第一篇：核酸提取流程范文
核酸的提取
核酸包括DNA、RNA两种分子，在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在，核酸提取的主要步骤为： 裂解细胞
去除与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂类等生物大分子，去除其他不需要的核酸分子，如提取DNA分子时，应去除RNA，反之亦然。
沉淀核酸
纯化核酸，去除盐类，有机剂等杂质
(一)DNA提取的经典方法
DNA提取的经典方法，即所谓的酚-氯仿提取法。因为使用两种不同的有机溶剂交替抽提更容易将蛋白除去，提取次序为酚、酚/氯仿(1：1)、氯仿，这种方法提取的DNA纯度高、片段大、效果好，缺点是较为繁琐。
说明：
回收上层水相时，一定不要接触两相的界面，以免将蛋白质等物质吸入新离心管。 沉淀DNA，无水乙醇是首选的有机溶剂。另：异丙醇、醋酸钠等。
70%乙醇漂洗DNA，是为了去除残余的盐类，去除过量SDS和酚等杂物，因为SDS在70%的乙醇中保持溶解状态，不与DNA共沉淀，从而通过弃上清液去除这种去污剂,避免对以后PCR反应的影响。 TE缓冲液：10mmol/L Tris-Hcl 1mmol/L EDTA pH 8.5或 8
RNA的提取
RNA提取条件较DNA要求严格，主要是因为临床标本及实验室环境中，存在大量对RNA有强烈降解作用RNase。RNase是一类生物活性非常稳定的酶类。这种酶耐酸、耐碱、耐高温，如煮沸也不能使之完全失活。 蛋白质变性剂可使之暂时失活，但变性剂去除后，又可恢复活性。除细胞内RNase以外，环境中灰尘、各种实验器皿和试剂、人体的汗液及唾液中均存在RNase，因此在提取RNA时，关键要避免RNase对标本的污染及防止RNase对提取的RNA的降解。 1.提取RNA所用器皿的处理及溶液的准备
塑料制品：如试管、EP管、Tip头，使用灭菌的一次性用品。
玻璃用品：如烧杯、试管和其他用品，常被RNase污染，使用前必须于180oC干燥8小时以上，或用0.1轕C水(焦碳酸二乙酯)浸泡处理。
DEPC是RNase的强抑制剂，作用机制是通过与蛋白质中的组氨酸结合，使蛋白质变性。37℃浸泡2小时，然后用灭菌水漂洗数次，于100℃干烤15分钟，去除器皿上残余DEPC。
所需溶液的配制：必须用高压灭菌的水和RNA提取专用的化学试剂配制溶液，用干烤过的药匙称取试剂，把溶液装入无RNase的玻璃器皿。
严格来说，所有溶液均应用0.1轕C于37℃处理12小时以上，然后于100℃加热15分钟或高压灭菌15分钟，去除残余DEPC。
2.RNA提取中RNase污染的控制
最主要的潜在污染源是操作人员的手，手直接触摸之处毫无疑问会留下RNase，另外，说话带出的唾液也富含RNase，故在涉及RNA的一切操作过程中，都应戴一次性手套和口罩。 实验中，如接触了“脏的”玻璃器皿和其他物品以后，手套就可能污染RNase，因此RNA提取实验中，应勤换手套。 RN A提取方法
下面以异硫氰酸胍结合氯仿-酚提取法介绍RNA的提取。
异硫氰酸胍是一种强用力的蛋白质变性剂，能迅速溶解蛋白质，导致细胞结构破碎，核蛋白由于其二级结构的破坏消失而迅速与核酸分离。
RNase虽可耐受多种处理，(如煮沸)而不失活，但却会被4mol/L异硫氰酸胍和-β巯基乙醇(破坏RNase蛋白质中的二硫键)等还原剂所灭活，因而可从组织中分离出完整RNA分子。
因此上述试剂是制备RNA的常规试剂。
200µl血清(浆)
↓
加入200µl 20%PEG6000
↓
4oC，3小时，12000rpm，4℃离心15分钟
↓
弃上清，加500µl裂解液(含异硫氰酸胍、-β巯基乙醇等)，混匀
↓
加50µl NaAc，500µl饱和酚：氯仿：异戊醇(50：49：1)，充分混匀，冰浴10分钟
