第一篇：果蔬中的酶促褐变
苹果褐变实验设计
实验设计
实验名称：探究不同条件对苹果褐变的影响及褐变中酚类物质含量变化
实验成员：高二(15)班 刘向华 伍晓雅 江宽
实验目的:通过探究，了解苹果褐变的影响因素(本次试验涉及到酸碱度、温度、氧气、不同溶液环境及将苹果榨成汁对褐变的影响)，及此过程中酚类物质含量的变化，可以借此了解不同的条件对酶促氧化反应的影响，同时可以为今后日常生活中的蔬果保鲜提供一个参照依据，有很好的现实意义及很强的合作性、操作性。
实验原理：苹果褐变过程中酚类物质受到因为切快而从细胞内释放出的多酚氧化酶及氧气的共同影响，发生氧化反应，生成醌而使氧化表面呈现棕褐色，通过观察变色情况，可以知道褐变程度。酚类物质会与三价铁离子发生显色反应，故可据此研究褐变过程中酚类物质含量的变化。
实验假设：随着褐变的进行酚类物质会减少，温度、PH越高或降低及低浓度的氧气都会一定程度抑制褐变，高温处理后苹果褐变程度将非常弱，榨成汁的苹果褐变速度极快。
实验材料：
试剂:0.1mol/L NAOH 0.1mol/L HCL
NACL溶液 NAHCO3 溶液 NACO3 溶液 CH3COOH 溶液 蒸馏水 100℃开水 冰水混合物 一定浓度FECL3 溶液
食用油
器材：苹果三个、试管14支、试管架、烧杯3个、温度计、200ml量筒1个、 镊子、纱布 榨汁器、水果刀2把
实验步骤： 第一部分：
1.用量筒，分别配制100ml PH分别为3和11的HCL、NAOH溶液，分别转移至两个试管中，编号
1、2。
2.用量筒量取等量的蒸馏水、NACL溶液、NAHCO3溶液、NA2CO3溶液、CH3COOH溶液，分别倒入五支试管中，编号
3、
4、
5、
6、7。
3.向三个烧杯中分别倒入80℃热水、冰水、30℃温水，各放入一支试管编号为
8、
9、10。4. 将两个苹果分别切成等大的立方体，取20块每组2块同时投入到10支试管中。 5.取两块苹果，浸泡在100℃开水中10S后拿出，放入一支试管中编号11。
5.另取四块苹果分成两组分别置于一支装有常温下蒸馏水及一支装有食用油，一支空试管中作。
6. 20分钟后观察并记录各试管内苹果块变色情况。
第二部分：
1. 取一个苹果，榨成汁，分成两份放入两个烧杯中，等体积稀释。 2. 其中一个杯中的苹果汁立刻用纱布过滤到另一个烧杯中，向滤液中滴加FECL3溶液观察溶液变色情况，并拍照。
3. 另外一个烧杯放在常温室内静置20分钟，二十分钟后过滤，向滤液中滴加FECL3溶液观察溶液变色情况并与前一实验变色情况作对比。
第二篇：酶处理在果蔬汁加工中的应用
1.豆奶的主要质量问题是什么?如何控制? 2.酶处理在果蔬汁加工中的应用
3.举例说明稳定剂的作用原理及在果蔬汁饮料中的应用 4.举例说明乳化剂的乳化原理及在豆乳饮料中的应用 2.酶处理在果蔬汁加工中的应用
摘要：多酚氧化酶带来的酶促褐变是水果、蔬菜加工成果蔬汁过程中引起营养价值、外观品质等降低的主要原因之一，直接导致巨大的经济损失。就酶促褐变的机理、条件以及抑制方法作一综述，通过物理、化学以及生物的处理方法可以有效地抑制果蔬汁加工过程中的酶促褐变。
褐变在果蔬汁加工、储藏过程中会经常发生，严重影响商品的外观和营养品质。褐变一般可以分为两类：一类是有酶参与催化多酚类物质氧化的酶促褐变;一类是如美拉德反应、焦糖化作用产生的褐变，称为非酶褐变。果蔬汁加工过程中的褐变主要是由酶引起的酶促褐变，而且以多酚氧化酶引起的酶促褐变最为明显。本文就酶促褐变的机理、条件以及抑制方法作一综述，旨在为果蔬汁加工、储藏过程中酶促褐变的控制提供依据。
