第一篇:动物细胞范文
动物细胞教案
姓名:员卫兰
单位:中牟县姚家镇初级中学
日期:2018年5月
第三节 动物细胞教案
●学习目标
1.进一步熟练制作临时装片和使用显微镜观察细胞。 2.说明人口腔上皮细胞的基本结构。 3.区别动植物细胞结构的主要不同点。 4.提高制作以及观察临时装片的技能。
5.通过对动植物细胞间差别的比较提高学生的观察能力。 6.设计实验、改革实验,开发自己的创新潜能,以此来体会科学探索的思想方法是不断发展的,继续形成“胆大心细”的心理素质;在“模拟制作”活动中,提高学习生物学的兴趣。
●教学重点
1.说明人口腔上皮细胞的基本结构。 2.比较动植物细胞的相同点和不同点。 3.提高实验能力和观察能力。 ●教学难点
1.制作临时装片过程中的刮取(首次观察自己身体上的细胞,学生感到新鲜又好奇,取材关系到实验效果)。
2.细胞结构的观察(与植物细胞相比不易观察、略有难度)。 3.设计实验(应用以往的学习经验,是较高层次的学习)。 ●教学方法
谈话法、实验法。 ●教具准备 1.教师准备:
(1)有关制作人的口腔上皮细胞临时装片的多媒体录像。 (2)人的口腔上皮细胞结构及洋葱鳞片叶肉表皮细胞挂图各一张。
(3)学生分组实验用的生理盐水、稀碘液、消毒牙签、滴管、纱布、镊子、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜、清水和熬好的清洁的琼脂。
2.学生准备:(1)3H铅笔、橡皮、实验报告纸及一些其他动物材料。
(2)各种果脯、小塑料食品袋、线等。 ●课时安排
1课时
●教学过程 [导入新课]
教师活动:引入导言
用谈话式教学方法引入本节内容。具体活动如下: 上节课我们通过制作临时装片,观察并认识了植物细胞的基本结构。那么动物和人体细胞的结构是什么样子的呢?它和植物细胞结构一样吗?这节课我们就来解决这些问题。
[讲授新课]
通过学习临时装片的制作,我们掌握了观察细胞的方法,我想大家一定想看看我们自己身体上的细胞吧?我们通过实验观察人的口腔上皮细胞来观察了解一下。那么人的口腔上皮细胞在哪儿呢?(学生回答,教师作鼓励评价)它就在人的口腔内壁上。如何来取这些细胞,又如何来对它们进行观察呢?请大家自己设计方案。
实验步骤:
(一)制作人口腔上皮细胞临时装片
学生活动:应用以前学习经验设计不同的取样和制片观察的方案,同一组同学之间方案尽量不要一致,以增加对比性。通过相互观察对比,得出一种比较合理的观察方案。互相交流。
教师活动:教师引导学生把自己组的设计方案和课本设计方案对比,得出最佳设计方案,
然后教师演示临时装片的制作步骤,并讲解注意事项。 学生活动:学生根据老师的演示和讲解,自己动手制作临时装片。
(二)用显微镜观察人的口腔上皮细胞
教师活动:引导学生复习显微镜的使用方法。
学生活动:学生自己动手在显微镜下观察自己制作的临时装片
(三)绘图
教师指导学生边观察,边绘制自己观察到的细胞,并尝试注出各部分的名称。
教师活动:现在我们对自己的细胞已有所认识,接下来我们再来观察一些其他动物材料的装片,对所观察到的细胞作一比较总结动物细胞的结构。
学生活动:用一些其他材料制作临时装片进行观察、比较总结动物细胞的基本结构,并将所观察到的细胞结构画到实验报告纸上。
教师活动:动物细胞的结构:大家通过观察知道包括细胞膜、细胞质和细胞核三部分。(出示人体口腔上皮细胞和洋葱鳞片叶内表皮细胞挂图)请大家指出二者之间的区别在哪儿。学生回答:动物细胞没有细胞壁、液泡和叶绿体。回答非常正确,以上答案也正是区分动物细胞和植物细胞的主要依据。好了,为了进一步认识动物和人体细胞的结构,我们来做一个动物细胞的模型。请参照“模拟制作”的方法(出示熬好的清洁的琼脂)。
学生活动:利用熬好的琼脂、清水、果脯、塑料袋、线等物,依步骤做一个动物细胞的模型。并指出塑料袋、琼脂和果脯各代表动物细胞的哪些结构。
[课堂小结]
本节课我们通过对各种动物细胞的观察、讨论并总结出了动物细胞的结构,而且还和植物细胞结构作了比较,认识到动物细胞和植物细胞结构之间的区别。为了进一步加深认识,下面我们来做一些课堂练习。
[巩固练习]
1.人体或动物体的各种细胞虽然形态不同,基本结构却是一样的,都有__________、__________和__________。
2.动物细胞与植物细胞相比较,没有__________、__________和__________结构。
3.回忆所做的《观察植物细胞》和《观察人的口腔上皮细胞》的实验。
(1)实验中用洋葱鳞片叶表皮细胞和口腔上皮细胞制作的玻片标本叫__________。
(2)在制作洋葱鳞片叶表皮细胞和口腔上皮细胞实验中,开始在载玻片上分别用滴管滴一滴__________和__________。
(3)洋葱鳞片叶表皮细胞和口腔上皮细胞相比,共同的结构是________________、________________和__________。洋葱鳞片叶表皮细胞还具有__________和__________以及黄瓜表皮果肉细胞的__________是植物细胞特有的结构。
(4)《观察植物细胞》和《观察人的口腔上皮细胞》的实验中染色使用的染料都是__________?
(5)回忆《制作动物细胞模型》的过程,你认为细胞是平面的还是立体的?
