冰箱保存(-20℃以下),可保存2个月。 ④注意事项:卧位血是指病人早晨醒来未下床活动前采集的血标本:立位血是指病人早晨下床活动3小时后采集的血标本。

标本未及时分离血浆、反复冻融、溶血、保存不当、使用过期抗凝剂均可影响结果。

四、标本送出前的处理和保存

1.标本的交接检查:本科工作人员与送检者当场交接样本,履行交接程序。不合格的样本当场拒收,对有疑义的样本,与临床协商后处理。 样本上条码与检验申请单上条码是否一致 样本是否溶血 抗凝血有无凝块

检验申请单填写是否完整 血液样本有无脂血 样本量是否符合要求

样本使用容器是否正确(是否抗凝、所用抗凝剂种类,特殊项目是否使用专用容器或采集管)。 2.样本离心

绝大多数血液中成份在不分离血细胞的情况下能够在24小时内保持稳定,但外送检验项目必须分离血清或血浆后送检。 溶血对一些项目影响很大,发生中度以上溶血的下列项目不能检验:钾、钠、氯、钙、镁、磷、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、胰岛素、C肽、肌酸激酶、神经元特异性烯醇化酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、叶酸、血常规等。

注:因许多成份在红细胞和血清/血浆间浓度有差异,有的差异很大,样本在运输、储存过程中,血细胞代谢、微生物降解等会影响标本质量,另如标本在运输过程中处理不慎(颠簸等)易引起溶血。

3.样本保存:不能及时送检的样本,一般情况下应放冰箱冷藏,但部分项目要室温保存。. 4.样本密封:为保护样本不挥发、污染、溢出和生物安全考虑,盛样本的容器应密封,所有样本都应按照生物安全的要求谨慎处理。

建议:对于要外送检验的项目,将血液样本分离血清/血浆后送检(需要用全血检测的项目除外)。

第三篇: 临床血液标本采集指南

质控环节

一、检验申请

规范填写检验申请单 ,项目填写齐全,用词规范、字迹清楚、避免涂改。对于被检者的特殊情况,应当在申请单上注明,供检验人员判断结果参考。检验科要求检验人员加强与临床医护人员沟通,及时解决检验项目申请和送检标本存在的问题及疑问;

二、病人准备

医护、检验人员指导病人做好准备。考虑饮食、运动、生理周期、疾病及药物等对检验结果可能产生的影响,指导病人正确采集标本。

(一)控制饮食

(1) 大多数检验项目都要求在早晨空腹采血,咖啡、浓茶、高糖及可乐类饮料也应禁食。

(2) 肝功、血脂、凝血项目要求禁食12-16小时,且提前一天的晚餐应当避免饮酒、禁食高脂肪、高蛋白饮食。

(3) 饮食对血脂检验影响重大,至少应当在抽血前的3天以内注意保持正常饮食。

(二)避免药物影响

许多药物(如VitC、雌激素、降血脂药等)对检验结果尤其是血、尿、便的生化检验结果产生影响,抗生素应用将对微生物培养检验结果产生直接的影响。申请检验前医生应该了解待检者近期及当前相关药物使用情况并给予适当指导,在对检验结果可能产生明显的影响时,应当在检验申请单上注明。如不能停药,应记录用药情况,恰当评估药物对检验结果的影响。

(三)避免运动影响

(1) 剧烈运动可以使许多血液成份发生改变,甚至持续24小时以上,因此剧烈运动之后不应立即抽血;快步行走之后,至少应休息10~15分钟然后再抽血。

(2) 应在平静状态抽血,避免情绪激动。

(四)注意生理差异

临床医生申请检验项目及评估检验报告时,应考虑性别、年龄、昼夜节律、季节变动、生理周期(如怀孕、月经)等因素对检验结果的影响,并给予必要指导。

(五)注意体位要求

(1) 许多血浆生化成份在站、坐、卧三种不同体位时有明显的浓度差异。

(2) 静坐5~10分钟后以坐位(从肘静脉)采血为最佳。

(3) 卧床患者可卧位采血。

三、器材选择

(1) 一般采血可采用质量合格的一次性塑料注射器。从动脉采集血气标本,以采用玻璃注射器为佳,可以减少血液中氧气的弥散。

(2) 采用注射器采血时,7号(22G)或8号针(21G)为标准抽血用针,针头过细容易

产生溶血。

(3) 采用真空采血管-采血针已成为国际标准,可以有效减少溶血、凝集及采血量不准的差错。

(4) 采集抗凝血液标本时,血标本管采用的抗凝剂的种类及浓度、体积必须正确无误。

四、采血操作

(一)正确选择血标本种类

(1) 大多数检验项目(生化、免疫、凝血、血培养、交叉配血等)采用静脉血标本。

(2) 血气分析最好采用动脉血标本,也可从动脉化毛细血管采血(如新生儿)。

(3) 血常规检验(血细胞分析)可以采用静脉血或手指末梢血,但除非静脉抽血确实存在困难者(如:新生儿、幼儿、老人、肥胖者、严重烧伤患者、出血倾向严重的患者、病危患者),或者必须为治疗保留静脉者(如肿瘤化疗患者)可考虑采用手指末梢血外,其他人应采用静脉血。

(二)正确选择采血部位

(1) 末梢血标本可从手指采集,采用耳垂末梢血作为血常规检验标本的做法已经废止。新生儿可以从足跟、大趾采集。

(2) 动脉血标本常从股动脉、肱动脉、桡动脉采血,新生儿及婴儿可从头皮动脉或脐动脉采血。

(3) 静脉血标本常从肘前静脉、腕背静脉采血,小儿和新生儿有时从颈静脉和前囟静脉采血。

(4) 禁止从输液三通管采血(输液成份回流、输液管内残留输液成份都将极大地影响检验结果)。

(三)尽量避免输液时采血

(1) 一般应在输液结束30分钟以后再采血。

(2) 抢救过程中必须一边输液一边采血时,应避免从正在输液的肢体上采血,应避免输液成份混入血液标本。

(3) 输液时采血应当遵从“远端原则”:

a 选择在输液的对侧肢体或无输液的其他肢体(如足部)静脉采血。

b 在四肢静脉都输液时,可以选择在输液静脉的远心端(静脉血流的上游)采血。

(4) 急诊、抢救过程中在输液的同时采血,应在检验申请单上注明。

(四)避免消毒酒精引起溶血

静脉穿刺处消毒酒精未干就采血,容易引起标本溶血。

(五)合理使用止血带

(1) 止血带不应扎得太紧,使用时间应尽量缩短。抽血时,见到回血应立即松开止血带,减少血行阻滞时间(也不应鼓励被抽血者长时间、用力攥拳)。

(2) 血脂项目、出凝血项目、血常规项目抽血时止血带使用应限定在1分钟以内。

(3) 止血带束缚太紧、时间过长(如超过3分钟),会造成血行阻滞时间过长,因溶血、血小板激活、纤溶系统激活等原因将使以上检验项目的结果产生偏差,甚至诱导错误诊治。

(4) 需要重新采血时,在止血带束缚时间太长的情况下,应当在对侧手臂重新采血。

(六)“一针见血”、抽血顺畅

(1) 许多检验项目,尤其是涉及出凝血机能的项目(如血小板计数、出凝血项目等)均要求做到“一针见血”、抽血顺畅。

(2) “一针见血”、采血顺畅,可以有效防止溶血、减少血管及组织细胞损伤导致血液成份改变对检验结果的影响。溶血造成红细胞内成份的释放、血管损伤导致凝血机制的激活,对很多检验项目将产生明显影响。

(七)控制抽血力度

(1) 用注射器抽血应避免大力拉、推针拴,以免血细胞因受过度挤压而增加溶血。

(2) 抽血时大力抽拉针拴,还易使血液产生气泡。气泡是导致溶血、蛋白酶失活的重要原因之一。

(3) 从动脉采集血气分析标本,应让血液自动流入针筒,不要用负压抽取血液,以免增加血液中气体挥发及产生溶血。

(八)血液标本采集顺序

(1) 注射器采血可以一次采集足量血液,然后立即依如下顺序分装各标本管:血常规、出凝血、生化、免疫。

(2) 使用配套的真空采血管-采血针时,第一管最好不作为凝血检验标本(最大限度降低血管及组织细胞损伤造成血液成份改变对检验结果的影响,临床医生申请凝血检验项目时最好考虑与血常规或其他生化项目一起采血)。