1 酶促褐变的机理酶促褐变是果蔬中的多酚类物质在多酚氧化酶的作用下被氧化形成醌及其聚合物的反应过程。一般认为，果蔬的酶促褐变主要是由于果蔬中富含的多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase，简称PPO)催化酚类物质的氧化反应引起的。PPO 能催化果蔬中游离酚酸的羟基化反应以及羟基酚到醌的脱氢反应，醌在果蔬体内自身缩合或与细胞内的蛋白质反应，产生褐色色素或黑色素。在果蔬体内，PPO 主要存在于完整的细胞质体和微体中，而PPO 的底物主要存在于液泡中，处于潜伏状态，在完整的细胞中作为呼吸传递物质，在酚-醌之间保持着动态平衡，不发生酶促褐变。当新鲜的果蔬在加工过程中组织被损伤，氧大量侵入，酶原被激活，酚类物质经酶的催化作用氧化为醌类物质，从而引起褐变反应[1]。
2 酶促褐变的控制2.1 酶促褐变的条件
从酶促褐变的反应机理中可以看出，酶促褐变必须具备4 个条件：①氧的存在;②酶的作用;③含Cu2+辅基的参与;④酶与底物的结合[2]。因此对酶促褐变的抑制就是通过采用物理的、化学的以及生化手段等方法来切断或控制其任何一个环节。
2.2 褐变的控制方法 2.2.1 二氧化硫及亚硫酸盐
二氧化硫及亚硫酸盐对果蔬的酶促褐变的抑制效果很好，而且持续时间长。它们既可以直接作用于酶本身，降低对单酚和二酚类的催化反应活性，又可与反应中生成的醌类物质结合形成无色物质。同时，亚硫酸还有漂白和抑制微生物生长的作用[3]。虽然二氧化硫和亚硫酸盐对果蔬中的褐变有高效的抑制作用，但是亚硫酸盐用于食品中会对人的健康产生影响，已经被限制使用，所以人们都致力于研究亚硫酸盐的替代品。 2.2.2 抗坏血酸
抗坏血酸是近年来食品工业中应用最多的褐变抑制剂，它在酶反应体系中的作用是相当复杂的。它既是还原剂可以还原醌类物质，而且还可以作为铜离子的螯合剂，通过-OH 与多酚氧化酶的辅基Cu2+螯和，也可以直接被多酚氧化酶氧化，起到竞争性抑制作用。抗坏血酸的添加量十分关键，添加量过少，不仅不能抑制褐变，反而易与
氨基酸反应促进羰氨反应造成非酶褐变;添加量过多，成品在贮存期间，特别是在较高温度下，由于氧化后所形成的酮化合物与氨化合物发生非酶促褐变反应，从而加剧成品的变色[4]。近年来对抗坏血酸和其他抑制剂联合使用效果的研究比较多。 2.2.3 L-半胱氨酸
L-半胱氨酸也是一种强效抑制剂，其抑制褐变的机制归纳起来为：一是醌类物质能与半胱氨酸形成无色的复合物，阻止了醌类物质聚合而不能形成的色素物质;二是半胱氨酸可通过与PPO活性位点的铜离子不可逆结合而抑制酶活性，或者替代PPO 活性位点的组氨酸残基;三是半胱氨酸并非阻止PPO 氧化酚类，而是阻止酚类的聚合[5]。但是L-半胱氨酸会产生令人不愉快的气味，破坏产品风味，所以近年来致力于研究L-半胱氨酸与其他抑制剂联合使用的效果。 2.2.4 曲酸
曲酸及其衍生物对酪氨酸酶(或称多酚氧化酶PPO)有强烈抑制作用，20μg/ml 浓度的曲酸就可抑制不同来源的酪氨酸酶的70%~80%的活力。另外曲酸具有抗氧化性，它的酚羟基可以被还原;它还可与Fe、Cu、Mn 等金属离子发生螯合反应。刘波[6]发现曲酸在苹果汁褐变中的抑制率可以达到70%~80%。 2.2.5 酸化剂
引起酶促褐变最适宜的pH 范围在4~7 之间。降低介质中的pH，可以控制酚酶的活性，抑制其催化作用。一般通过添加酸控制pH 在3 以下，酚酶的活性就几乎可以完全丧失。常用的酸有柠檬酸、苹果酸、抗坏血酸及其它有机酸混合溶液。 2.2.6 4-乙基间苯二酚(4-HR)