4.采取人的口腔上皮细胞时,需要用的工具是 ( ) A.消毒牙签
B.消毒棉球C.消毒镊子 D.消毒玻璃棒 5.制作人的口腔上皮细胞装片时,在载玻片上先滴一滴 ( ) A.清水
B.稀碘液 C.生理盐
D.盐水 6.动植物细胞共有的结构是 ( ) ①细胞壁 ②细胞膜 ③细胞质 ④细胞核 ⑤液泡 ⑥叶绿体
A.①②③
B.②③④ C.②③⑤
D.①⑤⑥ [布置作业]
按照做动物细胞膜型的思路,设计并动手做一个类似植物细胞的模型。再想一想你所用的每一种材料相当于植物细胞的哪种结构。
●活动与探究
(1)选取植物的茎的横切片、叶的横切片、根的纵切片,通过观察认识植物的各种组织细胞,同时训练显微镜的使用技术。
(2)选取动物的结缔组织、神经组织、肌肉组织、上皮组织切片,观察认识各种动物的组织结构特点。
●板书设计
第三节 观察动物细胞
一、动物细胞基本结构
二、动植物细胞结构的区别
动物细胞结构没有:1.细胞壁2.液泡3.叶绿体
第二篇:观察动物细胞教案
第三节 观察动物细胞
教学目标 :
①进一步熟练制作临时装片和使用显微镜观察细胞,说明人口腔上皮细胞的基本结构,区别动植物细胞结构的主要不同点。
②提高制作以及观察临时装片的技能。
③设计实验、改革实验,开发自己的创新潜能,以此来体会科学探索的思想和方法是不断发展的;继续形成“胆大心细”的心理素 质;在“模拟制作”活动中,提高学习生物学的兴趣。 重点和难点
重点:说明人口腔上皮细胞的基本结构,比较动植物细胞的相同点和不同点;提高实验能力和观察能力。
难点:制作临时装片过程中的刮取(首次观察自己身体上的细胞,学生感到既新鲜又好奇,取材关系到实验效果)
细胞结构的观察(与植物细胞相比不易观察,略有难度); 设计实验(应用以往的学习经验,是较高层次的学习)。
课前准备
学生:预习;3H铅笔,绘图纸;各种各样的果冻,彩色糖粒,果脯,小塑料食品袋,线等物品;上课前漱口。
教师:生理盐水,稀碘液,高锰酸钾溶液(质量分数为1%~5%),消毒牙签,滴管,纱布,镊子,吸水纸,载玻片,盖玻片,显微镜,清水,琼脂。人口腔上皮细胞的结构挂图,不同种类的人体、动物体细胞挂图或投影片、投影仪或多媒体设备(若条件许可),提前制作临时装片、摆放示范镜。 教学设计
一、引入新课
复习:临时装片的制作方法;植物细胞的基本结构。 实验题目:观察人的口腔上皮细胞 温故知新 提出问题:
①想看看自己身上的细胞吗?
②人的细胞与植物细胞有什么相同和不同之处? 激起疑惑:口腔上皮细胞在哪儿?怎样获得? 解决心中的疑惑 承前启后,知识导入。
引导学生联系自身,提出问题,创设学习情境。 出示题目,交流:“看到题目,你有何疑问? 示范取材部位。材料用具
提出疑问:生理盐水有什么作用? 引导、分析方法步骤
二、制作人口腔上皮细胞临时装片
①设计:根据已有的经验,设计实验方案(注意取村、方法、染色剂的变化);
②制作:同组同学尽量选择不同的方案制作临时装片,增加对比性。参与 引导 、帮助
调查
二、用显微镜观察人的口腔上皮细胞
观察自己制作的临时装片,然后同学间交换观察。 借鉴老师摆放的示范镜。
发现由于取材、染色的不同而出现的不同效果。巡视 、提示 参与观察
绘制细胞的基本结构图:
细胞膜 、细胞质 、细胞核 、动、植物细胞的异同感知动物(人)细胞的形态结构,注意绘图要领、互评、展示。 讨论 、归纳
总结:比较、归纳、描述、指导、提示、评价
出示挂图或媒体演示(投影展示)不同种类的动物细胞 引导、总结 模拟制作
策略①:按照书中方法分组制作。
策略②:改进。利用现成的果冻,将一枚糖粒放入其中表示细胞核,果冻表示细胞质,包装果冻的塑料壳表示细胞膜。
第三篇:动物细胞培养总结! !!!
动物细胞培养总结 一.实验准备
1.实验器械、器皿的清洗和消毒 (1)清洗和包装
离心管(1.5ml,2ml,15ml)若干,冻存管若干放进铝饭盒,用牛皮纸包裹,系紧棉绳,用笔在饭盒上和牛皮纸上标记盒内所装物品名称、数量、日期和所属人名称。
蓝枪头两盒,黄枪头白枪头各一盒用牛皮纸包裹,用棉绳扎紧。 取适量蒸馏水于4L玻璃瓶,瓶盖拧松半圈。
过滤器,250ml玻璃瓶,500ml玻璃瓶用自来水毛刷洗涤剂刷洗,蒸馏水润洗,烘干。
过滤器两部分分别包裹,先将瓶口部位用锡纸包裹后,再罩以牛皮纸,再用棉布密包起来,用棉绳扎紧。
玻璃瓶拧下瓶盖,瓶身浸酸。浸酸时应注意安全,须穿戴耐酸手套和白大褂,注意保护好面部和身体裸露部分,提前备好一盆水在旁以便浸酸结束后清洗耐酸手套,防止走动时酸液滴到地板上不好清洗。瓶口慢慢沉入液面下,注意缓慢降低瓶身,使液体慢慢浸入瓶内,以免产生气泡溅出酸液,发生危险。浸酸时器皿要充满酸液,勿留气泡,浸泡过夜。取出瓶身时,须穿戴耐酸手套和白大褂,注意保护好面部和身体裸露部分,提前备好一盆水在旁,取出后将瓶身放入盆内水中在转移至水池边清洗,以免酸液滴落地板不好清洗。换水洗几次,待水澄清后开始冲洗,每瓶都用自来水灌满,倒掉,重复15次,再用蒸馏水漂洗5次,去离子水漂洗3次,烘干备用。 (2)消毒灭菌