(3) 使用配套的真空采血管-采血针时,采血顺序应当是:血培养、不含添加剂的采血管(血清标本管,红色、桔红色或黄色)、凝血标本管(浅蓝色)、其他标本管。

(九)减少针头导致的溶血

(1) 如果使用注射器抽血,应先卸除针头,再沿试管壁将血液轻缓地注入试管。

(2) 通过针头将血液推入试管(血液细胞二次通过针头),尤其是用力推送,将增加血液细胞受挤压而破碎的机会,导致溶血。

(十)准确控制标本量

(1) 抗凝血液标本的体积必须准确——真空采血管的标签纸上都有体积标志(黑色小方块);抗凝血液标本的体积误差应控制在5%以内(如2 ml凝血标本管的血液体积误差应不大于0.1 ml)。

(2) 抗凝血液标本的体积不合要求可能产生的主要影响:血液体积太多—一抗凝剂比例太少,易产生血凝块;血液体积太少——抗凝剂体积相对剩余,血液成分过度稀释,且易使血细胞因渗透压降低而产生变形或溶血,PT和APTT时间将假性延长。

(十一)尽快与抗凝剂彻底混合

(1) 需要抗凝的血液标本,抽血后应立即将血液注入含抗凝剂的标本管,并使血液与抗凝剂彻底混合,避免血液凝固。

(2) 真空采血管以颠倒5~8次为标准操作,动作应迅速而轻柔。用力振荡、产生气泡都不可避免产生溶血。

(3) 如果管中抗凝剂为液体,应当使粘附在管壁、管盖上的抗凝剂能够全部与血液混合。

(4) 对于出凝血项目、血常规项目、白细胞表面抗原分类检测等项目,血液标本出现凝固

(即使少量细胞凝集)均为不合格。

五、血液标本保存

(一)血液标本的保存要求

(1) 采血后应将标本管直立、静置,避免振荡、摔落。

(2) 所有标本最好都采用有盖容器盛放,防止灰尘、杂物混入,减少水分、气体蒸发,避免标本溅洒、污染。

(3) 标本应保存于荫凉处,避免阳光直射。某些检验项目要求避光保存血液标本。

(4) 标本一般应室温保存,避免过高或过低温度影响。

(5) 特定项目的血液标本需要低温保存(如血气标本应将封闭的血液立即冷冻至4℃然后送检)。

(二)血液标本应立即送检

(1) 血液标本不应在临床科室保留,应尽可能立即送往检验科室。

(2) 检验人员应根据不同检验项目的要求及时处理标本(立即检验、低温保存、分离血清后低温或常温保存等)。

(三)血液标本的有效检验时限

(1) 血气分析——必须立即送检,应当在30分钟内完成检验。

(2) 凝血项目、电解质项目、肝功及多数血液酶类生化项目——应尽快送检,在2小时内检验。

(3) 血常规项目——应在4小时内完成检验

(4) 血培养项目——应在采血后尽快放入35℃培养箱中,超过2小时可能降低微生物培养的阳性率。

(5) 多数抗原-抗体检测项目——全血室温(4℃为佳)可保存24小时,或分离血清-20℃保存。

(6) 在环境温度超过30℃的条件下,所有标本都应尽快送往检验科室。

(7) 有些临床科室早晨抽血时间太早,至送检时标本已室温放置超过2小时,标本因细胞代谢、溶血、蒸发等原因造成许多项目的结果偏差,如:钾、乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血红蛋白、酸性磷酸酶等升高,钠、血糖等降低。检验科建议:住院病房早晨抽血时间应控制在6:30以后,标本应在8:00左右送至检验科。

(四)血培养标本的特殊要求

(1) 确保无菌采血,严防标本被污染。

(2) 血培养瓶接种的血液量一般为:成人10 ml,儿童4 ml,幼儿1~2 ml。接种的血液过多易引起假阳性。

(3) 作厌氧培养的血液标本,应避免接触空气,立即注入专用厌氧培养瓶内。

(4) 如果同时作厌氧培养和需氧培养,应先将血标本接种厌氧培养瓶,然后再接种需氧培养瓶。

六、血液标本运送

(1) 标本应从采集地点直接送往检验科室,不应在其他地点放置。

(2) 以上血液采集、保存过程对标本质量的要求应当得到满足。必须避免剧烈振荡、血液溅洒、光线照射、异物混入等情况的发生。

(3) 交叉配血的受血者血液样本,必须由临床医护人员或专职运送人员直接送往检验科(血库)。禁止其他人员(包括受血者家属)执行血样运送任务。

(4) 外送检验标本应当接受检验人员对标本种类(全血、血清或血浆)、标本容器、生物防护要求以及运送保存温度等方面的指导。

七、其他

(一)正确处理不合格标本

(1) 检验科室在核收送检标本时,对不合格检验标本应当拒收。

(2) 临床科室在证实标本不合格之后应当重新采集标本送检。严禁诸如“将因出现凝集而被拒收的血常规标本在挑出血凝块之后重新送检”之类的严重错误发生。

(二)标本溅洒事故的处理

(1) 从标本管溅洒出来的血液标本不能再放回标本管作为标本送检。

(2) 严禁将同一个待检者含不同抗凝剂的血液标本进行混合,严禁将不同待检者的血液标本进行混合。

(3) 如果发生标本溅洒事故,应当立即对被污染物(体表、衣物、台面、地面等)进行有效的消毒处理。

尿分析和尿标本的收集、运送和保存;批准准则

尿分析定义为在快速,可靠、准确、安全、收费合理方式下,以通常的操作方法对尿液进行检验。

由此"尿分析"一词包括下列某些或全部内容

·肉眼评价(如颜色和透明度)

·物理学检测(如体积和比重)

·化学试纸条或试剂片检测

·显微镜检查

每个实验室应确定使用哪些程序及应作检查的范围。根据已有的评价结果及发表的研究成果;病人群体的类型(如无症状病人群体筛选产生极少的阳性结果,而住院肾科病人的阳性率较高)来确定程序和范围;程序的内容是否合适, 应向有关的医生进行咨询。是否进行显微镜检查应由各个实验室根据他们的病人群体来决定。

尿分析检测有如下一些目的:

·疾病的辅助诊断

·对无症状人群进行的先天性或遗传性疾病的筛查

·疾病进展的监测

·治疗效果或并发症的监测

滥用药物检测信息请参见NCCLS文件T/DM8-P,临床实验室的尿药物检测,推荐准则。

注:分委会推荐在处理和丢弃病人标本、质控品、校准品、能力比对检验样品,以及尿分析中使用的其它材料时均应采取全面的防护措施,参见NCCLS文件M29-T2,实验室工作人员来自血液、体液和组织感染传染病的防护,第二版,暂行准则的相应部份,并应参考地区、州及联邦政府关于医用废物弃置的法规。[dvnews_page=材料及设备]

2.材料及设备

2.1 材料

容器、试管和玻片上应有标记,以保证对病人有特定的标识,用于尿分析的所有材料均应无颗粒。

2.1.1 收集装置

合适的尿收集和运送容器的描述以及其它有关的信息,参见第8.6节。

2.1.2 离心管

适用于尿离心的试管具下列特点

·洁净的的塑料或玻璃管可作肉眼检查,并有足够的强度避免离心时破损。

·有体积刻度,确保尿液标准化。

·有盖。以减少因尿液溅出或离心形成气雾的危险。

·是尖底管以浓集沉淀物。

·无化学干扰物

·具标签,保证有特定的标识

注:不推荐重复使用离心管。

2.1.3移液管

推荐使用一次性移液管,以减少在重新悬浮和取出尿沉渣时具有的生物危险;不推荐重复使用移液管。移液管应清洁,无颗粒。

2.1.4 显微镜玻片/观察装置

最好使用市售的一次性标准化显微镜载玻片或经校准过计数室的观察装置。不鼓励使用一般的显微镜载玻片及盖片,因为得不到标准化和可重复的结果。

注:不推荐重复使用玻片。

2.1.5 试纸条

试纸条的塑料底片上有一个或多个化学检测块,以多种形式组成。尽管试纸条没有明显的失效表现、联邦政府的规定要求不使用超过失效期的试纸条。为保持试纸条的反应性,要求注意必要的储存要求,为得到良好的检测结果,需做到下列各点:

·按照厂商的要求将试纸条贮存于原装容器内,短暂地暴露于直射光和室内湿度都会使试纸条产生错误的结果。

·保持容器盖紧,并保存于厂商推荐的温度下。

·一次只取出少量试纸条,并立即重新盖紧容器。取出未用的试纸条不能再放回容器。

·不要合并各容器内的试纸条。·不触摸试纸条上的化学检测块。

2.1.6防腐剂和标本的贮存

尿分析不推荐使用化学防腐剂。建议在收集标本2小时内作尿分析。如延误检验,将标本置冰箱保存,适宜于一些化学成份的检测(胆红素和尿胆原除外),但会沉淀无晶形尿酸盐和磷酸盐,使显微镜视野模糊,如果同时做培养,在运送及处理过程中应保存于冷藏条件下,如作多项分析应将充分混匀的尿分作几份,按用途作不同处理。作为防腐措施冰箱保存的时间长度要根据各个尿检测项目,作为防腐措施的冷藏时间没有统一规定。(用于定时尿标本防腐的详尽信息参阅第9.0节)