4-己基间苯二酚(4-HR)是一种新型抗氧化剂，是酪氨酸酶的有效抑制剂，其化学稳定性相当好，安全性高，对酚酶抑制力强，已被推荐用于防治果蔬产品的酶促褐变，具有良好的应用前景。Luo等报道，0.005% 4-己基间苯二酚(4-HR)对苹果片的褐变已有明显的抑制作用[7]。谢绍萍等报道，当4HR 添加量≥0.1%时，对香蕉浆液的护色有较好的效果[8]。4-己基间苯二酚也被证实能够有效地抑制蘑菇、鲜切梨、马铃薯的酶促褐变。 2.2.7 复合抑制剂
近年来研究最多的就是各种褐变抑制剂的联合作用，许多报导都显示了复合抑制剂的效果远好于单一抑制剂。H. Ozoglu 等报道了0.49mM 的抗坏血酸、0.42mM 的L-半胱氨酸和0.05mM 的肉桂酸的抑制剂组合在苹果汁中的褐变抑制效果远好于单一抑制剂的效果[9]。 2.2.8 杜仲叶提取物
杜仲作为一味中药，在我国应用很广泛。杜仲叶也有很好的保健效果，如镇静、镇痛、降压、抗炎等作用。Min-Kyung Lee 等报导了杜仲叶提取物在许多果蔬汁中都有很好的抑制褐变的效果，而且耐酸耐碱，是一种很好的褐变抑制剂[10]。杜仲 叶提取物抑制褐变的机理还未明确，实验中杜仲叶提取物经过透析以后褐变抑制效果大大降低，表明其中抑制褐变的主要成分应该是一些小分子物质。 2.2.9 洋葱提取物
洋葱作为一种蔬菜在我国食用也很广泛，具有抗氧化、降血糖、杀菌、抗癌等保健效果。Mi-Jeong Kim 等报导了洋葱提取液在梨果汁中具有不错的抑制效果[11]。但是洋葱的褐变抑制机理还不明确。洋葱中含有微量元素硒，是一种很强的抗氧化剂，除此外还含有L-半胱氨酸和类黄酮物质，洋葱提取物中的这些成分可能是褐变抑制效果的主要成分。但是洋葱提取物有强烈的刺激气味，用于果汁中会对风味造成很大的影响。 2.2.10 桑树皮和桑树枝提取物
中药中的桑白皮具有降血糖、利尿、抗人艾滋病毒、降血压、抗菌等作用。李海涛等报导了桑白皮和桑树枝条提取物在浑浊苹果汁中具有很好的抑制效果[12]。从桑白皮中分离提取的桑皮苷A和氧化白藜芦醇也具有很好的抑制褐变效果，很可能是桑白皮和桑树枝条提取物抑制褐变的主要成分。但是桑白皮和桑树枝条提取物的褐变抑制 机理还不明确。
3 展望
控制果蔬汁在加工、储藏过程中的酶促褐变，提高果蔬汁产品的营养价值和外观品质是人们长期关注的问题。目前，人们已经从原料选择、酶活性和酶促反应的抑制、反应产物的改变、氧气的控制等多方面入手，找到了多种控制果蔬汁中酶促褐变的有效方法。但是因为果蔬中的PPO 具有特异性，根据果蔬品种的不同，各种褐变抑制剂的抑制效果也不尽相同，都存在着一定的局限性。同时，由于过氧化物也会引起酶促褐变，还应结合过氧化物引起的酶促褐变以及非酶褐变一同加以研究，才能找到控制果蔬汁褐变的理想方法。
第三篇：【典型题】酶促反应速率问题的研究
[2003年上海高考生物第11题]下图纵轴为酶反应速度，横轴为底物浓度，其中正确表示酶量增加1倍时，底物浓度和反应速度关系的是
命题者提供的参考答案是B。但在K12生物论坛的讨论中，很多老师认为应该选A。也有老师说虽然知道应该选B，但总觉得理由不充分。笔者认为，要正确理解这道题目，首先是必须弄懂酶促反应速度(题目中如此，其实正确的说法，应该称为“酶促反应速率”)的含义，其次要有酶促反应的动力学的有关知识作为基础。下面，笔者先把那些认为应该选A的老师提出的理由整理出来，然后介绍酶促反应速率的含义以及酶促反应的动力学的有关知识，并在此基础上阐述该题正确答案是B的理由。 1 许多老师错误地选A的理由