1>全自动高压灭菌锅:插电源,打开开关,检查水位,若水位不足加蒸馏水补足,放入物品,瓶类物体须拧松盖子后放最上面一筐,盖上灭菌锅盖,拧紧盖子至温度显示栏的左上角有一红点亮灯,按start开始升温。若灭有无菌水或玻璃瓶待降温至常温再打开,打开后立即拧紧,无菌水瓶口封上封口膜。若没灭瓶类物品,降温至80度左右即可打开灭菌锅,须戴上线手套取出。
2>手提式高压灭菌锅:插电源,打开开关,检查水位,若水位不足加蒸馏水补足,检查设定是否为121度20分钟,放入物品,盖上灭菌锅盖,注意导气管一定插到锅底并不能堵塞,用手对称地拧紧锅盖螺栓,再用扳手继续拧紧。加温升压之前,先打开排气阀门,加温约半小时后见排气阀处开始排残留在锅内的冷空气,排气五分钟,关闭排气阀,继而开始升压。灭菌后不要立即打开气阀放气以免水汽喷出。待自然降温至常压才能打开气阀。
玻璃瓶须拧紧,饭盒,枪头灭菌后放入烘箱烘干备用。 2.无菌间消毒及设备检查
用84消毒液拖地,用原液按照1:29的比例兑水,抹布、拖把擦洗。 配400ml 75%酒精于盆中,用酒精棉仔细擦拭CO2培养箱,超净台,超净台内物品,显微镜,桌面,若培养箱内未培养细胞可以再打开高温灭菌模式将培养箱灭菌一次。
用蒸馏水擦拭清洗水浴锅内壁,注意底座不要沾水。 检查CO2总压力表,若读数不足四分之一提前预定CO2瓶,换瓶时需要扳手。CO2培养箱最下层的增湿盘须定期观察加水,将增湿盘内注入1/2无菌蒸馏水,并将盘直接放置在培养箱中央。启动培养箱,培养箱接通电源,增湿盘加水,连接好气体供给,检查有无漏气,输入系统设置。设置温度和二氧化碳。
紫外照射无菌间30分钟,注意屋内不要有人以及培养基等试剂。 3.细胞培养用液的配置及分装
RPM1640培养基配制:将干粉型RPM1640培养基溶于总量1/3的去离子水中,再用1/3水冲洗包装内2次,倒入培养基中,以保证所有干粉都溶解成培养液,根据产品说明的要求和实验补加谷氨酰胺和NaHCO3 ,倾斜三角瓶轻轻放入转子,用磁力搅拌器搅拌2h。用泵使培养基在超净台内通过灭菌的过滤器,过滤除菌,分装后置4度冰箱保存备用。使用前调pH至7.0,加双抗于培养液中浓度为1%,使用时加胎牛血清10%FBS. 胎牛血清FBS的处理:使用前应做热灭活处理,即通过加热的方法破坏补体,将胎牛血清放入56度水浴中30分钟,其间要不时轻轻晃动,使受热均匀,防止沉淀析出。分装前提前2天放4度冰箱解冻,溶解完全后于超净台内分装为25ml每管,留2管放四度备用,余下放-20度冻存。配制含血清培养基或冻存液前务必提前一天取出分装后的血清四度溶解备用,血清融化很慢。
5%NaHCO3溶液配制:5g NaHCO3,100ml蒸馏水, NaHCO3溶于水后,过滤除菌。 0.25%胰蛋白酶液200ml在超净台内分装成每管1ml或2ml,封口膜封口,-20度备用。
双抗溶液配制:80万单位青霉素加4ml灭菌D-Hanks液,即成20万单位/ml溶液。100万单位链霉素加5ml灭菌的D-Hanks液,即成20万单位/ml溶液。两溶液各取0.5ml混合,加入9mlD-Hanks液,则成含青链霉素各1万单位/ml,分装后置于4度冰箱保存备用。
二.操作步骤 注意事项:
1、所有实验用的器械,仪器灭菌,消毒,烘干。
2、打开溶剂,培养瓶瓶盖时,瓶口及瓶盖在酒精灯上烤一下。
3、用完溶剂,培养瓶时,瓶口及瓶盖也要在酒精灯上烤一下。
4、所有物品放入超净台需用酒精棉擦拭,包括手伸出窗口拿取物品再回到窗内时需要重新用酒精棉擦拭。 开始工作:
1、实验前换紫外照过的白大褂和拖鞋。
2、戴橡胶手套,75%乙醇擦手,然后用75%乙醇擦一下台面,点燃酒精灯。
3、取待用的细胞,旋紧瓶盖。
4、胰酶消化缓慢时可以将细胞置于5%CO
2、37度培养箱中1min-2min,目的是提高酶活性,促进消化。 1.细胞复苏
提前预冷离心机,设参数为4度,1000r/min,5min。
将枪头,装有离心管的饭盒,垃圾盒放入超净台,酒精棉擦一遍超净台台面和移液器尤其枪口,以防别人用枪时不慎沾染脏污堵塞枪口。超净台和房间照15分钟紫外,照紫外的同时取出无血清培养基和含血清培养基37度水浴加热。
关闭紫外,打开风机,升高窗高,点燃酒精灯,用镊子从饭盒中取2个15ml离心管放至试管架,每管加入3ml无血清培养基,提前剪好2条封离心管的封口膜备用。
戴上橡胶手套再套上线手套,用镊子从液氮中取出塑料冻存管,用手拿冻存管迅速浸入37度水浴中,剧烈急速摇晃冻存管,因为有防水胶布缠裹不用担心进水染菌,使其急速融化,注意管内冻存细胞的融化情况。基本转为液态时将冻存管取出,摘下线手套,冻存管转移至超净台内,用酒精擦手,擦拭冻存管尤其管口,撕下胶布和封口膜,再擦拭管口,整个溶解过程尽量在30s至1min内完成。(注意:这一步对细胞存活率至关重要。既要尽快融化以减少融化过程对细胞的损害,又要尽可能减少细胞在较高温度停留的时间以减少DMSO对细胞的毒害,切不可将冻存管放在烧杯内不管。) 打开冻存管管盖,逐滴加入1ml无血清培养基,轻柔地将冻存管内的细胞悬液吸取出来,转移至已备好的离心管内,轻轻摇混匀,盖上管盖,轻轻地上下颠倒混匀。封上封口膜。