2.1.7尿分析申请单

应设计申请单和计算机化的输入系统,以说明被收集尿标本的类型及要求收集的日期和时间。

申请单应可填写以下信息:

·标本收集的实际日期和时间

·运送前是否需冷藏

·实验室收到标本的时间及进行检验的时间

·申请的检测项目

申请单也应包括说明影响分析结果特殊情况的填写内容(如属长途运输标本加入的防腐剂;用药如阿司匹林、维生素或抗生素;月经期;收集标本前强烈运动及任何有关的临床信息)。与标本识别有关的其他病人信息参照第3.1节。

2.2设备

2.2.1显微镜

在尿分析实验室,应使用具有下列特点的新式的高质量显微镜:

·双目镜筒,可用双眼观察标本。

·内置光源。

·机械载物台,使玻片易于平稳移动

·基本的物镜组(例如10×和4×)及目镜组(如10×或12.5×)。

·如使用多台显微镜时,应用相同的物镜和目镜。

2.2.2试纸条判读器

干试剂化学结果,可用目测方法将反应的试剂条和不同颜色强度的模块标准图比较而确定。而现有的仪器可检测这些反应的强度,消除由反应时间和颜色判读所引起的差异。这些仪器是反射光度计,检测试条块表面反射的光量。

将许多质量保证的要求整合到系统内(如定时,校准和误差代码)。使用这些仪器按下列要求进行是很重要的:

·阅读并按照操作手册的要求进行操作

·建立并遵行保养计划

·保持仪器清洁,保证溅出液即刻擦去,按照统一要求(参见NCCLS文件29-T2,实验室工作人员预防来自血液、体液和组织传染病的感染--第二版备用指南。)

2.2.2.1判读器的校准

需按仪器厂商的手册中推荐的方案。

2.2.2.2判读器的维护保养

光路和机械部件应确保最佳操作,可参阅仪器手册判读器部份,并按照厂商推荐的方法。

2.2.3比重测定装置

折射计测定液体内溶解的固体总量,按溶液折射指数对溶液比重进行评价(参阅第3.4节)。

2.2.4离心机

2.2.4.1特征

作尿沉渣时应使用下列特征的离心机

·当转子旋转时具备锁盖子的功能。

·环境温度(15至25℃)

2.2.4.2校准和保养

验证离心机可否提供400×g的相对离心力(RCF),参阅厂商仪器手册中推荐的方案。实验室根据使用的需要确定定期验证的周期。

2.3质量控制

依据所有当地、州立和联邦法规,以及厂家说明开展质量控制。

2.3.1尿液化学分析

推荐使用两个不同水平的多项质控品,来确认每个化学检测项目检测的性能。每天至少要做一次质控,凡新开瓶试纸条应做质控。推荐用新、老批号的试纸条平行地对质控物及标

本进行测定。

一般使用市售质控品,另外可在工作中留取尿标本分为若干份,在不同时间检验,作为精密度的核查。

质控品的测定值应在实验室确定的限值内。

推荐参加室间的尿分析能力比对检验以评价化学分析的性能。

2.3.2尿液显微镜分析

市售质控品不适用于所有沉渣项目的检测。对病人新鲜标本的重复检测,可建立室内和室间二者的显微镜分析可重复性。对任何检测项目,检测结果允许落在上或下一档的报告范围内。

对镜下成份的有无或数量存在分歧,应重复做检查。如必要主管技师或实验室领导应解决存在的问题。每个实验室应建立复查异常沉渣结果的规定。也推荐参阅教科书,图谱,挂图及图片。[dvnews_page=尿液肉眼观察/物理学分析] 3.尿液肉眼观察/物理学分析

3.1标本的识别

尿分析申请/报告单提供的信息包括下列内容:病人姓名,年龄或出生日期,性别;病人所在区域(住院或门诊);标识号码;标本类型(如导尿,中段尿或其它);申请医生;填写申请单人的签字;诊断和主要症状;服用的药物(如维生素C);收集尿液的日期和时间,实验室收到时间(详细内容参见第8.6.6节)。

3.2标本可接受性

由于尿分析的准确性取决于送检标本的质量,所以应重视尿标本的收集和运送(参见第8.0节)。尿标本应迅速送达实验室,收到后尽快进行分析。通常公认在室温中放置2小时后尿化学成份有改变,有形成份开始变性。如不能在标本收集2小时内分析,标本应放冰箱保存(2-8℃)。标本在进行分析前应先在室温预温。若尿标本未能及时检测,应将延迟时间及温度的情况写明。不能接受无标签或标签不完整的标本。应在通知医生后弃去。

能同作肉眼和显微镜检查的最小尿量通常为12ml,(50ml更好)。婴儿尿标本可以用较少的量。

尿标本应收集在洁净、防漏的一次性容器内。标本应无粪便污染,无手纸或其它异物。达不到这些规定,应通知申请医生或指定的人员,要求另送标本。

3.3颜色、透明度和气味

尿颜色、透明度和气味的临床意义虽较少,但仍应在报告单上注明任何不正常的颜色、透明度和气味。氨味最常见于细菌降解尿素所致,表明为陈旧标本或尿路感染。为减少报告尿标本的颜色,透明度和气味时的模糊性和主观性,实验室应建立标准的方法和术语。

3.4比重

尿比重(SG)是在相同温度下,标本重量和同体积蒸馏水重量的比值。比值用数值表达。人尿正常值的范围在1.003到1.035。常用的测定比重的方法是间接测定法,利用数学计算或相关的关系估计比重值,一些实验室以渗透压代替比重测定。

常使用折射仪测定比重。该方法依据光的折射与液体内溶解的固体总量成比例。在尿分析中,折射仪应有用于尿液测定的校准量度关系。折射仪使用较普遍,因为在60°F(15℃)至100°F(38℃)间使用,温度可被补偿,而且它需要的尿量较少,当尿液含X-光线反差介质、血浆扩容物及大量的葡萄糖或蛋白可使结果增高。含有大量葡萄糖或蛋白的标本须对折射仪的结果进行纠正,因两者都是高分子量物质,与肾浓缩能力无关,但将增高标本的密度。用折射仪测定,每克/分升蛋白将增高比重0.003,每克/分升葡萄糖将增高比重0.004。对含X-光线反差介质或血浆扩容物的标本,可使用渗透压计或试纸条进行测定。因为它们不受这些高分子量物质的影响

谐波振荡也可用于比重测定。使用该技术的仪器可买到。测定谐波振荡并计算相对密度,该测定基于声音速度与密度间的良好相互关系。这些装置提供自动化的便利并与折射仪的测定有良好的相关性,且不需要净化混浊的标本。溶解于尿液中的物质与重力计测定密切相关。比色测定试纸条可作比重的估计,该方法检测离子浓度,依据随比重增加离子浓度也增加的关系。此纸条检测尿比重以0.005的增量递增,从1.000到1.030。碱性尿标本会影响指示剂系统,对pH碱性的尿液肉眼观察试纸条时其比重结果应加0.005。仪器判读试纸条时,仪器可自动按pH调整结果。中量蛋白(100至750mg/dl)可轻微增高试纸条的比重结果。非离子物质如葡萄糖或X-光线反差介质,不影响试纸条的检测结果。

液体比重计也正用于测定尿比重。液体比重计用置换法测定比重。经校正用于尿的液体比重计称为尿比重计。该装置有诸多不便;包括需要较多的尿液(10到15ml),用比重计需要漂浮在容器内,容器必须宽到比重计不碰触其壁。温度影响尿比重计判读,须作纠正;判读尿液新月形面有困难;尿比重计可能不准确,购买后需要标化。因此尿比重计不是尿比重测定的选择方法。

所有这些方法都存在影响因素,不仅受到分子数目的影响,而且受其大小和/或离子电荷带来的影响,大分子可比小分子的钠和氯离子得出较高的比重读数。因评价肾浓缩能力时尿素的价值小于钠或氯,所以在某些情况下需要确定尿标本的渗透压。

3.4.1质量保证

对比重试验的质量保证程序应包括每天使用质控品,按厂商质量保证建议进行。按照州和联邦的法规,建立文件保证对操作进行核查。[dvnews_page=尿液化学分析]