先观察A、B选项中任何一条曲线，曲线的前半段，随横坐标底物浓度的增加，纵坐标酶促反应速度也增加，说明底物浓度是此时反应速度增加的限制因素。此时，即使增加酶量也不会使反应速度也增加。而曲线的后半段反应速度不再随底物浓度变化而变化，说明底物足够，此时底物浓度已不是反应速度增加的限制因素了;此时，酶的数量则相对不足，此时增加酶量会使反应速度加快。综上所述，正确的曲线应该是最初两条曲线重合，底物浓度足够多时才能体现出酶的数量对反应速度的影响。 2 酶促反应速率的概念
酶促反应的速率(v)，一般是以单位时间内底物被分解的量来表示的。假设x克蔗糖在t时间内被一定的蔗糖酶水解为葡萄糖和果糖，则x/t即为蔗糖酶反应的速率。
酶促反应在开始的初期速率较大，一定时间后，由于反应产物浓度逐渐增加，反应速率渐渐下降，最后完全停止。如果底物浓度相当大，而pH及温度又保持恒定，则在反应初期的一定短时限内，酶的反应速率尚不受反应产物的影响，可以保持不变。故测酶的反应速率一般只测反应开始后的初速，而不是测反应达到平衡时所需要的时间。 3 酶促反应的动力学(影响酶反应的因素)的相应知识
酶促反应的速率是受酶浓度、底物浓度、pH、温度、反应产物、变构效应、活化剂和抑制剂等因素的影响的。下面仅讨论与此题有关的酶浓度和底物浓度的影响。 3.1 酶浓度的影响
在有足够底物的情况下，而又不受其他因素的影响，则酶的反应速率(v)与酶浓度成正比。即
v=k[E]………………………………(1) k为反应速率常数，[E]为酶浓度。
因为有底物足够的条件，因此，对任一酶浓度[E]，由(1)式求出的酶的反应速率v应当就是在该酶浓度下的最大反应速率Vmax。 3.2 底物浓度的影响(米氏方程)
实验证明：当酶浓度、温度和pH恒定时，在底物浓度很低的范围内，反应初速与底物浓度成正比;此后，随着底物浓度的增加，反应速率的增加量逐渐减少;最后，当底物浓度增加到一定量时，反应速率达到一最大值Vmax，此时再增加底物浓度也不能使反应速率再增加。1931年，Michaelis与Menten根据中间产物理论提出了能表示整个反应中底物浓度与反应速率关系的公式，称Michaelis-Menten方程或简称米氏方程：
1 v=Vmax[S]/(Km+[S])………………(2)
公式中，v为反应速率，Vmax为最大速率，Km为米氏常数。
Km是酶的特征常数之一，在数值上等于酶促反应速率达到最大速率一半(v=Vmax/2)时的底物浓度，单位为mol/L。 4 正确答案是B的理由
对于底物浓度较大时，增加酶量可以增大反应速率这一结论，大家都没有异议。现在大家争议的焦点，就是在底物浓度很小时，增加酶量能否增大反应速率?对于这一问题的不同回答，决定上述高考题的答案选择：如果回答是肯定的，那么此题的正确答案是B;反之，正确答案就是A了。下面笔者为大家仔细分析一下这个问题。
上述题目中只涉及一种酶，从上面引述的酶促反应的动力学的相关知识中我们看到，对于同一种酶来说，Km为定值。题目中涉及的酶浓度有2种，从上面引述的酶促反应的动力学的相关知识中我们看到，酶的最大反应速率Vmax与酶浓度[E]成正比。而根据米氏方程，酶的反应速率v与最大速率Vmax成正比。由此我们可以得出结论：在底物浓度一定时，酶促反应速率v与酶浓度[E]成正比。即使在底物浓度[S]很小时，酶的浓度不同，反应速率也不会相同。酶的浓度增加1倍，反应速率也会相应增加1倍。
这样看来，上面这道题只能选B，不能选A，理由是很充足的哦! 5 从中学生物范围内怎样理解这道题
从上述分析中我们看到，要透彻理解这道，需要有关酶促反应的动力学方面的基础知识，而这些知识是中学教材中没有涉及到的，甚至中学生物教师用书上也没有。因此，尽管这道题并没有什么错误(“反应速度”的提法不妥除外)，但有超纲之嫌。