↓
4℃12000rpm，离心5分钟
↓
小心吸取上层水相移至一新离心管中，避免吸取两相之间的蛋白质，用氯仿-异戊醇再抽提
一次 ↓
加2.5倍体积无水乙醇，冰浴30-60分钟
↓
4℃12000rpm，离心10分钟
↓
弃上清，沉淀用70%乙醇洗二次，65℃烘干
↓
用10µl DEPC水溶解RNA，并加2u RNasin
↓ -20℃保存备用
(三)核酸提取的其他方法(简单介绍): 胍盐提取结合二氧化硅吸附法
二氧化硅具有特异吸附核酸的特性，异硫氰酸胍可使细胞裂解,因此在高浓度异硫氰酸胍存在下，从细胞(包括细菌)或病毒颗粒中释放出来的核酸成分可以结合在二氧化硅上，利用此特性可提取血液和尿液中DNA和RNA。
2.TRIzol试剂提取RNA方法：
TRIzol试剂盒是由GIBCO BRI公司推出的产品，其操作方法简单方便，一小时内即可完成。用TRIzol试剂裂解细胞，再加入氯仿，离心后可见三层，上层为透明的水相含有RNA，中间层含DNA，下层为红色的有机相，含蛋白质。 3.旋转离心柱提取
旋转离心柱技术是用于微量核酸分离纯化的较为简单的方法，属于硅吸附方法的一种，市场上的离心柱虽各有特色，但在原理上通常可分为三个部分： 利用裂解液促使细胞破碎，使细胞中的核酸释放出来。
把释放出的核酸特异地吸附在特定的硅载体上，这种载体只对核酸有较强的亲和力和吸附力，对其他生化成分如蛋白质、多糖、脂类则基本不吸附，因而在离心时被甩出柱子。 把吸附在特异载体上的核酸用洗脱液洗脱下来，分离得到纯化的核酸。
此法也可用于DNA测序前核酸的纯化，又叫过柱纯化。
旋转离心柱技术具有广泛的发展前景，该产品可应用于生物学、遗传学、免疫学、考古学、法医学等各方面的基因分析。
聚合酶链反应
应用聚合酶链反应(PCR)技术测定临床标本中的病原体核酸成分，是一种高度敏感，且最为直接的检测手段。由于临床标本中含有蛋白质、脂类等物质，可干扰PCR反应，故在做PCR反应前必须进行核酸提取。
经典的核酸提取方法通常是加去污剂(SDS等)裂解细胞，经蛋白酶处理、有机溶剂提取及乙醇沉淀等步骤。
由于样本的处理及保存对DNA和RNA(尤其是RNA)的影响较大，因此在核酸测定时标本的处理及适当保存对测定结果的准确有效非常重要。
临床常见的标本有血清(浆)、全血、分泌物、棉拭子、脓液、体液、新鲜组织、石蜡切片等，这些临床标本的处理和保存方法各有不同。 临床标本的处理
血清(浆)标本 一些病原体，如乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)等的PCR检测常采用血清或血浆标本。
HBV：标本通常由医护人员采集，应注意避免溶血，如为血浆标本注意抗凝剂的选 择，一般用EDTA-Na2或枸橼酸纳，不可使用肝素。标本为全血时，及时分离出血浆，提取病毒DNA进行检测。
HCV：检测RNA病毒。由于RNA极易降解，标本的制备和保存方式往往可以影响测定结果。若用血浆标本，应使用EDTA抗凝。严禁使用肝素，因其对PCR扩增有抑制作用, 且无法在核酸提取过程中去除。抗凝后6小时内分离血浆。如用血清标本，则应尽快(2小时内)分离血清 进行检测，或-20oC保存。 全血标本
通常用来提取外周血单个核细胞核酸：如基因组DNA、线粒体DNA、总RNA等。 抗凝剂：一般使用EDTA-Na
2、枸橼酸纳，不使用肝素。
前处理：
1)加适量的红细胞裂解液(破膜液)，裂解全血中的红细胞。
2)再加适量的细胞核裂液(破核液)，裂解白细胞中的细胞核，使核内DNA 释放出来。 3)然后再加SDS(十二烷基硫酸钠)等去污剂，溶解脂蛋白，解聚核蛋白。
SDS可与蛋白 质结成复合物，使蛋白质变性沉淀，但SDS在以后的核酸提取过 程中必须除去。
痰标本