4.尿液化学分析

尿化学分析用尿"浸渍条"进行,不同厂商提供许多种类"浸渍条"供选择。这些"浸渍条"或试纸条为一个塑料条,上有一个或多个富含化学物质的反应块,尿与试剂块接触后产生显色反应。试纸条是一种简单快速、对尿液半定量检测的方法。下列各类型的试纸条较常用:

·酮体(如乙酰乙酸和/或丙酮)

·白蛋白

·葡萄糖

·白细胞酯酶

·血/血红蛋白

·亚硝酸盐

·胆红素

·pH

·尿胆原

·比重

4.1推荐使用的标本

虽然随机标本可用试纸条作尿化学分析,但较好的尿标本是混合均匀的第一次晨尿(浓缩8小时),不离心、保存于15至25℃。应在采集后2小时内检测。如标本不能立即运送和检测,采集后应置冰箱(2-8℃)。尿的组分如胆红素和尿胆原不稳定,细菌可消耗葡萄糖,如尿放置不用,其pH会改变。

4.2尿试纸条使用的防护

参阅2.1.5节中的有关说明。

4.3试纸条的使用

在使用某种试纸条时应对人员进行培训。不同厂商的试纸条不能交互使用。

试验前应认真阅读包装内附的厂商说明书。不同的产品方法可能不同。每一新批号厂商说明书,方法是否改变。

每项检测的反应块进行显色反应所需的时间不同,应按厂商说明书要求进行。用肉眼判读需要有秒针的计时装置,自动试纸条判读器可按照厂商说明,设置固定时间判读反应块。

了解使用的试纸条中每个项目试验敏感性和特异性是很重要的,这些信息在包装说明中。

肉眼判读试纸条,由于各人对不同颜色的判读有某种程度的差异。试纸条应靠近比色板在适当光源下判读。尿内存在有些物质能干扰化学反应,导致假阴性或假阳性结果。这些干扰物质或任何其它的局限制可阅读厂商说明了解,若尿试纸条结果和预期值不同,须按厂商方法和实验室手册寻找问题。

4.4确认试验

确认尿化学分析试验,用相同的或更敏感和/或更特异的方法检出相同的物质或用不同的反应或方法学检出此物质。重复试纸条反应或分析不是确认试验,通常用的确认尿化学分析试验包括硫柳酸试验证实,白蛋白尿,试剂片试验证实胆红素的测定结果。

除化学分析,手工和自动湿显微镜尿分析系统代表确认试验,可证实试纸检出的血白细胞酯酶和亚硝酸盐。微生物学研究是尿道感染的确认试验。试纸条显示白细胞酯酶和亚硝酸盐阳性,确认湿显微镜尿分析显示旧细菌尿和白细胞。通常常规尿细胞学和细胞诊断尿分析能用于湿显微镜尿分析指示异常的确认试验。诸如炎症、感染、肿瘤等,影象细胞计数和Feulgen染色的脱氧核糖核酸(DNA)分析,正被接受为尿乳头肿瘤的确认染色方法。[dvnews_page=尿的显微镜检查]

5.尿的显微镜检查

大量的文章建议需做尿沉渣显微镜检查,由于试纸条附加有白细胞酯酶和亚硝酸盐试验,理化结果正常的尿标本做显微镜检查的价格功效被提出质疑。进行显微镜检查应由各个实验室按其特殊的病人群体决定。通常在下列情况下作显微镜检查。

·医生要求

·实验室检查程序的要求(如有免疫抑制表现,泌尿-肾脏疾患,糖尿病或怀孕病人)

·理化结果异常

5.1标本的要求

尿标本的类型和质量极大地影响显微镜检查结果。为显微镜检查选择的标本是第一次晨尿。此尿是最浓缩的,为最大回收沉渣成份,关于尿标本类型,留取时间,伴随申请显微镜检查的尿理化结果等信息是非常重要的。

未放冰箱而超过了两小时的尿标本,不能接受作显微镜检查,管形、红、白细胞特别容易溶于低比重(<1.010)和碱性(pH>7)的尿标本中。

5.2显微镜检查的类型

大多数尿沉渣检查是用湿片和明视野显微镜检查,染色能极大地联系站长鉴定细胞和管型,通常活细胞染色适于湿片染色包括Sternheimer Malbin(结晶紫和沙黄O)和0.5%甲苯胺兰(核染色)参阅厂家说明或适当参考特殊染色法。

检查尿沉渣应使用现代的高质量的显微镜(见2.2.1节)。相差显微镜可增强沉渣的鉴别,对异常沉渣大力推荐偏振光显微镜用以鉴别脂类和结晶。

用自动或半自动仪器取代手工显微镜方法检测尿沉渣,该系统观察标本不用手工制备样本,并有助分析的分类,这些系统固有的特性可增加各次操作间的可重复性。

5.3显微镜检查

下列要求适用于离心尿液

显微镜检查结果的一致性是最基本的要求。一份书写适当,且关于进行各程序的操作手册,有助于保证实验室内全体人员以相同方式进行显微镜检查。每个人必须以同样方法检测沉渣,寻找存在的同样沉渣物,并用同样的标准去鉴定。

推荐实验室使用标化的商品系统,它能报告每单位体积异常沉淀物含量以代替每高倍或低倍视野的个数,用于实验室间的比较。实验室内需要标化的特殊因素,及每个相关的值列于下。

商品系统检测技术能提供相同的结果,这些技术可使用较小的量,并用不同的时间和速度进行检测,特殊系统厂商的建议应遵守。

如下的要求是根据传统方法学的知识定出的。

5.3.1检测的尿量

在研究所内用于检测的尿量必须标准化(如10-12及15 ml是常用的量),如用更小的量(如儿科、新生儿),在最终报告时应注明。

5.3.2离心时间

为保证所有标本有同样的沉淀物,推荐离心时间为5分钟。

5.3.3离心速度

推荐的相对离心力(RCF)大约为400。如用每分钟转数(RPM)计算特定的离心机相对离心力(RCF)用下式计算:

RCF=1.118×10-5×r×N2

此处

RCF=相对离心力

r=半径,单位:厘米(从旋转中心到试管底部)

N=每分钟转数

5.3.4沉渣的浓缩因素

所有尿标本都应浓缩到相同体积,有标化的商品系统,使用特殊的试管或吸管,保留特定体积的尿沉渣。

5.3.5被检沉渣的体积

有标化的商品系统提供,具有一定体积计数室的玻片,可装填特定量的浓缩沉渣。

5.3.6玻片及盖片

如使用玻璃的显微镜载片及盖片,推荐下列的尿沉渣检测和计算方法。

(1) 测量已混匀准备离心的尿体积。

(2) 标化离心条件(时间和速度)

(3) 测量留在管内的尿沉渣体积

(4) 检测放到玻片上的沉渣量

(5) 使用一标化的盖片

(6) 记录显微镜高倍镜的放大率

(7) 记录高倍视野的直径

(8) 计算并报告每毫升尿液的成份。例如用15ml尿

·高倍视野直径=0.35mm

·高倍视野的面积=0.096mm2

·盖片下的面积=484mm2

· =5040盖片下的高倍视野

·测定0.020ml在玻片上的沉渣≈1.2ml尿

·5040高倍视野≈1.2ml尿≈4000高倍视野/ml

因此

(数量/高倍视野)×4000=计数值/ml

5.3.7报告格式

在一定指定研究所每一个做显微镜检查的人都应采用相同的术语,报告格式和参考范围。并于哪种有形成份应该报告和计数,应由各个实验室根据病人群体和做试验人员的职业熟练程度作出决定。 5.4镜检内容的审察

在报告显微镜检查前对所得资料包括理化结果进行重新审察是必不可少的,这些报告所包含的数据应能证实显微镜检查结果,反之亦然。任何相互矛盾的结果都应在最终报告送交医生前解决。

5.4.1可识别的沉渣内容

能用尿显微镜检查识别的沉渣内容包括下列各项:

·上皮细胞 移形(尿路上皮细胞)

鳞状

肾小管

·造血细胞 红细胞

白细胞

·管形 透明

颗粒

腊样

细胞

红细胞

白细胞

细菌

宽幅

脂肪

·微生物 细菌 酵母菌 寄生虫

·结晶 无晶形 草酸钙 尿酸 三价磷酸盐

·其它 精子 粘液 污染物

为了鉴定其它成份,需要作进一步的显微镜检查

5.4.2染色

苏氏染色不能充分鉴定或确认尿沉渣成份,用一种或多种特殊染色代替,实验室进行的完全湿显微镜尿分析将能鉴定或确认下列成份:

·脂肪 油红O染色

苏丹III染色

·椭圆形脂体 同上

·细菌 巴氏染色 革兰氏染色

·嗜酸细胞 汉氏染色

瑞氏染色

姬姆萨染色

瑞一姬染色

巴氏染色

·血铁质 普鲁氏兰

通常使用特殊染色需要进一步制备,浓缩涂片,印制或细胞离心后涂片,有助于鉴定前面提到的成份。

巴氏染色是选择用于观察肾小管上皮细胞,异常尿路上皮,腺细胞和鳞状细胞和造血情况特征的方法,建议汉氏染色用于嗜酸细胞尿和可能的过敏性肾炎的观察。

5.5显微镜检查的质量保证

5.5.1程序的质量控制(QC)

所有的人员应按照写出的同样的方法,用同样的仪器,每个工作日必须进行质量控制,可用市售的含有红、白细胞的质控物。双份尿试验可用于管形、肾细胞和其它有形成份的精密度测定。

5.5.2报告的质量控制

所有人员应使用同样的术语并以标准格式报告结果,超出预期质控结果应进行分析,并采取适当的措施,同时应作记录。[dvnews_page=自动尿分析]

6.自动尿分析

自动尿分析系统将对用户提供最大的便利,可提高重复性,并减少标本的制备过程。

半自动尿分析仪可用来进行显微镜检查试纸条化学检查和比重测定(应用谐波振荡),该仪器可定量和标化尿沉渣的分析,一个层流无玻片显微镜,流体力学聚集染色尿用影象系统及高速影象处理系统进行观察。该系统自动分类发现一些成份,以便由合格的操作人员确认,该方法可提高测定结果的重复性且使用简便。

另外一些仪器是用设计好的试管离心标本,直接用显微镜观察。此系统可简化标本制备过程或减少需要的尿量。虽然这些仪器用不同的方法学,所有的方法都可对标本进行过筛,并有助于减少玻片,离心管的使用并减少尿标本的手工处理。

半自动和全自动试纸条判读器,也用于试纸条化学和比重测定,参阅2.2.2节。

自动尿分析仪仍在使用的初期阶段,随着技术的进步,未来自动尿分析仪将继续不断发展。[dvnews_page=质量保证]

8.单次采集尿标本的收集和运送

收集和运送尿标本到临床实验室的方法指南是重要的,因为进行诊断和治疗,可能依靠尿分析的结果。收集方法,容器,运送,贮存等条件的改变是有很大意义的,因为这些可能影响分析结果。

8.1概论

从病人收集标本,运送他们到实验室和贮存室,这些总的步骤作为例子首先与实验室以及负责这些步骤的临床人员进行讨论。对于购买得到的收集系统应遵守厂商的决议。容器的适用性及尿分析中清单的信息也要考虑。试剂和容器厂商关注的是最终使用他们的产品。

8.2尿标本的类型

8.2.1病人自己收集尿标本

下列类型的尿标本只需经指导后病人合作,不需直接的监管即可收集。

·随机尿

·第一次晨尿或8小时尿标本

·定时标本,包括24小时尿标本

8.2.2须监管尿标本的收集

收集下列标本可能需要经过临床实验人员参加留取或培训的人来留取。

·清洁中段尿

·尿培养标本

8.2.3联系站长病人收集的尿标本

收集下列类型标本时需受培训人员的主动参加:

·导尿标本

·耻骨上抽取标本

8.3病人的指导

8.3.1标本描述

尿标本除去导尿和耻骨上抽取所得外,可通过病人排尿取得,在此情况下不要污染阴道分泌物,包皮垢,阴毛,粉沫,油、洗涤剂和其它外源物质,标本不能从手纸回收。

8.3.2对病人的指导

很多标本可由临床实验室负责该步骤,简单指导合作的病人留取。

需采取如下步骤:

(1) 向病人强调洗手和全面清洗

(2) 给病人贴好标签的容器,要求他们核对瓶签上的名字。

(3) 给予口头说明和书面的说明单或卡片或显示尿收集方面更多信息的说明,给非讲英语病人说明时用他们本国的语言。

教病人盖好标本容器的盖子防止渗漏。

8.4收集标本

通常留取标本应在可供病人坐或站的隔离区域。

8.4.1随机标本

随机标本不在特定的时间收集,憋尿数小时后收集的尿标本对进行尿分析可能是需要的。

8.4.2第一次晨尿或8小时标本

第一次晨尿或8小时标本通常是病人经一夜睡眠起床后立即收集的标本。这也称为过夜或清晨标本。另外8小时时间也可用于调节失眠症,夜班工人和某些儿科情况。躺卧8小时后收集的标本用于证实病人是否有直立性蛋白尿。躺卧前立即将膀胱排空,于起身后收集尿标本,如此收集的标本是病人卧位时累积的尿液,任何在夜间排的尿都收集起来连同早晨第一次排的尿收集在一起。

8.4.3计时标本

计时标本在24小时期间特定的时间采集(如在早10点,或另外活动有关的特定时间,如进餐后2小时,或前列腺按摩后立即收集)。

8.4.4 24小时尿标本

如果需要测定24小时中溶质排渣总量,则需要严格留取24小时标本,因很多溶质呈现日间变化,最低浓度的儿茶酚胺,十七羟类固醇和电解质出现在清晨,而最高浓度出现在下午或稍后(24小时标本收集的更多信息,参阅9节)。

8.4.5清洁标本

8.4.5.1男性病人

(1) 采尿前病人应先用肥皂或小布巾洗手

(2) 指导未行包皮切除的病人退上包皮露出尿道口

(3) 用消毒清洁的小布巾或类似物洗洁阴茎头,从尿道口开始向上清洁。

(4) 病人开始排尿时排第一部份到便盆或厕所,收集中段尿到适当未污染的容器中,多余的尿排入便盆或厕所。

(5) 如病人不能执行所推荐的方法在提供联系站长时应戴手套。

8.4.5.2女性病人

(1) 采尿前病人应用肥皂或小布巾洗手。

(2) 病人蹲踞于便盆或马桶之上

(3) 用消毒小布巾或类似物清洗尿道口和周围处

(4) 病人开始排尿时排第一部份于便盆或马桶,中段收集于未受污染的(保持清洁)适当容器内。多余的尿排入便盆或厕所。

(5) 如病人不能执行推荐的方法给予联系站长时,应戴手套。

8.4.6导尿标本

导尿标本是通过尿道将导管插入膀胱后收集的标本,从导出的尿流中选择一部份作尿标本。

8.4.7耻骨上标本

耻骨上标本是通过下腹壁从膨胀的膀胱吸收尿液所收集的标本。

8.4.8微生物培养

如果采取了特殊防护措施(参阅8.6.4和8.7.3节)

从8.4.5节到8.4.7节所介绍的任何标本均可作微生物培养。

8.5婴幼儿标本的收集

用儿科和新生儿尿标本收集袋,此袋有低过敏原的膜粘于因太小而不能留尿标本的小儿身上。

8.5.1随机标本的收集过程

收集儿童随机标本,临床人员需按如下内容操作:

(1) 分开儿童的腿

(2) 保证耻骨会阴部清洁、干燥、无粘液,勿施于粉、油或清洗液于皮肤上

(3) 移去防护纸,暴露出粘连于袋上低过敏厚的膜

·对于女孩,拉紧会阴除去皮肤皱折,将粘膜紧压于阴道四周,从皮肤连接处开始,粘膜在直肠与阴道之间一直向前。

·对于男孩,将袋连于阴颈,将片状物压紧于会阴。

·确保整个粘膜牢固地粘于皮肤,粘膜无皱折。

·年龄大的孩子可按8.4.5节所述成人的方法留取。

(4) 定时察看容器(如每隔15分钟)

(5) 从病人处收回收集的标本并标明记号。

(6) 如无进一步污染,将标本倒入收集杯,杯子贴上标签,送去检查。

8.5.2微生物培养标本的收集方法

为了收集儿童的微生物培养标本,临床工作人员需作到下列各项:

(1) 开始此步骤前,临床工作人员须用肥皂或小布巾洗手。

(2) 将儿童腿分开。

(3) 用肥皂和水清洗耻骨和会阴区,使之干燥,以保证该区清洗干燥,无残余肥皂,勿施粉末,油或洗涤剂于皮肤。

(4) 除去防护纸,暴露低敏原的膜粘连于袋子。

·对于女孩拉紧会阴,去除皮肤皱折,将粘膏紧压于阴道四周,人皮肤连结处分开直肠与阴道一直前进。

·对于男孩将袋连于阴颈,将片状物压紧于会阴。

·确保整个粘膜片牢固粘于皮肤,粘膜片无皱折。

(5) 定时观察容器(如每隔15分钟)