低俗离心1000r/min,5min。小心地吸出上清液,要求上清液尽可能吸走,同时又不触及管底沉淀的细胞。(较高要求时可以用手指轻弹离心管管底,将细胞团分散,加入10ml无血清培养基混匀离心10min弃上清再洗一次,有助于减少DMSO残留。)加3至5ml培养液至沉淀的细胞,轻轻摇晃使分散成细胞悬液,将细胞转移至培养瓶中,拧紧盖子,转移至培养箱中再反旋拧松半圈,以利于瓶口内外进行气体交换,注意取出培养瓶时须先拧紧瓶口。37度恒温箱中培养。第二天观察细胞生长情况。培养基瓶盖过火,拧紧后封上封口膜。收好物品,擦一遍台子,灭酒精灯。 2传代培养
附着型胞(adherentcell)传代培养
离心法提前预冷离心机,设置好参数4度,1000r/min,5min。倒液法不需要。
将灭菌枪头,装有离心管的饭盒,新培养皿/瓶,垃圾盒放入超净台,酒精棉擦一遍超净台台面和移液器尤其枪口,以防别人用枪时不慎沾染脏污堵塞枪口。超净台和房间照15分钟紫外,照紫外的同时从冰箱取出PBS,胰酶,含血清培养基于37度水浴加热。关闭紫外,打开风机和照明,升高窗高,点燃酒精灯,将所需试剂先擦瓶底,放在台子上再擦侧壁一圈,擦瓶口瓶盖,撕下封口膜,再仔细擦一遍瓶口。用喷过酒精的塑料筐将细胞培养瓶拧紧盖子拿到超净台旁的椅子上放平放稳,每三瓶/皿一摞拿入超净台先擦最下面一个的底部,擦好后放在台面上,擦一摞的侧面一圈,在分别擦底面顶面瓶口,直到所有培养瓶各个面及瓶口擦好,注意不要擦到有marker标记字迹的部位,酒精会擦掉字迹,若擦到字迹待酒精干后立即补写上以防事后记不清。
轻轻倒掉旧培养液,注意不要使液体倒流回来冲击细胞,挂在外壁的残留液滴用酒精棉擦掉,培养瓶可以轻轻翻转瓶子使细胞生长的面在上,顶面在下,液体留至顶面后直接倒掉液体。加1ml PBS,注意枪冲着不长细胞的培养皿侧壁或翻转培养瓶朝瓶的顶壁或侧壁打入PBS,尽量不碰到瓶口或培养皿,若怀疑碰壁,弃掉枪头。轻轻摇晃培养皿或瓶,使PBS沾到所有细胞,洗涤细胞一遍,轻轻倒掉PBS。
加入0.25%胰蛋白酶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2),若是高倍胰酶先稀释(0.25%为1X胰酶),37℃作用数分钟。等待消化期间准备好新的培养皿/瓶,每25cm2小皿/瓶加入2ml含血清培养基。消化中的皿盖好盖子或瓶拧紧盖子,于倒立显微镜下观察,当细胞将要分离而呈现圆粒状,有10%细胞漂动时,倒掉胰酶溶液,加入1ml(25cm2小皿/瓶)含血清之新鲜培养基终止胰酶作用。(若细胞将要分离而呈现圆粒状且80%细胞漂动,则不移去胰酶,在胰酶作用后,加入适量含血清之新鲜培养基终止胰酶作用,吹打成细胞悬液转移至离心管,封上封口膜,离心后再吸掉上清液。)
轻轻摇晃培养瓶使细胞自瓶壁脱落,以吸管上下轻轻吸放数次以打散细胞团块,注意吹打时有系统性的将所有面积都打到不要集中只吹打一处而一些地方没吹打到,吸和吹时枪头都不要离开液面以减少气泡,气泡多破裂时对细胞有冲击且会增加体积不利于操作,培养瓶吹打时操作角度小不方便,用倒液法(10%细胞漂动即倒掉胰酶加含血清培养基终止消化)时吹打细胞要用二档多吹打几次,用皿或离心法(80%细胞飘动不弃胰酶直接加含血清培养基再离心弃上清)时细胞很容易脱落,可以用一档轻轻吹打,保证所有面积都吹打到即可。混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,拧紧瓶盖,镜下观察细胞数量多,培养液澄清,若细胞密度过低将影响生长可适当补充细胞悬液,若细胞密度过大将影响迅速生长一天后即需传代,可根据实验适当添加培养基或细胞悬液使生长速度符合预期,转移至CO2培养箱,拧松半圈瓶盖,37度培养。试剂瓶瓶盖过火,拧紧后封上封口膜。密封收好物品。擦一遍台子,灭酒精灯。
3细胞换液
取待用的细胞,旋紧瓶盖。
弃去旧的培养液,把培养瓶放回原处。
用微量枪加入适量的PBS缓冲液,缓慢荡洗一下细胞,然后将PBS缓冲液弃掉。
用微量枪加入适量的细胞培养液于培养瓶中。旋紧瓶盖。 将细胞置于5%CO
2、37度培养箱,反旋拧松瓶盖半圈,培养。
4细胞冻存 1>准备工作:
提前一天将血清FBS从-20度取出放在4度冰箱解冻。 选取对生增生期细胞(镜下密密麻麻,胞体突触明显),在收集细胞24h前换液一次。
进入细胞室前,首先用75%酒精擦试工作台,接着紫外灭菌30,过后,关闭紫外灯,通风10min。从冰箱中取出胰酶、PBS缓冲液、培养基,血清37度水浴。取出室温放置的DMSO。找到防水的医用胶布,滤菌膜,针管和所需枪头饭盒等物品,喷一遍酒精,放入台子照紫外。 2>开始工作:
实验前在更衣间换上紫外照过的白大褂和拖鞋。戴上橡胶手套,75%乙醇擦手,然后用75%乙醇擦一下台面,点燃酒精灯。酒精擦拭胰酶、PBS缓冲液、培养基放入超净台。过火镊子取出离心管于试管架,剪好封口膜备用。用滤菌膜和针管过滤DMSO以除菌。
75%无血清培养基,20%的血清,5%过滤除菌的DMSO,混匀配制成所需的冻存液。
取待用的细胞,旋紧瓶盖。
弃去旧的培养液,挂壁残液注意用酒精棉擦去,用微量枪朝不长细胞的侧壁或顶部打枪,加入适量的PBS缓冲液,缓慢荡洗一下细胞,然后将PBS缓冲液弃掉。用微量枪朝不长细胞的侧壁或顶部打枪,加入适量胰酶约2ml,弃掉枪头。消化数分钟,等待期间,用过火镊子从饭盒中取出冻存管和管盖标记好细胞名称和冻存日期,直立于台面备用。
用微量枪加入适量的完全培养液冲洗(吹散细胞)细胞,将瓶底粘着的细胞吹散下来,再将细胞悬液移入的离心管中,封口,标签。 离心5min,1000转/min。
细胞离心毕,拆封,瓶口及瓶盖在酒精灯上烤一下,弃去上清液。 用微量枪将冻存液平均加入离心管中,混匀离心管中细胞冻存液。 用微量枪将含细胞的冻存液移入冻存管中,封口膜封口,防水医用胶布再缠一圈,标签时间,细胞名称。
冻存,需缓慢冻存,先放置4度冰箱20min,然后放置-20度冰箱30min,再置于-80度冰箱过夜,最后置于液氮灌-196度中保存。 5 铺板和细胞计数
用传代方法制成细胞悬液。倒掉培养基,用PBS液洗涤后,0.25%的胰蛋白酶液消化,加入培养液吹打制成待测细胞悬液转至离心管,封上封口膜,离心1000r/min,5min。
等待离心其间,取细胞计数板,盖玻片酒精擦拭,均在酒精灯上烤一下,将盖玻片盖在细胞计数槽上,使覆盖细胞计数板上的上下两个“十字”区域。取一只新的15ml离心管,做好标记,摆放好。 离心毕,拆封,瓶口及瓶盖在酒精灯上烤一下,弃去上清液,加入全培养液吹散沉淀细胞成细胞悬液,拧紧管盖,上下颠倒混匀。 用枪吹打混匀离心管中含完全培养液的细胞,再从离心管中取1ml细胞悬液移入新的15ml离心管,加入4ml完全培养液,即稀释五倍,吹打混匀细胞悬液,上下颠倒混匀细胞悬液。
上下颠倒混匀新15ml离心管内细胞悬液,计数前将待测液吹打均匀,用微量枪从新15ml离心管中取出细胞悬液(约10μl),滴入计数板上盖玻片的一侧缝隙旁,虹吸作用液体会吸入盖玻片下(不能有气泡,不然会影响细胞计数,注意滴入悬液量不能太大致使细胞悬液流入旁边的槽中),镜下观察细胞,数出计数板四角大方格中的细胞数(16个小格×4个大格),用计数器计数(约200个)
细胞数 万个/mL原液=(4大方格细胞数之和/4)×稀释倍数 (常稀释5倍,若细胞过多不能数清则加大稀释倍数,不断调整新离心管中细胞悬液的细胞浓度,直至镜下观察细胞数目符合要求。) 每皿/瓶需铺板50-100万个细胞,根据细胞计数算出每皿所细胞悬液需毫升数,加入悬液时注意混匀,不得有气泡,吸时注意每次枪尖是否都吸满液体。每皿加入细胞悬液后,用含血清培养基补足至2ml/皿/瓶。24h后观察细胞长至八成满时即可加药处理。
6检验判断细胞状态与加药处理
细胞复苏或传代后24内不可传代,传代4小时后开始贴壁。 1>培养基颜色澄清度:
正常生长的细胞培养基澄清透明,倾斜使培养基聚集,对着灯看可透光,若出现丝状沉淀或倾斜培养基对着灯看出现浑浊不透光且镜下细胞之外的部分有密密麻麻的小黑点,很可能是染菌,应弃掉。若镜检在细胞之外部分有一些浑浊,可能因为细胞代谢旺盛分泌物堆积,或者因为消化时间不够以至于过度强硬吹打细胞,造成细胞损伤产生大量细胞碎片,应换液。
新鲜培养基呈粉红色,代谢代谢旺盛的细胞的培养基会变黄,此时若细胞贴壁应换液,若此时细胞已长满,应传代。 2>密度:
细胞密度过低,镜下观察稀稀疏疏,则生长缓慢,甚至死亡。 较大的细胞密度可促进细胞之间相互作用,促进细胞增殖生长。 密度过大,密密麻麻,部分细胞不能伸展成圆形,必须传代,此时不传代,一两天后细胞状态持续不好,开始死亡,镜检漂浮细胞增多。 3>状态:
镜下观察细胞,当左右上下移动镜头时漂动的是未贴壁细胞或死细胞,固定不动的是贴壁细胞,贴壁细胞是活细胞。
状态良好的贴壁SY5Y细胞有圆形的胞体和细细分支的突触,突触分明。状态不好的SY5Y细胞,突触不明显,看不到什么细细的分支,甚至成圆形。
消化时快离壁的细胞呈亮亮的圆形。
加药前应提前计算好药品浓度体积,根据实验处理要求的浓度换算出每皿应加药品稀释液体积和无血清培养基体积,列成表格以备加药时明确操作。将药品储备液稀释成稀释液,再与相应体积的无血清培养基在离心管中混合好。加COS时,倒掉含血清培养基,PBS荡洗一遍,加以混合好的药品。加COS 3小时后加Ab,Ab须提前37度水浴5小时,加药时采用半数放液法,弃去1ml原培养基,加入1ml已混合好的药品。
第四篇:观察动物细胞教案设计
精
品
文
档
观察动物细胞
●教学目标
知识目标
1.进一步熟练制作临时装片和使用显微镜观察细胞。
2.说明人口腔上皮细胞的基本结构。