痰属于分泌物，临床上常用作结核杆菌DNA测定样本，由于痰标本中含大量粘蛋白和杂质，故在核酸提取时，一定要对标本进行前处理，即用4%NaOH液化，去除粘蛋白，然后用煮沸或蛋白酶、酚/氯仿等经典法提取DNA。 具体方法：
用无菌平皿取患者肺深部咳出的痰液1-3ml，
↓
加入4倍体积4%NaOH，摇匀，室温下放置30分钟左右液化
↓
取1.5ml EP管，加0.5ml 液化痰液，再加0.5ml 4%NaOH室温放10分钟
↓
12000 rpm，离心15分钟
↓ 弃上清，加无菌生理盐水1 ml ，混匀，12000rpm离心5分钟
↓
弃上清，沉淀物用于 DNA提取
棉拭子
用PCR方法检测性病病原体时(衣原体、支原体、淋球菌、梅毒螺旋体、人乳头状瘤病毒等)，临床标本一般为棉拭子。标本取材是关键，衣原体等病原体感染上皮细胞，因此取材一定要取到细胞。 具体方法：
加1ml无菌生理盐水，充分震荡混匀，12000rpm ，离心5分钟
用棉拭子取尿道分泌物或宫颈分泌物(由医护人员采集)，置无菌试管或EP管内 弃上清，沉淀加无菌生理盐水1ml，打匀，12000rpm，离心5分钟 具体方法：
加1ml无菌生理盐水，充分震荡混匀，12000rpm ，离心5分钟
↓
用棉拭子取尿道分泌物或宫颈分泌物(由医护人员采集)，置无菌试管或EP管内
↓
弃上清，沉淀加无菌生理盐水1ml，打匀，12000rpm，离心5分钟
↓
同上，重复洗涤一次
↓
弃上清，沉淀即可用于DNA提取
5.体液
体液标本，包括胸水、腹水、脑脊液、尿液等，可直接离心，取沉淀物提取核酸。 血性胸腹水，可使用红细胞裂解液处理：
加等体积红细胞裂解液，震荡混匀，置5-10分钟
↓
10000rpm，离心5分钟，弃上清
↓
可根据情况重复2-3次，沉淀物用于DNA提取
6.脓液
粘稠脓液：同痰标本处理，先用4%NaOH液化，再离心取沉淀提取DNA。 水样脓液：直接离心，沉淀用生理盐水洗2-3次后用于DNA提取。
7.组织
组织有新鲜组织和石蜡切片。 新鲜组织的处理步骤：
先用生理盐水洗二次，然后将其捣碎或剪碎(用眼科剪)，加蛋白酶K消化后提取核酸
石蜡切片用于核酸提取，需先用二甲苯脱蜡，再用蛋白酶K消化后进行DNA提取。
标本的保存
血清(浆)
HBV：分离出的血清(浆)如不立即提取核酸，保存于-20℃待检。 HCV：尽快分离血清(浆), 如不立即提取RNA， 保存于-20℃待检。
长期保存：吸取200µl血清，加20u RNasin(RNA酶抑制剂)，保存于-70℃。 已发出结果报告的标本应及时转移至冰箱保存，并由专人负责管理，保存1-2周(时间长短根据报告单上的承诺而定)。
全血标本
全血标本如用于DNA提取，可4℃下短期保存(数天)，时间长易降解，如用于RNA检测，应在取血后尽快提取RNA。 最好将DNA或RNA提取后，置-70℃保存。
痰
液化的痰标本如不立即用于核酸提取，可保存于-20℃。
处理后的棉拭子、体液、脓液如不立即用于核酸提取，可保存于-20℃。
组织
新鲜组织最好保存于50%乙醇中，具体方法：先用生理盐水将组织洗一次，切成小块，加入适量生理盐水，然后边摇边加入无水乙醇至终浓度为50%，这样固定的组织标本室温下可保存数日，4℃可保存6年。
总而言之，标本的保存及适当的预处理对核酸模板的成功提取具有决定性作用。要强调的是，所有用于上述处理的容器如试管或离心管，均应在使用前压灭菌。
第二篇：MAGMAX96核酸提取仪
ABI MagMAX 96 核酸提取仪
特点：
应用范围：
可抽提样本包括植物组织、动物血液、血清、血浆、牛奶、痰液、口腔拭子、泄殖腔拭子、动物精液、病料组织、培养细胞、甚至动物油脂、粪便、肉骨粉等均可以得到高质量的DNA或RNA。
主要组成以及功能特点：