(6) 收回收集的标本,并标明记号

(7) 如无进一步污染,将标本倒入收集杯,盖紧塑料盖,杯子贴上标签送检。

8.6收集用容器

8.6.1构成

适用的初步收集容器和运送容器应该是清洁、防渗漏,无颗粒并由透明,易处理与尿成份不起反应的材料制造的。容器和盖子应不含干扰物质如清洁剂,一些实验室喜欢用无菌容器收集尿液。

8.6.2重复使用

不要重复使用标本容器

8.6.3容量

第一步收集的容器容积最少应有50ml,圆形开口,至少直径为4公分,容器应有宽底,避免偶然倒出。小的特殊容器,用于年幼儿童收集标本。

8.6.4运送和贮存

运送时用的容器应有严密的盖子,以防止运送时内容物漏出,盖子应易于盖上和取下。实验室应保证标本识别方法的完善和标本从收到到分析的状况是良好的。例如假定标本被存冰箱,实验室应保证冰箱有良好的维护,且标本迟延递送,不会影响标本的完善保存。

8.6.5无菌容器

偶尔一份尿标本送来作微生物研究和尿分析,如标本收集用于微生物研究需要有严密盖子的无菌容器,标本应先送细菌研究,再送尿分析检查,除非已用灭菌技术将标本分出一部份用于尿分析,如果标本收集和分析中间超过两小时建议也采用无菌容器。

8.6.6标签

容器应设计一种放冰箱时仍能粘牢的标签的容器,瓶签应包括充分的空白处,以填写包括病人全名,特有的标识码,标本收集日期,时间以及容器内如放有防腐剂写出其名称。某些实验室可能需要的标签包括另外的信息或条形码。为了保证良好的检测,标签贴于容器上,不可贴在盖子上。

8.6.7防腐剂

标本采集后2小时内不分析时用特别设计的化学防腐剂或介质运输装置进行尿标本防腐。如果分析延迟(采集后大于2小时)标本用于测试其它的不稳定分析物,或标本被固定用于作微生物学研究时建议防腐。

8.7标本的运送和贮存

8.7.1运送

如标本被运送,容器需有严密的盖子以防止内容物渗漏,如果恰当,采用第二个容器,防止可能溅出物的污染,迅速将尿标本送实验室,以便快速检测。运送实验室应保证标本的完善保存。(如气压管道系统)

8.7.2冰箱

如标本不能立即运送和检查,收集后应置于(2-8℃)冰箱。(参阅2.1.6节中更多的信息)

8.7.3微生物学检查

如需要微生物学检查,而标本不能立即送到实验室,采取下列步骤:

(1) 标本放于2-8℃冰箱至24小时,此时可得到有用的培养信息。

(2) 一部份尿移于含检菌防腐剂的运送管内,许多情况下是通用的。防腐的标本不需冰箱保存。

8.8标本的合格性和质量保证

8.8.1检查

为了保证适合分析,实验室收到尿标本后应进行检查,保证标本的适用应考虑以下各点:

·申请单上与容器标签上的信息一致

·标本收集和实验室收到标本中间所花费的时间合乎要求

·如运送迟延,并要求微生物研究,标本有放冰箱或放有适当防腐剂

·容器及条件(如盖着盖子)合适

·量适当且不存在污染物

·放或未放化学防腐剂符合标本用途

8.8.2合格性

如标本不能达到合格标准,立即与主管医师或护士站联系,以决定进一步的措施。在与临床人员互相协商并达到一致意见以前不能弃掉"不接受"的标本。

8.8.3文件

建立质量保证计划以确保如下文件的编制

·始终如一的标本收集方法源于正确的标本类型,要求分析项目适当的标本量。适当容器的使用和合适的标签。

·标本及时送交实验室,并按照推荐的过程执行。

·标本处理时要保证实验室收到检本后迅速检测,并采取正确的贮存方法如避免热及阳光,冰箱保存。

9. 24小时尿标本的采集及防腐

如果需要测定24小时期间的溶质排泄总量,则需要严格定时的24小时尿标本,因为很多溶质呈现昼夜间的变化,儿茶酚胺,17羟类固醇和电解质等的最低浓度出现在清晨,然而最多浓度出现在中午和稍后。

9.1 24小时尿标本的收集

9.1.1容器

收集标本到一个或数个易处理的,广口的,清洁的塑料容器中(有塑料盖),大到足够装约3L,在24小时期间内将收集的容器保存于冰箱内或冰块间。提供琥珀色容器,用于光敏检测。

对卧床的导尿病人,将袋子存放于冰上,如病人可走动,定期排空袋子,将内容物存放冰箱。

9.1.2标签

收集瓶上的标签应包括病人的标识,试验申请,所用防腐剂,收集期间开始和终了的日期和时间。如果防腐剂溢出会伤害病人,在瓶签上加上适当警告,并口头向病人解释这些情况。

9.1.3防腐剂

如果需要特殊的防腐剂,在开始收集尿以前将它加入到收集瓶内。参阅9.2节后的表,选用适当的防腐剂。

9.1.4收集

24小时收集标本,应从令病人排空她或他的膀胱,或导尿袋,在固定的时间开始,并弃掉标本,注明开始收集的日期和时间。

9.1.5指导

指导护士或病人,在24小时收集期间,收集全部排尿,并加到收集容器内。

9.1.6结束

收集开始后整24小时收集中止。令病人排空他或她的膀胱或导尿袋,并将这些标本加入到收集容器内。

9.2 24小时尿防腐剂的概述

下表(PP.19-21)24小时尿标本的防腐剂是根据最大的临床参数实验室的推荐和两本主要的教科书所列出的。这些不同来源之间一般的和特殊的区别和矛盾已注明,他们的临

床意义不清楚。检验人员被促使遵照临床实验室进行检验的有关建议。临床实验室进行这些试验时被促使研究防腐和运送的最佳和可接受的方法。

当申请不止一种试验时,对标本的要求可能有矛盾,一种处置是收集多份24小时标本。另外的处置是混合每一次留的尿标本,再分每一次的尿标本与相等体积,并将分开的部份倒入适当的大的尿容器。另外推荐使用防腐剂时大的容器只需一半大小(分用于二种方法)或三分之一大小(分用于三种方法)。总量应该是通过24小时期间收集尿液的总量。第三种处置用容器将尿标本分为二份,每份加入适当的防腐剂。

偶尔病人24小时尿量超过单个容器的容量时,要用两个24小时容器,两个容器内的尿在检测前必须很好地混匀。最常用的做法是在两个尿容器之间往返倾倒尿标本。第二个容器内防腐剂的量应减少,因为收集在第二个容器内的量一般会少一些。 第四篇 粪便标本采集指南

一、检查主要目的

1. 了解消化道有无炎症、出血、寄生虫感染、恶性肿瘤等情况;2.根据粪便的性状、组成、间接地判断胃肠、胰腺、肝胆系统的功能状况;3.了解肠道正常菌群分布是否合理,检查粪便中有无致病菌以协助诊断肠道传染病。

二、标本采集要求

1 容器

收集和运送粪便标本的容器应洁净、无吸水、防漏渗,一次性使用;做细菌培养的容器应用无菌有盖的专用容器。

2 标本收集

①常规检查标本:应取新鲜标本,选取异常成分的粪便,如含有粘液、脓、血等病变成分的标本。外观无异常的粪便须从表面、深处及粪便多处取材,取3-5g粪便送检。灌肠或服油类泻剂的粪便常因过稀且混有油滴等,而不适于做检查标本。不能采集便盆或坐厕的粪便送检标本。粪便标本应避免混有尿液、消毒剂及污水等杂物,以免破坏有形成分,使病原虫死亡和污染腐生性原虫。

②寄生虫检查标本

血吸虫孵化毛蚴:标本应不少于30g,必要取时整份送检;如作检查寄生虫虫体及作虫卵计数时应采集24h粪便。

连续送检:避免肠道寄生虫和某些蠕虫有周期性排卵现象,未查到寄生虫和虫卵时,应连续送检3天,以免漏检。

检查蛲虫卵:须用透明薄膜拭子或玻璃纸拭子于深夜12时或清晨排便前,自肛门周围皱襞处拭取粪便,并立即送检。 检查痢疾阿米巴滋养体

从脓血和稀软部分取材,立即送检;转送及检查时均需保温,以免滋养体因失去活动力而难以检出。

③无粪便排出而又必须检查时,可经直肠指诊或肠拭子取标本。

④粪便培养标本,用消毒棉签采取粪便的异常部分于无菌杯,也可用肠拭子蘸等渗盐水,由肛门插入直肠4-5cm处,轻轻转动,取出粪便少许,放入无菌培养试管中,盖好送验。用肠拭子直接采取标本进行培养,可提高阳性率。