3.区别动植物细胞结构的主要不同点。
能力目标
1.提高制作以及观察临时装片的技能。
2.通过对动植物细胞间差别的比较提高学生的观察能力。
情感目标
设计实验、改革实验,开发自己的创新潜能,以此来体会科学探索的思想方法是不断发展的,继续形成“胆大心细”的心理素质;在“模拟制作”活动中,提高学习生物学的兴趣。
●教学重点
1.说明人口腔上皮细胞的基本结构。
2.比较动植物细胞的相同点和不同点。
3.提高实验能力和观察能力。
●教学难点
1.制作临时装片过程中的刮取(首次观察自己身体上的细胞,学生感到新鲜又好奇,取材关系到实验效果)。
2.细胞结构的观察(与植物细胞相比不易观察、略有难度)。
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3.设计实验(应用以往的学习经验,是较高层次的学习)。
●教学方法
谈话法、实验法。
●教具准备
1.教师准备:(1)有关制作人的口腔上皮细胞临时装片的多媒体录像。
(2)人的口腔上皮细胞结构及洋葱鳞片叶肉表皮细胞挂图各一张。
(3)学生分组实验用的生理盐水、稀碘液、消毒牙签、滴管、纱布、镊子、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜、清水和熬好的清洁的琼脂。
2.学生准备:(1)3H铅笔、橡皮、实验报告纸及一些其他动物材料。
(2)各种果脯、小塑料食品袋、线等。
●课时安排
1课时
●教学过程
[导入新课]
教师活动:引入导言
用谈话式教学方法引入本节内容。具体活动如下:
上节课我们通过制作临时装片,观察并认识了植物细胞的基本结构。那么动物和人体细胞的结构是什么样子的呢?它和植物细胞结构一样吗?这节课我们就来解决这些问题。
[讲授新课]
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通过学习临时装片的制作,我们掌握了观察细胞的方法,我想大家一定想看看我们自己身体上的细胞吧?我们通过实验观察人的口腔上皮细胞来观察了解一下。那么人的口腔上皮细胞在哪儿呢?(学生回答,教师作鼓励评价)它就在人的口腔内壁上。如何来取这些细胞,又如何来对它们进行观察呢?请大家自己设计方案。
学生活动:应用以前学习经验设计不同的取样和制片观察的方案,同一组同学之间方案尽量不要一致,以增加对比性。通过相互观察对比,得出一种比较合理的观察方案。互相交流。
教师活动:现在我们对自己的细胞已有所认识,接下来我们再来观察一些其他动物材料的装片,对所观察到的细胞作一比较总结动物细胞的结构。
学生活动:用一些其他材料制作临时装片进行观察、比较总结动物细胞的基本结构,并将所观察到的细胞结构画到实验报告纸上。
教师活动:动物细胞的结构:大家通过观察知道包括细胞膜、细胞质和细胞核三部分。(出示人体口腔上皮细胞和洋葱鳞片叶内表皮细胞挂图)请大家指出二者之间的区别在哪儿。学生回答:动物细胞没有细胞壁、液泡和叶绿体。回答非常正确,以上答案也正是区分动物细胞和植物细胞的主要依据。好了,为了进一步认识动物和人体细胞的结构,我们来做一个动物细胞的模型。请参照“模拟制作”的方法(出示熬好的清洁的琼脂)。
学生活动:利用熬好的琼脂、清水、果脯、塑料袋、线等物,依步骤做一个动物细胞的模型。并指出塑料袋、琼脂和果脯各代表动物细胞的哪些结构。
[课堂小结]
本节课我们通过对各种动物细胞的观察、讨论并总结出了动物细胞的结构,而且还和植物细胞结构作了比较,认识到动物细胞和植物细胞结构之间的区别。为了进一步加深认识,下面我们来做一些课堂练习。
[巩固练习]
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1.人体或动物体的各种细胞虽然形态不同,基本结构却是一样的,都有__________、__________和__________。
答案:细胞膜 细胞质 细胞核
2.动物细胞与植物细胞相比较,没有__________、__________和__________结构。
答案:细胞壁 液泡 叶绿体
3.回忆所做的《观察植物细胞》和《观察人的口腔上皮细胞》的实验。
(1)实验中用洋葱鳞片叶表皮细胞和口腔上皮细胞制作的玻片标本叫__________。
(2)在制作洋葱鳞片叶表皮细胞和口腔上皮细胞实验中,开始在载玻片上分别用滴管滴一滴__________和__________。
(3)洋葱鳞片叶表皮细胞和口腔上皮细胞相比,共同的结构是________________、________________和__________。洋葱鳞片叶表皮细胞还具有__________和__________以及黄瓜表皮果肉细胞的__________是植物细胞特有的结构。
(4)《观察植物细胞》和《观察人的口腔上皮细胞》的实验中染色使用的染料都是__________?
(5)回忆《制作动物细胞模型》的过程,你认为细胞是平面的还是立体的?