MagMAX- Express核酸提取仪结合磁珠检测技术，操作简便灵活，能在短时间内处理大量样本，是一款实用性非常强的自动核酸提取系统。配合使用MagMAX核酸分离试剂盒，可以轻松从各种生物样本中快速抽提核酸，从而在获得高回收率、高纯度核酸的基础上，实现高灵敏度、高特异性的分子检测。
1.最新的程序可在网上直接下载,无需付费。预装专业的核酸抽提程序，实现基于磁珠的核酸抽提自动化;同时带编程软件，用户可以自己变更核酸抽提程序; 2.仪器运行不需要另配电脑，如需要可方便放在生物安全柜使用; 3.试剂和耗材完全开放，支持其他非ABI品牌试剂盒的使用 4.一次可以处理1-96个样品，处理时间≤15分钟; 5.自动化仪适用标准96孔样品板，方便排枪取样;
6.核酸抽提最小洗脱体积不超过50微升，所得模板浓度高，提高检测灵敏度; 7.供应商同时生产基于磁珠的各种核酸抽试剂盒，具备从试剂到仪器的全方位技术支持。 8.可抽提样本包括血液、血清、血浆、牛奶、痰液、口腔拭子、泄殖腔拭子、动物精液、病料组织、培养细胞、甚至动物油脂、粪便、肉骨粉等均可以得到高质量的DNA或RNA; 9.针对不同的样品类型提供不同的商品化核酸抽提试剂盒，预装专业的核酸抽提程序。可供选择的配套试剂盒有：针对食品和环境微生物的提取试剂盒、动物病毒核酸抽提试剂盒，总核酸抽提试剂盒，总RNA分离试剂盒等。
第三篇：核酸提取 氯仿 异丙醇的作用
用酚抽提细胞DNA时，有什么作用?
使蛋白质变性，同时抑制了DNase的降解作用。用苯酚处理匀浆液时，由于蛋白与DNA 联结键已断，蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。
使用酚的优点：1. 有效变性蛋白质;2. 抑制了DNase的降解作用。
缺点：1. 能溶解10-15%的水，从而溶解一部分poly(A)RNA。2. 不能完全抑制RNase的活性。
氯仿的作用?
氯仿：克服酚的缺点;加速有机相与液相分层。
最后用氯仿抽提：去除核酸溶液中的迹量酚。(酚易溶于氯仿中)
用酚-氯仿抽提细胞基因组DNA时，通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇，为什么? 异戊醇：减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。
用乙醇沉淀DNA时，为什么加入单价的阳离子?
用乙醇沉淀DNA时，通常要在溶液中加入单价的阳离子，如NaCl 或 NaAc，Na+中和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，而易于聚集沉淀。 氯仿的作用主要是使蛋白变性并有助于液相与有机相的分开，异戊醇的作用是消除抽提过程中出现的泡沫
第四篇：公积金提取流程
公积金提取需现场填写相关表格，故交材料可找同事代交，暂不接收快递方式
收取材料时间：以DAPP、EHR系统预约时间为准，每月一次 返还材料时间：提交材料后7-10个工作日，邮件通知领取 收取材料地点：以DAPP、EHR系统预约地点为准 收取材料要求：必须按照提交资料中的顺序排序
说明：若办理成功，公积金款项将于办理当月月底打入您提供的公积金联名卡中。
购房提取：
1、因购买商品房、经济适用房、合作建房、集资建房等自主住房，首次提取住房公积金时请提供材料如下：请严格按照以下顺序排列材料
(1)购房合同/购房协议的原件及复印件;(复印件:合同首页(有合同号)、购房人姓名、购房金额、房屋地址、该土地建设用途及房屋用途、交房日期、甲乙方盖章签字页，复印页勿装订)
(2)借款/贷款合同原件及复印件;(复印件：贷款人姓名、贷款期限、贷款金额、甲乙方盖章签字页，复印页勿装订)
(3)提取职工本人的身份证原件及复印件;(正反面复印在A4纸的同一面，不可放大或缩小)