如果要求在中学生物知识的范围内，对这一道题作出合理的解答，确实比较困难。下面推荐K12生物论坛中一些老师提出的解释：这个题目中影响整体反应速度的因素有两个：一是底物浓度，一是酶的浓度。所以当底物浓度不变时，酶的浓度决定反应速度;当酶的浓度不变时，底物浓度决定反应速度。两个浓度都变时，共同决定反应速度。老实说，笔者尽管倾向于支持上述说法，但也觉得它无法圆满解释在底物浓度很低的情况下，为什么增加酶量能够加快反应速度。所以笔者想，这可能也算是一个没有办法的办法罢。 12月19日补记：最近又有人在K12论坛上讨论这个试题，网友“小黑牛”提出了下列观点，似乎有利于在中学知识范围内解释清楚这个试题：中间产物学说(E+S-----ES-------E+C+D)认为，酶也是反应物，只是在这样的反应中，反应了的酶又能重新生成。由于酶也是反应物，所以增加反应物浓度或增加酶的浓度，反应速率都会增大。 参考文献：
1 郑集：普通生物化学，人民教育出版社
2 张玉中、阎一林：基础生物化学问答，科学普及出版社
2
(2011上海高考)下图实线表示联苯水解酶催化的反应速率与酶浓度的关系，虚线表示在其他条件不变的情况下，底物浓度增加一倍，反应速度与酶浓度的关系，能正确表示两者关系的是(
)
答案：B
第四篇：什么是果蔬固体饮料 果蔬固体饮料简介
济南体恒健生物工程有限公司(山东新稀宝股份有限公司)位于国家级开发区——济南高新技术开发区大学科技园内，由山东省优秀青年企业家汤传忠先生创办于1995年。本公司是一家立足于微量元素领域，集科研、开发、生产、经营、销售于一体的高新技术企业，是山东省首家通过GMP认证的保健食品企业，拥有大型的现代化生产基地和先进的机械设备，具备雄厚的技术力量和优良的工作环境。
公司旗下保健品有育之缘口嚼片、养肝片、钙之缘片、铁之缘片、硒维康口嚼片、佳锌口嚼片等。
应广大消费者的要求，体恒健生物工程有限公司又推出了一系列的果蔬固体饮料，之所以称之为果蔬固体饮料，是因为固体饮料是食品药品监督管理局对要求营养品厂家对颗粒状QS产品的专业称谓。并不是老百姓日常生活中所谓的“饮料”或“饮品”。印在生产标签上的固体饮料是指药物的粉末与适宜的辅料分别筛选并混合后，制成颗粒的一种工艺。
公司旗下新研发的产品有体恒健牌DHA果蔬固体饮料、体恒健牌VB族果蔬固体饮料、孕多维果蔬固体饮料。
DHA产品介绍：
DHA是二十二碳六烯酸的缩写(俗称“脑黄金”)，属于Omega-3不饱和脂肪酸，是人体必需脂肪酸。人体无法自然合成，只能通过膳食补充才能获得。广泛存在于人体的大脑、视网膜、心脏及母乳当中。
【产品名称】DHA果蔬固体饮料
【配料】柠檬粉、DHA藻油粉、花生四烯酸粉、低聚半乳糖、食品添加剂(木糖醇、三氯蔗糖)
【产品标准号】Q/TCZ0006S
【生产许可证】QS3701 0601 5387
【食用建议】加入牛奶、奶粉或其他辅食中搅匀后冲饮。每日1次，每次1-2袋
【生产日期】见包装外盒
【贮藏方法】密封，置阴凉干燥处
【保质期】24个月
VB族产品介绍：
维生素B族每天在体内仅存6小时
极易缺乏，维B族在食物贮藏和加工过 程中极易流失，在人体 内还不能储存，因此维B族缺乏症十分常见。(必须每天补充、维B族全是水溶性维生素，在体内滞留的时间
只有3-6小时，必须每夭补充，才能满足人体所需。(必须一起补充.维B族各有不同的作用，但又相辅相成，犹如 “木桶原理”，若单独摄入某种VB，由于细胞的活动增加，从而使对其它VB的需求跟着增加。所以只有按照科学比例一起补充才利用率最高、最有效。营养专家提醒:您需要每天需按时补充维生素B。
产品营养成分说明：
(营养成分表)
【产品名称】体恒健牌VB族果蔬固体饮料
【配料】维生素B
1、维生素B
2、维生 素B