答:_______________________________________________________________。
答案:(1)临时装片 (2)清水 生理盐水 (3)细胞膜 细胞质 细胞核 细胞壁 液泡 叶绿体 (4)稀碘液 (5)立体的
4.采取人的口腔上皮细胞时,需要用的工具是
A.消毒牙签
B.消毒棉球
C.消毒镊子
D.消毒玻璃棒
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答案:A 5.制作人的口腔上皮细胞装片时,在载玻片上先滴一滴
A.清水
B.稀碘液
C.生理盐水
D.盐水
答案:C 6.动植物细胞共有的结构是
①细胞壁 ②细胞膜 ③细胞质 ④细胞核 ⑤液泡 ⑥叶绿体
A.①②③
B.②③④
C.②③⑤
D.①⑤⑥
答案:B [布置作业]
按照做动物细胞膜型的思路,设计并动手做一个类似植物细胞的模型。再想一想你所用的每一种材料相当于植物细胞的哪种结构。
●活动与探究
(1)选取植物的茎的横切片、叶的横切片、根的纵切片,通过观察认识植物的各种组织细胞,同时训练显微镜的使用技术。
(2)选取动物的结缔组织、神经组织、肌肉组织、上皮组织切片,观察认识各种动物的组织结构特点。
●板书设计
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第三节 观察动物细胞
一、动物细胞基本结构
二、动植物细胞结构的区别
动物细胞结构没有:
1.细胞壁
2.液泡
3.叶绿体
●备课资料
一、临时装片的制作
生物体细胞的结构我们用肉眼不易看清,必须制成玻片标本,放在显微镜下才能观察清楚。玻片标本的好坏直接影响观察的效果及观察的真实性。临时装片的制作虽然比较简单,但它是我们今后制作切片和其他生物装片的基础。因此,要熟练掌握临时装片的制作方法,充分理解第一步操作对装片质量都有很大的影响。因而,制作玻片标本时,必须先将载玻片和盖玻片擦干净,因为极小的灰尘或其他异物经过显微镜放大后都会妨碍观察;取材,除了材料要典型、完整、薄而透明外,所取的材料不宜太大,取好的材料还应展平,不能重叠、卷曲,否则都将影响观察效果,制作临时装片时,要在载玻片中央滴一滴清水,其目的是为了保持材料的新鲜,防止干缩,保证观察效果。
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二、结构的结构和功能
细胞的结构和功能是生物学知识的基础,清楚细胞的结构,才能理解细胞的分裂和生长,才能理解组织、器官、生物体的概念,也才能更好地理解细胞是构成生物体结构和功能的基本单位。学习中,一定要弄清楚小小的细胞由哪几部分组成,每部分的名称和它们具有的功能。观察细胞时,要注意将实际物像与课本上的图对照,便于弄清细胞的知识。怎样理解细胞是构成生物体结构和功能的基本单位呢?从结构上看,生物体的最小单位是细胞,就像盖房用的一块块的砖,因此,细胞是生物体结构的基本单位。从功能上看,细胞的分裂和生长等生命活动也是以细胞为单位进行的。在细胞分裂中,首先是细胞核一分为二,随后细胞质也分成两份,并形成新的细胞膜等结构,由一个细胞分裂成两个细胞,分裂出的小细胞,不断吸收营养物质,体积由小变大,所以,细胞又是生物体功能的基本单位。
三、观察细胞立体结构
实验准备:成熟的苹果、稀释的紫药水(紫药水与水的比例为1:6)、针、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、显微镜、吸水纸。
操作方法:用手将成熟的苹果掰开,用针挑取成熟的果肉细胞放在载玻片上,制成临时装片。加一滴稀释的紫药水,在盖玻片上轻轻压一下,放在显微镜下观察,就能看到一个个多角、多面的立体形细胞,用针慢慢推动盖玻片,能看到分离的果肉细胞的在滚动着,细胞的几个面就看得很清楚了。在制作装片时,水不要滴得太多,否则细胞在水中移动,推动载玻片时,就不易看到细胞的滚动。
四、细胞膜的主要功能
细胞膜有多方面的重要功能,它与细胞的物质交换、细胞识别、分泌、排泄、免疫等都有密切的关系。
活细胞不停地进行新陈代谢作用,它必须不断地与周围环境交换物质,物质通过细胞膜进出细胞。离子和小分子物质进出细胞主要通过自由扩散和主动运输等方式,而大分子和颗粒性物质主要通过内吞作用进入细胞。
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自由扩散 这种方式是被选择吸收的物质,从浓度高的一侧通过细胞膜向浓度低的一侧转运,例如O
2、CO
2、甘油、乙醇、苯等物质,可以从浓度高的一侧转运到浓度低的一侧。这种物质出入细胞的方式叫做自由扩散。自由扩散不需要消耗细胞内新陈代谢所释放的能量,是一种简单的运输方式。这种方式与主动运输相比,叫做被动运输。
主动运输 主动运输的特点是被选择吸收的物质是从浓度低的一侧,通过细胞膜运输到浓度高的一侧,必须有载体蛋白质的协助,需要消耗细胞内新陈代谢所释放的能量(下图)。例如,轮藻细胞中K的含量比它所生存的水环境中的K多63倍。人的红细胞中K的浓度比血浆中K的浓度要高出30倍,而红细胞中Na的浓度却是血浆中的1/6。可见,轮藻细胞和人的红细胞具有不断地积累K和运出Na的能力,以致不会使细胞膜内外的K和Na的浓度达到平衡。因为这种物质出入细胞的方式,一般是物质从浓度低的一侧运输到浓度高的一侧,所以,需要消耗细胞内新陈代谢所释放的能量。
+
+
+
++
++
+
+
主动运输这种物质出入细胞的方式,能够保证活细胞按照生命活动的需要,主动地选择吸收所需要的营养物质,排出新陈代谢产生的废物和对细胞有害的物质。可见,主动运输对于活细胞完成各项生命活动有重要作用。
五、细胞质基质
在细胞质基质中,含有水、无机盐离子、脂类、糖类、氨基酸和核苷酸等,还有很多种酶。细胞质基质是活细胞进行新陈代谢的主要场所,细胞质基质为新陈代谢的进行,提供所需要的物质和一定的环境条件。例如,提供ATP、核苷酸、氨基酸等。
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在细胞质基质中,悬浮着多种细胞器,主要有线粒体和叶绿体,此外还有内质网、核糖体、高尔基体、中心体和液泡等。
六、细胞核的结构