(4)购房总价或首付款发票的原件及复印件;
(5)非京发票需在购房所在地地税官网查询发票真伪并打印页面;
(6)非京购房需填写，附件二：异地购房证明，请自行在family申请公章盖章; (7)近一年的社保缴纳证明;(需包含在小米缴纳记录，请至少打印至近三个月) (8)本人公积金联名卡复印件并在复印件上写清卡号、手机号、姓名; (9)房屋为夫妻共有财产的，提供提取人一方的结婚证原件及复印件;
(10)如有另外一人和您共同提取此套住房，如夫妻共同支取，请填写，附件三：支取记录单。
若房本上仅显示您配偶姓名 /发票上您配偶名字在前面：除以上资料外，还需提供提取人一方的结婚证原件及复印件、配偶方的身份证复印件、配偶方提取记录单的原件及复印件。
2、因购买二手房，首次提取住房公积金时应提供材料如下：请严格按照以下顺序排列材料
(1)房产证的原件及复印件;(复印件：第
2、
3、4页)
(2)借款/贷款合同原件及复印件;(复印件：贷款人姓名、贷款期限、贷款金额、甲乙方盖章签字页，复印页勿装订) (3)购房总价发票原件及复印件; (4)契税票的原件及复印件;
(5)提取职工本人的身份证原件及复印件;(正反面复印在A4纸的同一面，不可放大或缩小)
(6)社保缴纳证明;(从小米入职当月开始，开具流程可点击社保缴纳开具流程) (7)本人公积金联名卡复印件并在复印件上写清卡号、手机号、姓名; (8)房屋为夫妻共有财产的，提供提取人一方的结婚证原件及复印件。
若房本上仅显示您配偶姓名 /发票上您配偶名字在前面：除以上资料外，还需提供提取人一方的结婚证原件及复印件、配偶方的身份证复印件、配偶方提取记录单的原件及复印件。
3、使用北京住房公积金管理中心住房公积金贷款(包括使用组合贷：商贷+北京公积金贷款情况，主贷款人先提取)仅需要提供以下材料：请严格按照以下顺序排列材料 (1)提取职工本人的身份证原件及复印件;(正反面复印在A4纸的同一面，不可放大或缩小)
(2)购房总价发票的复印件;
(3)房屋为夫妻共有财产的，提供结婚证原件和复印件;
(4)本人公积金联名卡复印件并在复印件上写清卡号、手机号、姓名。 北京公贷识别方法：橘黄色贷款合同
若房本上仅显示您配偶姓名 /发票上您配偶名字在前面：除按照上述材料外，还应提供配偶方身份证复印件、提取人一方的结婚证原件及复印件、配偶方提取记录单的原件及复印件。
租房提取：(在北京名下无房)
一、 新政策提取：请严格按照以下顺序排列材料
(1)提取住房公积金支付房租承诺、授权书(内网即可下载填写)
(2) 本人二代身份证原件与复印件;(正反面复印在A4纸的同一面，不可放大或缩小) (3)本人公积金联名卡复印件并在复印件上写清卡号、手机号、姓名
二、 使用发票提取: (发票开具一年，开具金额为取低原则，具体案例可参阅租房小宝典) 每3个月可提取一次，每次可提取前3个月内的公积金，且每月提取的额度不得超过个人缴存额(公司部分+个人部分)，也不得超过月房租费。第一次提取满3个月后再次提取只需提(1)(3)(5)(7)即可。
职工租房，提取住房公积金时应提供材料如下：请严格按照以下顺序排列材料 (1) 提取住房公积金支付房租承诺、授权书(内网即可下载填写)
(2) 租房合同原件和复印件;(与房主直接租房，首页体现双方身份证号;与中介租房，首页体现双方身份证号及中介名称、中介章) (3) 租房发票原件和复印件;(居住地街道办开具) (4) 租房个人所得税票原件和复印件;(与租房发票一起开具的另外一张税票) (5) 本人二代身份证原件和复印件;(正反面复印在A4纸的同一面，不可放大或缩小)
(6) 社保缴纳证明;(从小米入职当月开始，开具流程可点击社保缴纳开具流程 (7) 本人公积金联名卡复印件并在复印件上写清卡号、手机号、姓名。