6、维生素B9(叶酸)、维生素B3(烟酰胺)、维生素B5(泛酸)、维生素C、维生素A、维生素E、牛磺酸 低聚半乳糖、番茄果蔬粉、木糖醇
【产品标准号】Q/STCZ0006S
【生产许可证】S370106015387
【推荐用量】每日1次，每次1-2袋
【服用方法】本品取37度左右的100ml温开水冲服。
孕多维产品介绍：
一定要用37℃的以下的温开水哦，水温过高会使部分营养流失!12+孕多维四大优势，帮助孕妈妈健康、快乐的渡过孕期
一. 12种维生素、矿物质，全面补充孕妇营养
二. 特别添加牛磺酸，有助胎儿大脑及视力发育
三. 天然柠檬果载体，安全温和，口味好、易吸收
四. 最佳维生素B族配比，有效缓解孕吐反应
【品牌】体恒健
【贮藏方法】 通风、阴凉干燥处保存
【名称】 孕多维(果蔬固体饮料) 生产日期 见外包装盒
【规格】 6g×30袋(1盒) 保质期限 24个月
【口味】 柠檬
【生产许可】 QS370106015387
【产地】 山东省济南市
【执行标准】 Q/TCZ 0006S
【营养成分】 每100g含：叶酸400ug、维生素A 1000ug、维生素B1 1.8mg、维生素B2 1.8mg、维生素B6 1.8mg、维生素C 150mg、维生素D3 1.6ug、维生素E 14mg、烟酰胺(维生素B3)20mg、钙800mg、铁18mg、锌15mg、牛磺酸120mg
【服用方法】
1、将一小袋沿角位撕开
2、倒入水杯100毫升37℃以下的温开水
3、直接将一袋本品加入温开水中
4、充分搅拌均匀后即可使用
【服用建议】 建议与早餐同服，如早孕反应严重者，可在中餐、晚餐后服用。
第五篇：果蔬采购合同
水果、蔬菜采购合同
买方：_________
合同编号：_________
卖方：_________
签订时间：_________
为明确买卖双方的权利义务关系，双方就收购果菜的有关事宜订立如下条款：
一、果菜交售品种、数量、价格
1.分周月分旬交售果菜的品种、数量、日期由双方另行约定(详见每次清单)。
二、质量要求
1.符合《农产品质量安全法》的规定;
2._________。
三、收购时间、地点与方式
果菜交售时间由双方协商，买方须提前一天提出次日应交售的品种、数量，并以书面方式通知卖方。
交货地点：_________。
运输方式与费用分担：_________。
四、包装要求与费用承担
买方提供包装标准及材料，负责包装费用，卖方按买方要求进行包装。
五、合同期限
自_________年_________月_________日至_________年_________月_________日止。
六、买方的权利和义务
1.及时验收卖方交售的果菜，收货后月结果菜款。
2.有权拒收卖方交售的不合格果菜，但必须向对方说明理由。
七、卖方的权利和义务
1.必须按照果菜用药规定施用农药，严禁对果菜使用剧毒农药。
2.保证按合同约定的品种和数量种植果菜。
八、争议解决方式
本合同在履行过程中发生的争议由双方协商或向_________申请调解，如协商、调解不成，按下列第_________种方式：
1.提交_________仲裁委员会仲裁;
2.依法向人民法院起诉。
九、本合同自双方签字盖章之日起生效。本合同未尽事宜，按照《合同法》等国家有关规定，经合同双方协商，作出补充规定附后。
本合同一式二份，合同双方各执一份;合同副本一份。
买方：(签章)_________
卖方：(签章)_________
法定代表人：_________
法定代表人：_________
委托代理人：_________
委托代理人：_________
电话：_________
电话：_________