3.标本的标记

标本容器必须有标记,包括:病人姓名 特定编码(住院病人的病区 床号),标本收集时间。标签应贴容器上,不可贴在其盖上。

三、标本运送与接收

1 按上述要求留取的标本及时送检。

2 标本的接收标准与拒收

检验申请单应清楚填写下列内容:患者姓名 性别 年龄 科别 床号 住院号 标本类型 临床诊断 检查项目 采集标本日期和时间,否则拒收。

标本容器及标识是否符合要求,标记内容与医生所填写申请单的内容是否完全一致,否则拒收。

第四篇: 微生物培养临床标本采集

一、血液细菌培养标本的采集和处理 临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者,需做血液细菌培养以明确病原。及时、准确地从患者血液中分离出病原菌,才能正确实施有效的抗菌治疗,从而有助于治愈率的提高和医疗费用的降低。

1、采血时机:在患者发热期间越早越好,最好在抗菌治疗前,以正在发冷发热前半个小时为宜。

2、采血次数及间隔:在急性发热性疾病如脑膜炎、细菌性肺炎,需马上做抗菌治疗:或急性骨髓炎、化脓性关节炎等要紧急手术的患者,应立即从两臂分别取2份标本。对感染性心内膜炎患者,在24h内取血3次,每次间隔不少于30min;必要时次日再做血培养两次。对发热原因不明者两次抽血间隔60min;必要时于24~48h后再抽血2次。因为1次血培养不足以说明问题,且会遗漏阳性结果。国外有人统计1次血培养可检出菌血症的80%,2次检出90%,3次检出99%。国内统计17家医院1次血培养阳性率10.8%,18家医院2次以上血培养阳性率14.8%。

3、采血部位:多次采血应在不同部位的血管穿刺以排除皮肤菌群污染的可能。要避免从血管插管内取血,因插管常被污染其结果不能反映真实情况。在不同部位取血,2次分离出同样菌种才能确定病原菌的有力证据。

4、采血量:成人菌血症或败血症的血液中含菌量较少,平均1~3ml血液中仅有1个细菌。所以采血量一定要足够。成人一般为10ml,新生儿与婴幼儿为1~2ml。有人引述多篇文章指出:对成人每增加1ml血量平均能提高阳性率3.2%。

5、培养基选择:培养基的质量对血液细菌培养阳性率的高低有非常重要的作用。市售培养基良莠不齐,选购时要慎之又慎注意质量,以知名大厂家生产为益。国内报告应用不同培养基的两组血培养结果,1组阳性率为9.7%,另1组为16.1%,可见培养基影响之大。抗凝剂现多用聚茴香脑磺酸钠(sodium polyanethol sulfonate SPS)浓度为0.025%~0.05%。因兼有抗凝、抗补体、抗吞噬几拮抗某些抗生素的作用,故较其他抗凝剂为优。

6、培养条件:尽管病原菌仍以需氧菌和兼性厌氧菌为主,但亦有少部分为真菌、厌氧菌或L型菌感染。特别是真菌感染有增加趋势可占病原菌10%以上。所以必要时应选取响应培养基在不同环境下培养。

7、盲传的必要:肉眼和仪器都不能确保在瓶外观察到所有的阳性菌生长,国内外的经验都证明这一点。因此在培养终结时盲目传代1次,以防漏检。

8、无菌操作:无论采取何种方法,在血液培养的全过程,从皮肤消毒、标本采取、运行、分离移种等,皆应十分注意无菌操作。用头皮针为新生儿和婴幼儿取血时,应换针头再将血注入培养瓶中。

二、下呼吸道分泌物(痰培养)的标本采取与质量要求

下呼吸道分泌物(痰)的细菌学检查对病原学诊断起着重要作用,但目前亦存在着严重的问题——标本的质量问题,因此,往往造成作出的病原菌诊断和实际引起感染的病原菌脱节,以致造成抗菌药物的应用不合理甚至耐药菌的出现和流行。痰标本的细菌学检查应注意如下几个问题。

1、标本的采取:自然咳痰:要求患者清晨留取,留取标本前应用水漱口3次,之后用力咳出。咳痰较困难者可用雾化蒸气吸入以利痰液咳出。幼儿可用手指轻扣胸骨柄上方以诱发咳痰。

2、气管穿刺法:仅用于昏迷患者,由临床医师进行。

3、纤维支气管镜抽吸:通常用于在患者行纤维支气管镜检查时顺便抽取。

4、胃液抽取法:多用于可疑患有肺结核的患者在有可能将痰液咽下的情况时采用。

5、标本的运送:标本采集后应立即送检,应争取在20min内送达检验科微生物室。

6、标本的贮存:微生物实验室收到标本后,应立即进行标本的质量检查及培养接种,如不能立即进行检查则应暂时放于普通冰箱(4℃),冰箱中存放的标本应在24小时内进行检查。

7、标本的质量检查:(1)制成涂片行革兰染色;(2)于显微镜低倍镜下检查(10x10),观察WBC及扁平上皮细胞存在情况,表1作为参考:

表1 痰标本显微镜检查的分类

分类

细胞数/低倍镜视野

(级)

白细胞

扁平上皮细胞

<25

<25

>25

<10

>25

10-25

>25

>25

10-25

>25

<10

>25

*分类中1~3类不做培养,要求重新留取标本:

4、5类为合格标本:6类为气管穿刺液,如未见到白细胞,而扁平上皮细胞>10/低倍镜视野,亦应重新留取标本。

8、特殊要求则作特殊处理,如做抗酸染色查找抗酸菌等。

9、分离培养:痰标本最好接种3种培养基,即血琼脂培养基、巧克力琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基(中国蓝培养基)。

10、显微镜检查的初步报告:在用显微镜检查标本质量的同时,对合格的标本(可进行分离培养的标本),往往可以作出初步的病原学参考诊断,如革兰阳性菌、革兰阴性菌、球菌或杆菌、肺炎克雷伯菌、肺炎链球菌等。

三、尿液细菌培养标本的采集和保存

尿液的细菌培养检查对于膀胱和肾脏感染的及早发现和病原学诊断很有价值。对于尿道、前列腺以及内、外生殖器炎症的诊断也有一定价值。

1、标本收集:需在应用抗菌药物之前或停用抗菌药5d之后留取尿液标本:尿液 在膀胱内应停留6~8h以上,使细菌有足够的时间繁殖。(1)清洁排尿法:女患者以手指将阴唇分开,用肥皂水或碘伏清洗外阴,然后以清水冲洗尿道口周围,擦干并排出前段尿液后,用无菌容器接取中段尿;男患者应翻转包皮冲洗,用2%红汞或1:1000新洁尔灭消毒尿道口;婴儿消毒其阴部后,将无菌小瓶直接对准尿道口以橡皮膏贴于皮肤上,待排尿后立即送检。(2)膀胱穿刺法:为避免尿道正常菌群的污染,收集尿液最好的方法是膀胱穿刺。尤其做厌氧菌检查时必须采用膀胱穿刺法。穿刺时膀胱应充盈,皮肤严格消毒后用装有19或20号针头的注射器在耻骨联合距脐1/3处穿刺。膀胱穿刺的适应症有:[1]有尿道感染的临床症状,但中段尿培养细菌数很低,而又难以确定感染源者。[2]婴幼儿、新生儿不能用导管者。[3]怀疑有厌氧菌感染时。(3)肾盂尿采集法:若取左右两侧肾盂尿,应请泌尿科医生采取,左右侧的标本要标记明确,以免出现错误。(4)用封闭式引流装置的留置导尿患者留取尿液标本培养时,用适当的消毒剂严格消毒引流管和导尿管连接处的管壁,用装有21号针头的注射器穿刺导尿管壁吸取尿液。不可打开导尿管和引流管连接处收集标本,培养用的尿液标本也不能从引流袋中留取。(5)膀胱镜检查、输尿管插管或逆行肾盂造影时,收集的尿液可用来做细菌培养。(6)做病毒学检测时用容器收集清洁的标本即可,不需特殊方法收集。标本中加入抗生素可抑制细菌的过度生长,且标本需冷藏。 检测衣原体时,尿液标本不能代替尿(阴)道分泌物。

