在日常生活中, 由于烧伤、烫伤、电击伤、化学伤、皮肤擦伤等原因造成皮肤遭受损伤。研究发现, 胎儿皮肤创伤后进行了无瘢痕的愈合, 而成人皮肤创伤后愈合过程则为有瘢痕的愈合[1]。
1 临床资料
1.1 一般资料
采用兔子建立动物模型。选择的成年兔子3只, 在麻醉状态下获得5份样本。
1.2 RNA及mRNA的提取与测定
按照目前常用的Chom czynski实验方法[3]分别进行研究样本RNA的提取。
1.3 芯片和表达谱探针的制作
采用美国Super Array生物公司提供的基因芯片进行PCR扩增, 并将靶基因在硅烷化玻片上进行点样。
1.4 统计分析
采用SPSS 13.0统计分析软件进行分析, 计数资料采用例数和百分比表示, 统计方法为卡方检验及聚类分析。
2 结果
2.1 研究样本基因表达差异分析
按照Ratio<5.0及Ratio>2.0进行研究样本基因表达差异比较标准。出现表达差异基因为132个, 见表1。
2.2 研究样本表达差异基因种类分布
采用专门的分析软件进行研究基因生物信息学分析, 研究发现, 差异表达基因主要分为8种类型, 见表2。
3 讨论
皮肤创伤愈合是指机体遭受外力作用, 皮肤组织出现离断或缺损后的愈复过程, 为包括各种组织的再生和肉芽组织增生、瘢痕组织形成的复杂组合, 表现出各种过程的协同作用。
成人皮肤创伤后修复过程为有瘢痕修复过程, 在修复过程中会出现增生性瘢痕。研究发现增生性瘢痕的形成可能与成纤维细胞和胶原纤维的过度增殖和增生有关[2]。胎儿皮肤创伤后修复过程为无瘢痕修复过程, 不会出现增生性瘢痕。采用聚类分析发现, 胎儿兔皮肤愈合过程基因表达差异与蛋白合成、DNA结合转录和代谢相关基因相关。而成年兔皮肤愈合过程基因表达差异与原癌基因、细胞周期基因等存在相关。说明不同的基因表达会影响到皮肤愈合的程度和状态[3]。
摘要：目的 了解在胚胎内外愈合过程中不同动物模型皮肤的基因表达差异, 探讨基因表达差异的分布及来源。方法 进行兔动物模型的建立并收集胎兔和成兔创伤后愈合皮肤, 采用基因芯片技术进行检测。采用SPSS13.0统计分析软件进行分析。结果 基因芯片检测结果显示, 基因表达差异总数为132个。结论 在胚胎内外愈合过程中动物模型不同皮肤的基因表达存在差异。
关键词：皮肤创伤,基因芯片,胚胎,基因表达
参考文献
[1] Burring ton JD.Wound healing in fetal lamb[J].J Pediatr Surg, 1971, 6 (6) :523～528.
[2] 吴志远, 罗少军, 江黎明.隐丹参酮对兔耳增生性瘢痕组织的影响[J].广西医学, 2008, 30 (7) :1012～1013.
[3] 卢圣栋.现代分子生物学实验技术[M].北京:高等教育出版社, 1993.