2、职工以承租公租房、廉租房为由申请提取，仅需要提供以下材料即可：请严格按照以下顺序排列材料
(1)租房发票原件和复印件 (若是与政策签订的协议，只有收据，需出具收据与协议原件、复印件) ;
(2)本人二代身份证原件和复印件(正反面复印在A4纸的同一面，不可放大或缩小); (3)本人公积金联名卡复印件并在复印件上写清卡号、手机号、姓名。
若租房发票上为夫妻2人名字，除按照上述规定提供材料外，还应提供配偶方身份证复印件、结婚证的原件及复印件。
销户提取/仅限于农业户口
离职次月可以办理，请严格按照以下顺序排列材料 (1)户口本的原件及复印件;(复印件：首页、户主页、本人页) (2)离职证明的原件及复印件;
(3)提取职工本人的身份证原件及复印件;
(4)本人公积金联名卡复印件并在复印件上写清卡号、手机号、姓名;
(5)户籍证明原件及复印件，(应由当地派出所出具并有“农业户口”的明确字样)→若户口本上有明确“农业户口”字样，则无需提供此份材料
若前期已办理过提取，现约定提取业务已中断需重新办理人员：
(从上家单位离职到小米入职，中间无工作期超过3个月)
如果您已经在北京市住房公积金管理中心办理过购房、租房提取，需要重新办理约定，请到五彩城12F-071高国新或12F-052李洋处填写约定提取申请书，如下：
第五篇：重庆公积金提取流程
1、个人向单位申请，填取《职工住房公积金提取申请表》并提交各条件下对应的支取证明材料;
2、单位审查通过后通报公积金中心，职工销户提取时单位还需往经办银行办理相关人员公积金封存。
3、公积金中心对职工公积金提取申请进行审批。
4、公积金中心转账至单位，由单位转入职工银行账户。 重庆公积金购买商品房提取材料
1、本人居民身份证原件及复印件;
2、全额不动产发票或契税完税凭证;
3、经房地产行政主管部门登记的购房合同;
4、若无购房合同的，需提供房屋所有权证或《重庆市预售商品房买卖合同登记备案证明》;
5、其配偶符合同时提取条件的，还应当提供《结婚证》原件及其复印件。
6、其家庭成员符合同时提取条件的，还应当提供户口簿或其他家庭关系证明。 重庆租房公积金提取材料
1、租赁商品房的
应提供租赁行为证明材料、房租完税证明或税务部门出具的个人出租房屋专用发票。
2、租赁廉租房或公共租赁住房自住的
应提供与当地公共租赁住房或廉租住房管理部门签订的租房合同(协议)、租金缴纳证明。 注意：配偶租房自住的，除提供以上证明材料外，还需提供结婚证或户口簿。
提取额度
全额提取
属于以下条件提取住房公积金的，可以申请提取本人住房公积金账户内全部余额，账户销户处理：
1、离休、退休的;
2、完全丧失劳动能力，并与单位终止劳动关系的;
3、出境定居的;
4、调出本市或户口迁出本市的;
5、职工与单位解除劳动关系满两年未再就业的;
6、职工死亡或被宣告死亡的，职工的继承人、受遗赠人提取职工住房公积金的;
7、农民工或外地户口职工且与单位解除劳动关系的。
(注：办理提取前，需由单位经办人到银行公积金经办网点办理职工公积金账户封存) 部分提取
1、购买自住住房付清购房价款的提取总额不得超过购房实际支出额度;
2、偿还购房贷款本息的，提取总额不得超过当年应偿还的贷款本息额;
3、租赁住房，租金超出家庭工资收入的规定比例的，提取总额不超过实际房租超出总额;
4、职工或其配偶建造、翻建、大修具有产权自住住房的，不超过实际支出额;
5、患重大疾病的，提取总额不得超过实际支付的医疗费用总额。
提取时间
租房类提取时限
职工或其配偶租赁住房，租金超出家庭工资收入的规定比例，达到成本租金的，可每年提取一次; 购房类提取时限
职工或其直系亲属购买自住住房付清购房价款的，可提取一次;
职工或其配偶偿还购房贷款本息的，可每年提取一次。 重庆公积金其他类提取时限 重庆公积金提取到账时间 办结时间：15工作日 资金到账以入账时间为准