巨细胞病毒(MC)的检测,需多次检测标本,因其释放常是周期性的。

结核分枝杆菌的检查,应留取24h尿,无症状的血尿可能是肾结核病,应用清洁排泄法收集连续3份晨尿标本。

淋病奈瑟氏菌培养留取清晨第一次尿,盛于无菌容器内立即送检。

尿道结石标本可作其内部及表面培养,内部培养出的细菌与表面存在者可能不同。

2、标本的运送和保存:用无菌带螺帽的容器盛标本,标本应在1h内送检。超过2h者应重送,否则易致假阳性结果。

标本送达实验室后,若不能立即接种,可将标本置于冰箱(4~8℃)保存,但不得超过6h。

四、粪便标本微生物学检查的质量要求

关于腹泻患者粪便中肠道病原微生物的检测,根据世界卫生组织(WHO)腹泻病纲要和我国卫生部临床检验中心有关操作规程要求,粪便标本应取材得当,并严格按细菌分离培养操作规程进行各种病原微生物的鉴定。

1、标本采集:粪便标本应在发病早期并且尽量在用抗生素治疗前采集,直接用棉拭子,也可用直肠拭子,取双份粪便标本,1份置Cary-Bliar运送培养基中,另1份置灭菌小瓶中送检。

2、显微镜检查:粪便直接涂片革兰染色,可作为艰难梭菌、弧菌、弯曲菌、葡萄球菌、白色念珠菌等初步筛查,盐水滴片用作肠道寄生虫检查。

3、标本保存和运送:标本置Cary-Bliar运送培养基中,记录姓名、日期、标本号、放置冰壶中及时送检,一般可保存24h。

4、接种:收到标本应立即接种选择性培养基。

5、轮状病毒检测:可直接用ELISA法检测粪便标本中轮状病毒(RV)抗原,或从粪便中提取RV-RNA做聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),根据轮状病毒特有RNA基因片段大小及其排列特点,判断结果。

五、生殖道标本的采集

1、男性标本:(1)如疑为急性淋病耐瑟菌或其他化脓性细菌感染应在清洗龟头部后,以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒剂消毒后,挤出分泌物立即以无菌棉拭子采取,立即送检,或以专用的细拭子插入尿道口1~2cm,旋转采取。(2)如疑为前列腺炎、精囊炎的慢性淋病耐瑟菌感染应由医师按摩前列腺,以无菌手续自尿道口采取前列腺液送检。

2、女性标本:(1)成年妇女自宫颈采取标本,应在扩阴器的支持下,选取有炎症或分泌物部位,先以无菌棉拭子拭去表浅层分泌物,再用另一拭子取分泌物送检。如做厌氧或真菌培养应另外采取标本。(2)如未成年幼女疑患性病传播疾病时,不应使用扩阴器,以一无菌拭子在阴道口处采取分泌物送检。

六、胸腹水、脑脊液标本的采集

1、均由医师以无菌手续穿刺取得,必须应用带盖的无菌容器,立即送检。

2、此类标本在接种前应离心1500r/min15min或做增菌培养。

3、应接种血琼脂及巧克力琼脂温育于CO2环境中,结核分枝杆菌的培养应接种专用培养基。

第五篇:标本采集常见错误分析

送检标本的质量控制包括分析前、分析中、分析后三个主要过程的质量管理。大多数不满意的检验报告单可溯源到标本质量不符合要求,而分析前标本的质量控制对检验结果的可靠性有至关重要的影响,标本采集是影响标本质量最重要的因素之一。我们在加强与临床、护理沟通的同时,坚持标本的核实验收和不合格标本退回制度,目的就是为了把好标本质量关。以下是近年来血液及其他标本采集中最常见的错误,希望能引起重视。

1.凝血不充分:此类错误排在第一位,主要是抗凝血中存在小凝块,多发生在血常规检测中,为采血后标本没有充分颠倒混匀所致;另外,标本量过多,由于抗凝剂的相对不足,血浆中出现微血凝块的可能性增加。微血凝块除易阻塞检测仪器外,由于血液内部分成分的消耗而影响检测结果。一份只有仔细检查才能发现小凝块的标本,可以使血小板降低30%甚至更多,红细胞、白细胞计数也可以降低10%左右。我们规定,对用于血常规的标本均轻轻颠倒并仔细观察,绝大部分可以检查出。 2.抗凝剂与血液比例不正确:在凝血功能测定中,常有一些标本量明显不足,特别是儿童和入院检查病人标本,由于小孩采血难,入院时需检查项目多,最易发生抽血量不足,使PT、KPTT和TT假性延长,将误导临床诊治。因此,血液未到刻度的标本一律退回重抽。

3.标本溶血:许多指标在红细胞内和血清(血浆)明显不同,溶血可使LDH、HBDH、血K+、AST 、ALT或等值异常升高。此类错误是采血时的一些不良习惯造成,如:压脉时间过长,采血不顺利、抽血速度太快、血液注入容器时未取下针头或用力过猛、等均可造成溶血。我们作过实验,选择20位体格检查者,用两种方法进行比较:⑴用注射器抽血后不去除针头直接将针头插入真空采血管,这时在真空管负压作用下针管内的血液被吸入;⑵用注射器抽血后先除去针头,然后打开真空采血管盖子缓缓注入标本,两种采血方法的标本同时作部分生化项目检测,结果是:前者比后者LDH上升23.4%-58.2%,平均33.7%;HBDH上升22.5%-61.4%,平均35.4%;AST上升6.7%-31.6%,平均13.7%;ALT上升4.7%-18.2%,平均11.4%;血K+上升23.7%-71.2%,平均36.1%,其它如TP、GGT和UREA等也有或多或少的变化。因此,我们主张用真空采血系统自然流出的标本为宜,如果必须用注射器抽血,抽血后要取下针头,再缓缓将血液注入标本采集管。对于未用真空采血系统的单位,若注射器和针头连接不紧,采血时有空气进入或产生泡沫,使用劣质采血器,标本收集管没有干燥均易造成溶血。

4.采血部位不当:有些病人需多次检查,或输液时间较长,有的护士会在病人输液更换瓶子时放出一些血液送检,即使先去除前面的10ml血液,结果也有明显变化。如一例输脂肪乳后直接从输液的静脉中采血,导致了许多结果错误,影响前三位的是:TG为12.4mmol/L(平时为1.0 mmol/L左右),血小板达560×109/L(上升了4倍多),总蛋白浓度从60左右上升到91.6(g/L)。其它常有明显影响的有血糖、血电解质等项目。虽临床也知道正确的采血方法,但由于护理人员流动性大,工作量超负荷,不时有此类标本送检,只有反复与临床沟通、宣传,加上对标本审核,对于血细胞比例明显不对,结果不合理或有异常变化,及时与临床联系,减少不合格报告发出。

5.采血量不足:对于血培养而言,采血过少可降低培养的阳性率。有文献报告,当培养的血量从2ml增加至20ml时,血培养的阳性率增加30%—50%,培养血量每增加1ml,阳性率增加3%—5%。由于标本已经注入培养瓶,不能检查是否符合要求,只有加强沟通交流,共同努力提高检验质量。

6.标本采集时间不当:对细菌培养、激素检查、找疟原虫或丝虫病原体,需在特定的时间,以提高阳性率。

7.标本运送和处理不及时:标本的运送虽不属采集范畴,但标本采集再规范,若不能及时送检,将严重影响检验质量。尿常规标本需在二小时内检测完成,否则细胞等有形成分开始破坏;离体过长的标本作血细胞分析时会影响分类结果;生化检测的标本也因为细胞内外物质交换而变化。我们要求标本及时送检,到检验中心的标本尽快测定,不能及时测定的生化、免疫等标本及时分离血清,加盖并置4℃冷藏。

以上是标本采集过程常见的错误,属于分析前质量控制的重要部分,做好分析前质量控制是保证检验结果正确是前题和关键。有人对一份临床标本的整个测试时间分布进行统计,结果显示报告申请、抽血和运输占整个测试时间的55%,标本编号、分离和编程占14%,上机检测占4%,分析前的工作超过70%;用于仪器检测的工作量为25%;核对和报告的时间不足3%。除标本采集外,病人的准备工作,所用药物等对结果也有影响。如检查2小时血糖时没有按规定进餐(1个鸡蛋,2根油条,1个包子加1杯牛奶),结果为7.4 mmol/L,重新检查按规定饮食(75克糖溶于250 ml水中,5分钟内喝完),结果为5.4 mmol/L。

质量是检验科的生命,质量的提高要全部医务人员的共同努力,我们应主动和临床乃至患者的沟通,加深了解。通过沟通,让双方都能够从思想上认识到分析前质量控制的重要性,并能真正重视标本的采集工作,从而保证送检标本的质量。另外,检验科工作人员也要提高质量意识,认真负责地做好标本的保存、处理等工作,并严格执行《不合格标本拒收制度》,做好解释工作。

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