用电子显微镜观察经过固定、染色的有丝分裂间期的真核细胞,可以看到细胞核的主要结构有核膜、核仁和染色质等。
核膜 核膜包围在细胞核的外面,由内外两层膜构成,把细胞质与核内的物质分开。在核膜上有许多小孔,叫做核孔。核孔是细胞核和细胞质之间进行物质交换的孔道。大分子物质可以自由通过核孔而进入细胞质内,如细胞核内的信使RNA。
离子和比较小的分子,如氨基酸和葡萄糖,可以通透核膜。在核膜上有大量的多种的酶,这有利于各种化学反应的顺利进行。
核仁 在大多数真核细胞间期细胞核内,核仁是最显著的结构,因为它的折光性较强,与细胞的其他结构很容易区分。核仁通常是匀质的球形小体。在细胞有丝分裂过程中,核仁周期性地消失和重建。
染色质 染色质这个名词最早是德国生物学家瓦尔德尔(H.W.G.von Waldeyer,1836~1921)提出来的,主要是指细胞核内容易被碱性染料染成深色的物质,因此叫做染色质。染色质主要由DNA和蛋白质组成。
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在分裂间期细胞核中,染色质呈细长的丝状,并且交织成网状,这是细胞间期遗传物质存在的特定形态。当细胞进入分裂期时,每条染色质细丝就高度螺旋化,缩短变粗,成为一条圆柱状或杆状的染色体,这是细胞分裂期遗传物质存在的特定形态。因此,染色质和染色体是细胞中同一种物质在不同时期的两种形态。
七、细胞核的主要功能
细胞核是遗传物质储存和复制的场所,是细胞遗传特性和细胞代谢活动的控制中心,因此,它是细胞结构中最重要的部分。
大量科学实验表明:凡是无核的细胞,既不能生长也不能分裂,如成熟的红细胞。人工去核的细胞,一般不能存活多久。例如变形虫去除细胞核以后,新陈代谢减弱,运动停止,当重新移入细胞核后,又能够恢复生命活动。由此可见,细胞核在细胞生命活动中起着决定性的重要作用。
八、细胞核核膜的结构特点
在细胞核的外围有双层膜结构,称为核膜。核膜是核的边界,由内外两层单位膜组成。核膜的每层膜厚约6.5 nm,两层膜间隔10~50 nm的空隙,称为核周腔。有的细胞中,可看到核周腔同内质网的腔隙相连通。在核膜外层的外表面上有颗粒状的核糖体,有合成蛋白质的功能。内层核膜与染色质纤维相连,不仅染色质纤维的两端连在核膜上,而且染色体的松散部分也常位于核孔的附近。
核膜并不是完全连续的,有许多部位核膜内外两层互相连接,形成了穿过核膜的小孔,称为核孔。核孔是核质与细胞质进行物质交换的重要通道。核孔不是单纯的小孔,结构相当复杂,因此这种小孔又叫核孔复合体。核孔的直径大约70~80 nm,核孔通道的直径约9 nm。核孔的密度和总数因细胞类型不同而异。转录活动低或不进行转录活动的细胞,核孔很少。核孔在核膜上的分布不均匀,有一定的区域差别,核质与细胞质之间物质交换旺盛的部位核孔数目多。
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核孔是核区与细胞质进行物质交换的重要通道。在核中装配好的核糖体亚单位,就是穿过核孔复合体进入细胞质的。但是,不是所有的RNA都可以自由穿过核孔,只有在核内经过处理成为mRNA后才能穿出核。
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第五篇:《观察动物细胞》教学反思
生物团队 姚超
通过这次讲课,我不仅能力得到了锻炼,而且学到了很多东西。通过集体备课、说课、评课。让我觉得集体的智慧是无穷的,也从其他老教师身上学到了有效的教学经验,找到了自己的不足。比如各个环节时间的安排上和对学生的启发上的不合理之处等等,尤其是实验环节上。
这节课主要是实验内容,我在比赛前精心制作了课件,在这节课中我也尝试着运用了它,结果很好!既调动了学生的积极性,也增加了知识的趣味性!利用多媒体技术辅助展示实验过程中遇到的疑难问题,化难点、抽象点为形象生动的动画,勿庸置疑,这种教育技术的优势是传统教学手段所无法比拟的。它具有传统教此文转自斐.斐课件.园 FFKJ.Net学手段所没有的趣味性、直观性,这充分调动了学生的积极性、主动性和创造性,突破教学的重难点,从而能更容易地达到了教学目的,使学生在愉快、轻松的环境中获得知,识培养了技能。因此多媒体辅助教学逐渐成为目前教学技术手段的主流之一。
在教学设计中充分考虑合作学习,让学生在合作探究中大胆质疑解疑。例如:动物细胞为什么没有细胞壁?讨论的形式灵活多样,同桌互帮、小组研讨,为学生充分表现、合作、竞争搭建舞台,使学生思维碰撞,闪现思维火花,激发表现欲,促进创造思维的发展。
在作业的设计布置上,为了激发学生自主、合作、探究的学习兴趣,针对课的特点,让作业开放性,拓展性的作业可激发学生学习和探究的兴趣,同时也为课堂所学的知识能更好地运用于实际做了很好的迁移。
有限的课堂需要我们教师深究教学目标、吃透教材、借用网络,图书合理运用课堂探究教学来激发学生无限的潜能,发挥出生物课堂的有效性和实效性。课堂教学设计体现以学生的发展为本的精神和“根植生活,让生物知识在实际生活中鲜活起来”的理念。无论是问题的提出,还是问题的解决,都有意识地营造一个较为自由的空间,让学生主动地去观察、分析、发现,使学生真正成为教学的主体。
本节课中我对课堂的时间的安排考虑不全面,时间分配不当,对课堂上学生的提问层次估计不足,以至于回答时没有顾及学生的感受。通过这节课的教学尝试,使我感受到了改变教学方法的重要性以及得到良好效果的快乐,也看到了学生的那种渴望创新、探索、渴求表现的要求,也使我看到了学生们的巨大的潜能,更大的发展性、可塑性,对于我在今后教学中给予学生更大的发展空间提供了基础。我会不断实践、不断学习、不断反思来不断的提高自己的教学水平。成为一名受学生欢迎的老师和朋友,达到一种“亦师亦友”的境界。
总之,在今后的教学中我会发挥自己的优势,多利用多媒体教学,也会多向其他教师学习,取长补短。 预设兴趣点达标情况:
1.兴趣导入:以学生熟悉的生活中的实例“鸡蛋”为例,提出疑问,“鸡蛋中有细胞吗?”激发学生的兴趣,自然引入这节课的主题:观察动物细胞; 2.以“人的口腔上皮细胞为例”让学生观察自身的细胞,极大提高了学生的好奇心,引导学生 积极进行观察;
3.通过学生自己动手制作动植物细胞的模型,比较动植物细胞结构的异同点,提高学生的动手能力和分析问题的能力。